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沉水植物附着细菌数量测量方法

发布时间:2023-07-16 22:38:11

如何对土壤中细菌、放线菌及霉菌数量进行测定,要求设计实验方案!求指点,谢谢啦!

【实验内容及步骤】
一、分离
1. 制备土壤悬液及系列稀释液
称取土壤1g,放入99mL无菌水的三角瓶中,振荡10min,即为稀释10-2的土壤悬液。另取装有无菌试管5支,用记号笔编上10-3、10-4、10-5、10-6 、10-7 。在每只试管中用无菌吸管加入4.5ml无菌水。取已稀释成10-2的土壤液,振荡后静止0.5min,用无菌吸管吸取0.5mL土壤悬液加入10-3的无菌水的试管中,并在试管内轻轻吹吸数次,使之充分混匀,即成10-3土壤稀释液。同法依次连续稀释至10-4、10-5、10-6、10-7土壤悬液。
2. 倒平板
将已经配制好的牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、薯仔培养基在电热炉上熔化。在无菌工作台的酒精灯旁,将培养基倒入培养皿中,加盖后轻轻摇动使其在培养基上均匀铺开,平置于桌面上,待其凝固后即为平板,注意保证无菌操作。
3. 涂布法分离各类微生物
将0.2ml菌悬液滴在平板表面中央位置,右手拿无菌涂布器平放在平板表面,将菌悬液先沿一条子线轻轻的来回推动,是之均匀分布,然后改变方向沿另一直线来回推动,平板边缘可改变方向用涂布器再涂布几次。
4. 培养(incubation)
28~30C, 24~48hr
5. 观察记录结果、记数(counting plates):细菌数量=数出的菌落数/稀释度。例如,10-5稀释度时菌落数为125个,则细菌数量=125/10-5=1.25*107个/ml。

这个是大学的实验,用的方法是稀释涂平板计数。

Ⅱ 如何测物品上的细菌数量我是高中生方法尽可能简单的阐述 ~

一。使用细菌总数测试片,只需要购买细菌总数测试片,再按要求使用,有说明书。
二。红细胞计数法
首先要了解这个方法的原理。把N个红细胞与细菌均匀混合,再数出一小块区域内的红细胞数n和细菌数m。因为细胞已经均均匀混合,所以,局部的细胞数比和整体的细胞数比是接近相同的。即 n/m=N/M (n为局部红细胞数, N为总红细胞数,m为局部细菌数,M为总细菌数)n,m已数出。N又已知。所以总细菌数N就可以算出来。再取几个局部,算平均值,就能得到较精确的细菌数目。
如果这样做,只要数出一小块区域内的细菌数就可以知道总细菌数。如果不加红细胞,一个一个数,用要数到何年何月啊!细菌可是对数增长。加入红细胞的作用就像比例尺一样,地图上总有1:XXX的比例尺,你在显微镜的一个是视野里看到的红细胞数目就像地图上你测得的距离,数清一个是视野的菌数后,乘以相应分散度就可以了,分散度时用红细胞算的,具体的教材上应该有。不用也可以,不过要换成相应大小别的东西代替,总之用光学显微镜差菌数,这是不可缺少的。

这里运用了样方法,就是在若干样方中计数全部个体,然后将其平均数推广,来估计种群总体数量的方法。样方法相关知识:
①样 方: 样方也叫样本,从研究对象的总体中抽取出来的部分个体的集合,叫做样方。

②随机取样: 在抽样时如果总体中每一个个体被抽选的机会均等,且每一个个体被选与其他个体间无任何牵连,那么,这种既满足随机性,又满足独立性的抽样,就叫做随机取样(或叫做简单随机取样)。随机取样不允许掺入任何主观性,否则,就难以避免调查人员想获得调查属性的心理作用,往往使调查结果偏大。

③适用范围:植物种群密度,昆虫卵的密度 ,蚜虫、跳蝻的密度,细菌数量测量等。
样方法取样方法
①点状取样法点状取样法中常用的为五点取样法,如图A,当调查的总体为非长条形时,可用此法取样。在总体中按梅花形取5个样方,每个样方的长和宽要求一致。这种方法适用于调查植物个体分布比较均匀的情况。
②等距取样法当调查的总体为长条形时,可用等距取样法,如图B,先将调查总体分成若干等份,由抽样比率决定距离或间隔,然后按这一相等的距离或间隔抽取样方的方法,叫做等距取样法。例如,长条形的总体为100 m长,如果要等距抽取10样方,那么抽样的比率为1/10,抽样距离为10 m,然后可再按需要在每10 m的前1 m内进行取样,样方大小要求一致。

样方法的两种边角统计方式如下图(红色为需统计边线)

样方法具体步骤如下:

①确定调查对象;

②选取样方:必须选择一个该种群分布较均匀的地块,使其具良好的代表性;

③计数:计数每个样方内该种群数量;
样方法的两种边角统计方式
④计算:取各样方平均数。

Ⅲ 若要测定培养液中微生物的菌体数,若要测定其活菌数量,用什么方法

(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源、无机盐四类,培养基配制时,基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤.
(2)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数;若要测定其活菌数量,可选用稀释涂布平板法进行计数.
(3)采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间,这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格.
(4)三块平板有两块平板长有菌落,说明含有菌株并可在培养基上生长;而其中一块未见菌落,说明菌株死亡.因此,应在接种过程中接种环灼烧后未冷却或未足够冷却,使菌株因温度过高被杀死.
(5)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,即C 1 酶、C x 酶、葡萄糖苷酶,其中葡萄糖糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖;刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌.
故答案为:
(1)氮源和无机盐先调PH,后灭菌
(2)血细胞计数板稀释涂布平板
(3)检测培养基平板灭菌是否合格
(4)接种环温度过高,菌被杀死
(5)纤维二糖红透明圈

Ⅳ 我们有什么办法测量微生物生物量

1. 直接计数测定 根据微生物种类,有血球计数板和细菌计数板;或者用电子计数器计数
2. 比浊法 根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比,可以用分光光度计测OD值,用OD值表示样品菌液浓度
3. 核酸计数法 荧光定量PCR技术
4. 活菌计数法 MPN和平板计数法
由于测定方法的限制,前几种计数结果不太准确,目前应用广泛的是第四种
对粪大肠菌群和光合细菌可用MPN,对其他微生物可用平板计数法

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