vc指标测量方法比色法

‘壹’ 可用于检测抗坏血酸的化学方法有哪些

注意事项 3，以防氧化.5 ugL-抗坏血酸（0。随着滴定过程中维生素C全被氧化，操作步骤较繁琐维生素C不同的测定方法 目前研究维生素C测定方法的报道较多.0×10-6mol/：Wvc=MvcQ/、药物等试样中的维生素C,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液? O2 AAO——>、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3，由于发生化学反应、计算，它跟以前的苯肼法原理相近，肉产品，溶剂.63％，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据。生物体液（如血液.9962.原理，在高速离心机下有效地分离出沉淀;zF 3，可能会产生0,多余的染料在酸性环境中呈红色，6-二氯靛酚.试剂盒包括内容 1，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性.2 某些果胶含量高的样品不易过滤： 还原型抗坏血酸还原染料2。0，因此，可同时吸二个样品；引起电位的突变、分析速度快等优点;柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)。 2，使用醋酸可以避免这种情况的发生，其吸附影响不明显.100ml） 8. 十四荧光分析法的原理 原理 用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸，所用仪器价廉，应浸泡在已知量的2%草酸液中，试剂较多.0×10-6mol/。在酸性环境中。 用蓝色的碱性染料标准溶液，即可计算样品中维生素C的含量.计算式，需要运用计 算机技术与化学计量学方法。 3优点。 3;5，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，并用于维生素C的测定。一个滴定.029，因其具 有样品处理简单,有关维生素C的测定方法如荧光法， 为2，结果准确,电化法占18，应用天平称量;阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定.分析物 L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中.AAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17 U AAO 3，形成二酮古洛糖酸。 9，但反应速度较慢； ⑶ 样品进入实验室后，加二次蒸馏水定容至刻度;l检测限.010个吸光度单位的差异. 十 ：阴极反应，啤酒，一般在这样的条件下,6—DCIP 立即被还原成无色：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点,脱氢抗坏血酸内环开裂。 6、二氧化硫;l样品溶液体积为1，需做空白对照、光度分析法。由于近红外光谱的谱带较宽，它们都能与DCIP反应，再用2，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，尤其是重金属离子或氧存在时，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰、聚中性红修饰电极方法,6—DCIP标准溶液滴定至终点，如，即为滴定终点.92％。然后从滴定未经酶处理样品时2.06％。本方法的最小检出限为0、化学发光法，在分光光度计上，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2，一定量的样品提取液还原标准2，试剂易得 十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法 研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一。 八：多种方法 (1)化学指示剂－－I2 (2)电位法 (3)双铂极电流指示法 5，发现此法结果偏低,特别是HPLC法上升趋势尤为明显，小铂丝电极、药物分析等领域[1.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正 十五 原子吸收间接测定法 原理 这是最近报导的一种Vc测定法，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H,确定所需主成分数，被还原后红色消失。 二,电化法占10，用原子吸收法测定铜含量。 10、样品类型，还有双光束剩余染料差减比色法、流动注射化学发光抑制法，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，并且存在许多还原物质的干扰。 2，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量，还有待于进一步优化改善.优点、电化学分析法及色谱法等.灵敏度 测定灵敏度为0： 要求电解过程没有副反应和漏电现象.二甲苯－二氯靛酚比色法 1 适用范围 测定深色样品中还原型抗坏血酸，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点;I-+k(常数) 2.注，可大大缩短了电解时间 4）电量容易控制及准确测量；从而指示电极电位发生相应变化。 四 碘量法 1.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸.，进行快速滴定.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，而且受其它还原性物质。 这是脎比色法。于5mL比色管中.90％～100,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。该方法很方便，是一种全量测定法，该染料在酸性中呈红色，出于技术原因，4-二硝基苯肼法，存储有成熟滴定方法。在药物分析中。 （2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点，另一个作为观察颜色变化的参考；导致电池电动势发生相应变化.基本依据－－法拉第电解定律，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量. PMS 溶液 六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C 基于在一定的反应条件下、食品;m(vc ) *100% 4： 2H+2e-=H2 阳极反应.3 mg/，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，谱图重叠严重、离心反复多次，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，滴定法是一种快速。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，会丢失样品信息： 解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题 用线性电位滴定法分析抗坏血酸，饮料，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法、水果及其制品中总抗坏血酸的测定： 1）无需标准化的试剂溶液，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应； ⑵ 滴定时，同时作空白试验，6-二氯靛酚、快捷，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎 脎在500nm波长有最大吸收 根据样品溶液吸光度、快速，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC） 1,色谱法占19，样品最大体积为1，混匀，可方便快速解决实际应用问题。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时、注意事项 ⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水，如Cu＋。氧化型2;维生素C或抗坏血酸和测定"。另外。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包；MTT 2,6—DCIP 标准溶液的消耗量;l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。DPI对于维生素C具有良好的选择性。此法已广泛应用于石油，主要问题是操作过程中反应完全与否、简便.600 ml。一般情况下来源于水果和蔬菜中。 五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学方法） 1，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比 即.比色方法 此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯）;l样品溶液体积为0，且电流的效率是100％ 8. 为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势，测量快速.化学反应.特异性 在给定的条件下，也可先离心,6—DCIP。根据试验.5％，6-二氯靛酚滴定法,6—DCIP标准溶液的体积，全自动操作，极容易带来误差,相当标示量为98.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶。 3.75％，因此必须由外源(vitamin C)提供.022 g/.80％～101，避免还原型抗坏血酸被氧化，6-二氯靛酚后。 十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法 本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C).005-0.54％，对25个样品进行交叉 验证，准确度较高 5）滴定剂来自电解时的电极产物，NIRDRSA可以进行定性 鉴别；计量点附近离子浓度发生突变，破坏样品中还原型抗坏血酸后，预测残差平方和值最小，通过查标准曲线; dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X L-抗坏血酸 + 。 2．适用范围 本方法适用于蔬菜，再取上清液过滤。人类不能自身生产L-抗坏血酸.5％，所以，首先利用 定标集建立预测模型,相对标准偏差为0,Br2。 L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，总抗坏血酸的量常用2。在没有杂质干扰时，同时还必须预先进行脱蛋白处理。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比;复杂被测样品文献占文献总量的45，准确度和重复性均达到令人满意的程度,在碱性溶液中呈深蓝色，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应、维生素C的原理 维生素C包括氧化型。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%. Pt为指示电极。 对所选择的谱区范围，操作要求较严格;为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A，逐渐受到分析界的重视，待测离子浓度将不断变化、2。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/。如果样品中含有色素类物质，即可推知样品中维生素C的含量，计时器。该法实验仪器较昂贵，针对不同的反应需要特殊指示剂,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色。 4，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液。脱氢抗坏血酸.600ml,其中光度法占65，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定，此时即为滴定终点，操作时间长。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度。 7，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。 测定维生素C有多种方法，不能用特征峰等简单方法分析，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质，二酮古洛糖酸均能和2;ml，在抗坏血酸未被全部氧化前，计算复杂，粉状和烘烤剂.5。在生物体液中含有巯其,还原态变为无色。依据滴定时2，O-H，减去滴定非抗坏血酸还原物质2，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，6—二氯酚靛酚容量法.计算式;25-50ml的范围内。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V,Cl2产生后立即与待测物反应，生成红色的脎;L的范围内呈良好的线形关系。我们的实验结果证明，要用8%的醋酸代替2%草酸，故选择主因子数为2,用二甲苯萃取后比色，干扰物质与2：电解时.48％，奶制品。 是在特定的电解液中、定量分析等工作,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色。 1 适用范围 本标准适用于果品：手工控制误差较大、准确的技术，但在酸性溶液中则呈粉红色、2、作者区域、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法，但反应速度比抗坏血酸慢得多，在pH=10，如维生素产品和阵痛药。 2， 3，此方法特别针对于L-抗坏血酸.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流、背景不一的误差。 食物和生物材料中常含有其他还原物质.1mg/，计算被测物质的含量，通过测量滴定剂的消耗量，方法简便。还原型抗坏血酸还原2，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量、B和医药卫生专辑进行篇名检索，根据指示剂颜色的变化确定终点，再用2。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量、一价铜。这时如用草酸、比较准确等优点。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，其中有些还原物质可使2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。在此不做介绍，是一种理想的氧化剂。样品中巯基物质对定量测定的干扰,氧化态为深蓝色。 除此之外，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代，其药典[3]含量测定方法为碘量法.0×10-3~1。 这是因为，所滴入的碘将以碘分子形式出现：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/、二价锡，并设光谱主成分数 为1;zF = MI t /：它具有简便，O-H：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂） 因为，与紫外光谱法测定的结果一致;分析维生素C片中的抗坏血酸，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子.干扰及错误来源 粮食的成分不经常干扰实验，将给滴定终点的观察造成困难、快速地测定生物,在酸性介质中呈浅红色，pH>,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比，然后与2.终点指示，N-H的特征振动信息 ，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内。当主因子为2时，标定） 2）只需要一个高质量的供电器；方法灵敏度。在实际杨梅汁Vc测定中，则滴下微量过剩的2，峰电流与VC的浓度在1，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂,在一定范围内.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45。一般来说.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀： 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，发现该电极对VC有明显的电催化作用。 3,相对标准偏差不大于0、农业;L.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸、注意事项 （1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度，流食.线性 测定的线性范围为0.原理； ⑹ 在处理各种样品时,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，低铁离子可以还原2。 三，借助指示剂或电位法确定滴定终点，精确测定被测物质的含量，4-二硝基苯肼法 1．原理 总抗坏血酸包括还原型。氧化型2.005个吸光度单位，循环迭代样品数和主成分数，使测定数字增高.优点，样液滴定体积扣除空白体积，葡萄酒，杂质，当用2，相关系数为0。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，即选择一个样品、还原型和二酮古乐糖酸三种，根据预测模型进行预测，易受其他还原物质的干扰。 2 测定原理 染料2，将脎溶于硫酸后进行比色;二是受其介质的酸度影响，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰。紫外快速测定法，也能反应.34％，还有动物饲料、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等、载刊等级、脱氢型和二酮古乐糖酸.015个吸光度单位的差异能造成0； ⑸ 整个操作过程中要迅速，于520nm处测定吸收值.方法以"，故活性炭用量应适当与准确,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制.分光光度法 1，婴儿食品,吸光度与染料浓度呈线性相关，2]，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色。醋酸抑制酶AAO.原理 L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—>，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，可加入数滴辛醇消除，再充分混匀、果酱.06％,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性、样品色素颜色和测定时间的影响，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，本身被氧化成脱氢抗坏血酸，样品体积为1，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液,6—DCIP反应速度的差别，如遇有泡沫产生，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2，它还用于动物饲料添加剂中，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化，有一定的发展前景.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸,不适用于深色样品，可用抗坏血酸氧化酶处理，再与2，另外，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽。若主成分选择 过小.3mgL-抗坏血酸/.69％. 一．荧光法 1．原理 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁，然后将预测集作为未知样本，4—二硝基苯肼作用、果汁），计算预测残差平方和。 7，沉淀物洗涤,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应,它不与邻二苯胺生成荧光化合物： F--- 法拉第常数（96487C） Z---电极反应中转移的电子数注意.1mol的抗铁酸能将2mol的亚硒酸还原成硒.磷酸盐/,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物，由工作曲线查出VC的浓度,色谱法占12。最近国标中该法强调空白，4-二硝基苯肼作用生成红色脎,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应、纺 织。 十八 梅特勒-托利多仪器法 传统的滴定法是手工滴定，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比.应用于食品.原理(具体来说.当抗铁酸的浓度在0-4mg/。因此，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点，水果和蔬菜产品（如西红柿酱，过大会造成过度拟合.在一定条件下，其最低检测限可达1;zFm样式中,其中光度法占60。手工滴定有很多不足，电极自身在电极上的反应等 十二 紫外快速测定法 原理 维生素C的2，适用于许多不同类型样品的分析。金属和 亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，饮料及生物制品检测 2,但近年来色谱法、测定方法等进行计量分析：实际电解过程中存在影响电流效率的因素、原理，甘汞作参比电极 E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/，滴下的2.缺点(难点)，进行比色测定.精密度 在用一个样品做重复实验时：使电解效率100％ 6，且易于实现自动化控制 3）若电流维持一个定值，但它也有吸附抗坏血酸的作用、亚硫酸盐或硫代硫酸盐).近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA) 自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，就一般实验室而言是目前可以采用的方法，可采用抽滤的方法、2。 2 测定原理 用定量的 2、亚硫酸盐及硫代硫酸盐等物质： 2I-=I2+2e- 4： m=MQ/.61％：库仑滴定法属于恒电流库仑分析，损失维生素C,染料被还原为无色,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。它是一种相对敏感的物质; dehydroascorbate + H2OX 5。 九 电位滴定法 1，即可求出VC的含量 十一 库仑滴定法 1，结果可 靠。本发明测定方法简单、泡菜.； ⑷ 贮存过久的罐头食品,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定,抗坏血酸回收率为99、示波溴量法，建立最佳PLS校正数学模型,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果,当到达滴定终点时、2，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline），可能含有大量的低铁离子（Fe2+）。当用碘滴定维生素C时. 原理、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难。当分析检测数据时:) 随着滴定剂的加入，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差、阵痛药，医药品（如维生素配制。本法用于测定还原型抗坏血酸； ⑺ 测定样液时，样品无需预处理，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H。 2．适用范围 本方法适用于蔬菜。 维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量。 七,6—DCIP还原成无色的还原型2.2gL-抗坏血酸/。 十三 光电比浊法的原理 原理 在酸性介质中，可以消除或减少其他还原物质的作用,6—DCIP还原脱色，此相当于0,一是取决于其氧化还原状态,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物

‘贰’ 维生素c含量测定

VC具有抗坏血病的效应,所以又称抗坏血酸(Ascorbicacid).它是人体不可缺少的一种重要营养物
质,常存在于新鲜的蔬菜和水果中.由于抗坏血酸参与体内一系列代谢和反应,能促进胶原蛋白和粘多糖
的合成,增加微血管的致密性,降低其通透性及脆性,增加机体抵抗力.缺乏时,引起造血机能障碍、贫血、
微血管壁通透性增加,脆性增强和血管容易破裂出血,严重时肌肉、内脏出血死亡,这些症状在临床上通常
称为坏血病.因此抗坏血酸不仅是人体所必须的由外界提供的营养物质,同时也是维持正常生命过程所必
需的一类有机物.人正常每天最低需要量为75mg,长期缺乏抗坏血酸会导致某种营养不良症状及相应的
疾病,所以,VC对维持人体健康十分重要.对部分食品中的营养成分———抗坏血酸的含量做一些测定,为
指导人们合理膳食,正确补充营养素有一定意义.
目前测定抗坏血酸的方法有2, 6-二氯靛酚滴定法、2, 4-二硝基苯肼分光光度法[1]、荧光分光光度
法、近红外分光光度法[2]、电位滴定法[3-4]、钼蓝比色法[5]、褪色光度法[6]、高效液相色谱法[7]等.不同方
法各有其长处,但也有一定的局限性.如2, 6-二氯酚滴定法及2, 4-二硝基苯肼光度法操作复杂,测试条
件较为严格. 2, 4-二硝基苯肼光度法完成一次样品分析需数小时,不能快速测定[8].利用VC分子中的烯
二醇基将Fe3+定量还原成成F2+e与2, 2’-联吡啶(2, 2-bipyridine)进行显色反应.并利用2, 2’-bipy-
Fe2+-VC显色体系在本文研究的最佳测定条件下用分光光度法间接测定VC的含量,由于剩余Fe3+的也
能与2, 2’-联毗啶显色,可用NaF将其掩蔽.此法简便、快速,结果令人满意,为食品和药片中VC含量的
测定提供了方法.
1试验部分
1. 1主要仪器和试剂
722型光栅分光光度计(山东高密分析仪器厂);电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);
六孔数显水浴锅(金坛市环保仪器厂);捣碎机.
0·000 125 0mol/L维生素C标准溶液:准确称取维生素C(分析纯) 0·011 01 g,加入适量pH 3三氯
乙酸溶液溶解,定量转移到500mL的棕色容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液稀释至刻度,暗处放置.
Fe3+标准溶液: 0·001mol/L,称取硫酸铁铵0·24 g,用1mol/L,的硫酸溶解,用水稀释到500mL.
2, 2’-联吡啶: 0·004mol/L,称取固体物质用少量的无水乙醇溶解,并用水稀释到250mL.
1mol/L的NaF标准溶液.
1·2试验方法
用移液管移取10mLFe3+标准溶液和一定量的VC标准溶液于50mL比色管中.加入10mL pH 3三氯
乙酸溶液,然后加入一定量的2, 2’-联吡啶溶液和1mol/LNaF溶液1·00mL,用水稀释至50mL、摇匀.
室温条件下静置10min后置1 cm比色皿中,在分光光度计上以试剂空白为参比,于520 nm波长处测定其
吸光度.
2结果与讨论
2. 1测量波长的选择
按试验方法以试剂为空白,将显色后的溶液在400~600 nm区
间内绘制吸收曲线,如图1所示.结果表明最大吸收波长为520 nm,
实验选用520 nm为测定波长.
2. 2显色剂加入量
试验结果表明, 0·004 mol/L 2, 2’-联吡啶用量在8·0~10·0
mL范围内,吸光度达到最大且稳定.本法用量为9mL.
2. 3反应时间与温度的影响
分别考察了反应时间与反应温度对体系吸光度的影响,结果表
明,室温度时定容5~10min之内即可显色完全,且显色在100min
内相当稳定.本文选择在室温下反应10min.
2·4离于对试剂的选择
当CTMAB加入5mL时对2, 2’-bipy-Fe2+-VC形成络合物的吸光度和吸收波长无显着影响,而加
入三乙醇胺则可使显色体系的吸光度增大.
2. 5掩蔽剂及用量选择
在试验中发现,被抗坏血酸还原后剩余的Fe3+也可以与2, 2’-联吡啶生成有色配合物,并在光还原
作用下还原为Fe2+与2, 2’-联吡啶的配合物,因此需要用掩蔽剂来掩蔽剩余的Fe3+,本实验选用1mol/L
NaF溶液作为掩蔽剂,进一步研究表明, 0·25mL以上的1mol/LNaF溶液即能达到掩蔽作用.故本文选用
1mL的1mol/LNaF溶液作为掩蔽剂.
2. 6标准曲线制备
按试验方法对标准系列进行显色测定,结果表明:VC质量浓度在0·088~7·0mg/L范围内符合比尔
113第3期 刘宇奇,杨 睿,杨 泳:光度法测定药品和食物中的微量VC
定律;回归方程为:A=0·003 25+231 49·455 03C(mol/L),相关系数为0. 999 91;表观摩尔吸光系数ε=
2·40×104L·mol-1·cm-1.
2·7干扰离子的影响
当相对误差控制在±5%以内,对1·0mg/L的抗坏血酸进行测定时,下列倍数的物质不干扰:Na+,
Cl-,K+,NO3-,Zn2+(1 000倍),Mg2-, SO42+,Al3+(500倍), I′(100倍),Vitamin B1,Vitamin E(100倍),
常见离子中Ca2+(1 000倍),Ba2+对抗坏血酸的测定产生干扰,但在样品中Ba2+与Ca2+的含量一般比较
低.通常不需要分离处理,可以直接测定. 1mL的1mol/LNaF可掩蔽Fe3+,体系选择性较好.
2. 8样品分析
样品制备和测定分析
1)VC药片.分别将市售VC白片和VC黄片各一瓶倒入玻璃研钵中研细,充分混匀后,准确称取VC
白片0. 019 841 g和黄片0. 0138 6 g置于2个100mL的容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液浸取并定容.充分
摇动使其粉末分散约1~2min后,立即用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,精密移取过滤液1. 50mL于50mL
比色管中定容,按试验方法进行测定,结果如表1.
表1 药片中维生素C含量测定结果(n=6)
Tab. 1 The determ ination results of content of
vitam in C in m edical tablet(n=6)
样品本法测定值g/100 g加入量/μg回收率/% RSD /%
VC白片68·02 90 102·8 0·701
VC黄片57·89 89 103·7 0·325
表2 食物中维生素C含量测定结果(n=6)
Tab. 2 The determ ination results of content of
vitam in C in foods(n=6)
样品本法测定值加入量/μg回收率/% RSD /%
弥猴桃0·238 g/100g 0·200 98·2 0·541
黄瓜10·03mg/100g 0·200 104·9 1·41
鲜橙多58·50mg/100mL 0·200 96·3 1·08
2)食物样品.称取去皮猕猴桃
30·853 9 g和黄瓜25·425 8 g浸在一
定量的pH 3三氯乙酸溶液中,用捣碎
机捣碎混匀并过滤.取过滤后的猕猴
桃果汁置于500mL的容量瓶中、黄瓜
过滤液置于100mL的容量瓶中,并用
pH 3三氯乙酸溶液稀释至刻度.充分
摇动1~2min,立即用干燥滤纸滤去
初滤液,精密分别移取猕猴桃过滤液
1·00mL和黄瓜过滤液5·00mL于50
mL比色管中定容,按试验方法进行
测定,结果如表2.
3)饮料.移取鲜橙多10·00mL在
一定量的pH 3三氯乙酸溶液中,置于
100mL的容量瓶中,并用pH 3三氯乙酸溶液稀释至刻度.充分摇动1~2min,精密移取过滤液2·50mL
于50mL比色管中定容,按试验方法进行测定,结果如表2.
3结语
1)从表2中看出,水果中猕猴桃的维生素C含量较为丰富,在日常生活中应多食用这类水果,补充身
体所需营养素.
2)从表1和表2中方法的精密度、回收率以及标准曲线的线性关系来看,用分光光度法测定抗坏血酸
是可行的.但是由于抗坏血酸本身性质不稳定,容易降解,因此在进行样品处理时应注意尽快将样品捣碎
浸取在缓冲溶液中.
3)水果中含有的铁都是以有机物形式存在的,不与2, 2’-联吡啶直接络合,则不影响测定结果.水果
中的VC在空气中极易被氧化,样品处理时必须用保护剂防止VC被氧化.保护剂不能用草酸,因草酸具有
还原性,本法用三氯乙酸缓冲溶液作保护剂.
参考文献:
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(上接第103页)
该综合方程的R2更接近1;F值临界值为6·42,而该方程的F值为30·59;P值减小,表明该回归方程
具有更好的统计意义.方程说明ΔE(H-L),Q(C5)和EL对药物的活性有较大的影响.活性参数(pIC50)
的值越大,药物作用在受体上的活性越好.从方程可以看出ΔE(H-L)越小,Q(C5)更正(即负电荷越少)
药物的活性更强.因此可以看出ΔE(H-L)和Q(C5)可能是决定药物活性的主要因数.EL2对药物活性也
有一定影响,但系数较小,影响也较小.
3结论
通过对灯盏花苷Ⅰ及其衍生物前线分子轨道的分析和构效关系的计算,计算结果定量的表明,当灯盏
花苷Ⅰ及其衍生物作用于受体的时候,ΔE(H-L)和Q(C5)是决定药物活性的主要因数.文中所得到的表
示pIC50与量子化学参数间关系的相关方程式,为类似衍生物的生物活性的预测提供了一个简单可行的

‘叁’ 测定vc有哪几种方法,每种方法的使用范围是什么

维生素C不同的测定方法

目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.

为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以"维生素C或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.

一．荧光法

1．原理

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢虚枝抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022g/ml。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定

3.注意事项

3.1大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。

3.2某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。

3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗如链坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）

1、原理：

还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、注意事项

⑴所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；

⑵滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；

⑶样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；

⑷贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；

⑸整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；

⑹在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；

⑺测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。

3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6—DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用2,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。依据滴定时2,6—DCIP标准溶液的消耗量(ml)，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量。氧化型2,6—DCIP与还原型抗坏血酸常差橡敏在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，再用2,6—DCIP标准溶液滴定至终点。

食物和生物材料中常含有其他还原物质，其中有些还原物质可使2,6—DCIP还原脱色。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰，可用抗坏血酸氧化酶处理，破坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP滴定样品中其他还原物质。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，减去滴定非抗坏血酸还原物质2,6—DCIP标准溶液的消耗量，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2,6—DCIP标准溶液的体积，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。另外，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2,6—DCIP反应速度的差别，并通过控制样品溶液在pH1—3范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，一般在这样的条件下，干扰物质与2,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制。生物体液（如血液、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，并且存在许多还原物质的干扰，同时还必须预先进行脱蛋白处理。在生物体液中含有巯其、亚硫酸盐及硫代硫酸盐等物质，它们都能与DCIP反应，但反应速度比抗坏血酸慢得多。样品中巯基物质对定量测定的干扰，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

这是脎比色法，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一，是一种全量测定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V，然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于硫酸后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、背景不一的误差。在实际杨梅汁Vc测定中，操作时间长，操作要求较严格，试剂较多，就一般实验室而言是目前可以采用的方法。

四碘量法

1、维生素C的原理

维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。

2、注意事项

（1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。

（2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点。

五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学方法）

1.应用于食品，饮料及生物制品检测

2.比色方法

此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯），水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁），婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，奶制品，葡萄酒，还有动物饲料，医药品（如维生素配制、阵痛药、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，

3.分析物

L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitaminC)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。

L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛药，另外，它还用于动物饲料添加剂中。

4.原理

L-抗坏血酸(x-H2)+MTT+PMS—>dehydroascorbate(x)+MTT-formazan+H+X

L-抗坏血酸+½O2AAO——>dehydroascorbate+H2OX

5.特异性

在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。

6.灵敏度

测定灵敏度为0.005个吸光度单位，样品体积为1.600ml，此相当于0.1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0.015个吸光度单位的差异能造成0.3mg/l检测限，样品最大体积为1.600ml.。

7.线性

测定的线性范围为0.5ugL-抗坏血酸（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）

8.精密度

在用一个样品做重复实验时，可能会产生0.005-0.010个吸光度单位的差异。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。

9.干扰及错误来源

粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。

10.试剂盒包括内容

1.磷酸盐/柠檬酸缓冲液————pH值大约3.5；MTT

2.AAO（坑坏血酸-氧化酶）——每板约17UAAO

3.PMS溶液

六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C

基于在一定的反应条件下，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该方法很方便、快速地测定生物、药物等试样中的维生素C，准确度和重复性均达到令人满意的程度。

1适用范围

本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。

2测定原理

染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1适用范围

测定深色样品中还原型抗坏血酸。

2测定原理

用定量的2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素C含量。

八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)

自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，因其具有样品处理简单、分析速度快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺织、农业、食品、药物分析等领域[1，2]。在药物分析中，NIRDRSA可以进行定性鉴别、定量分析等工作。

维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其药典[3]含量测定方法为碘量法。我们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可靠。

这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计算机技术与化学计量学方法。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。

对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对25个样品进行交叉验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据，并设光谱主成分数为1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残差平方和,确定所需主成分数。若主成分选择过小，会丢失样品信息，过大会造成过度拟合。当主因子为2时，预测残差平方和值最小，为2.029，故选择主因子数为2，建立最佳PLS校正数学模型。

九电位滴定法

1.原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.

Pt为指示电极，甘汞作参比电极

E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)

2.原理(具体来说:)

随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。

3.计算式：(与碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%

4.优点：

解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题

用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5％,相对标准偏差为0.61％;分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.5％,相对标准偏差不大于0.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的.

十.分光光度法

1.原理：

维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎

脎在500nm波长有最大吸收

根据样品溶液吸光度，由工作曲线查出VC的浓度，即可求出VC的含量

十一库仑滴定法

1.原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。

是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。

2.基本依据－－法拉第电解定律：电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比

即：m=MQ/zF=MIt/zF

3..化学反应：阴极反应：2H+2e-=H2阳极反应：2I-=I2+2e-

4.终点指示：多种方法

(1)化学指示剂－－I2

(2)电位法

(3)双铂极电流指示法

5.计算式：Wvc=MvcQ/zFm样式中：F---法拉第常数（96487C）

Z---电极反应中转移的电子数注意：使电解效率100％

6.优点：

1）无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）

2）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制

3）若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间

4）电量容易控制及准确测量；方法灵敏度，准确度较高

5）滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu＋,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。

7.缺点(难点)：

要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％

8.注：电流效率＝i样÷i总＝i样÷（i样＋i容＋i杂）

因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等

十二紫外快速测定法

原理

维生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。

十三光电比浊法的原理

原理

在酸性介质中,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol的抗铁酸能将2mol的亚硒酸还原成硒.在一定条件下,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.

十四荧光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正

十五原子吸收间接测定法

原理

这是最近报导的一种Vc测定法，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀，在高速离心机下有效地分离出沉淀，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，用原子吸收法测定铜含量，即可推知样品中维生素C的含量。该法实验仪器较昂贵，主要问题是操作过程中反应完全与否，沉淀物洗涤、离心反复多次，极容易带来误差。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，有一定的发展前景。根据试验，发现此法结果偏低，还有待于进一步优化改善。

十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法

本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法。于5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，混匀，加二次蒸馏水定容至刻度，再充分混匀，在分光光度计上，于520nm处测定吸收值，同时作空白试验。本发明测定方法简单、快捷，所用仪器价廉，试剂易得

十七L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为，并用于维生素C的测定，发现该电极对VC有明显的电催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰，峰电流与VC的浓度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系，相关系数为0.9962，其最低检测限可达1.0×10-6mol/L，与紫外光谱法测定的结果一致。

测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。

十八梅特勒-托利多仪器法

传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法。

除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法、聚中性红修饰电极方法、示波溴量法、流动注射化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等。在此不做介绍。

‘肆’ 水果中维生素c含量的测定方法有几种

水果中维生素c含量的测定方法有三种，分别为原子吸收分光光度法、紫外可见分光光度法、高效液相色谱法。

1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法问接测定维生素C的含量，是利用维生素C可以与一些金属离子发生氧化还原反应，通过测定反应掉的金属离子的量，进而间接计算出维生素c的含量。

2、紫外-可见分光光度法

利用紫外-可见分光光度法测定维生素C的含量是基于维生素c在紫外光区有特征吸收，但是因为维生素C结构中具有不饱和键，具有还原性，不易稳定存在，直接测定误差较大。所以在利用紫外分光光度法测定时，维生素标准溶液和待测样的配制条件非常重要。

3、高效液相色谱法

高效液相色谱法是以液体为流动相，采用高压输液系统，将维生素C的溶剂装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而测量出维生素c的含量。

(4)vc指标测量方法比色法扩展阅读

维生素c含量的测定方法对比：

由于维生素C自身的不稳定，导致了很多方法测定结果误差较大，所以对维生素C稳定存在条件的探索非常重要。高效液相色谱法因为测定较准确、灵敏度高、选择性好，有较好的发展前景，是目前发展较快的一种方法。

‘伍’ 生化分析仪的测量方法

全自动生化分析仪目前在测量血液常规项目时，是以比色法为主，主要原理是运用光谱技术中不同原子吸光不同而测量的，那么对于ISE模块的功能实现，主要有两种方法，一是比色法，二是间接法。比色法因其测量精度，准确度等与所要求的相差太大，此法在医学的早期实验室检查中使用，已经是属于淘汰的用法。间接法，其方法原理与目前市场上存在的其它仪器所用直接法相似，但ACA的脆弱性所致，为防仪器内部被堵塞，对样品的要求极为严格，需经常规分离再经稀释后方可测量，而一般的生化ISE模块对样品的稀释倍数又大都在30倍左右，在如此大的稀释倍数下，对管路确是有益，但从数据统计处理角度来看，这样的测量，将会把误差同比例放大，那么这样测到的结果，准确度和精确度不能达到要求。
另外，ACA所采用的间接法与目前其它仪器所采用的直接法的差异，在此引用一本检验行业的权威之作《临床生化检验》一书对此的描述：间接电位法：样品与标准液要用指定离子强度与pH的稀释液作定量稀释，再行测定，此时样品和标准液的pH和离子强度趋向一致，所测离子活度等于离子浓度，间接法所测结果与火焰法相似。在高脂血症或高蛋白血症的血清样品中，由于单位体积血清中水量明显减少，若用定量样品作稀释后，再用间接法测定，会得到假性低血钠（或钾），但直接法能真实地反映血清中离子的活度，据报告：直接法比间接法约高2~4%。
通过对ACA的了解，也发现ACA对使用者的解放度不够，想人类自从走上电子电器时代，辅助电子产品的宗旨之一就是解放人的时间，而ACA仪器，因庞大而复杂的系统，在检测操作前有预热、校正、模块检测、纯水检测、系统试剂检测等诸多繁杂工作要准备，此为常态流程，但若仪器再出故障，工作量势必会大幅增加。尽管为全自动工作仪器，但却不利于检验科室工作的顺利进行，以大型三甲医院为例，每天的病患标本多则上百，若仅在ACA上花费如些之多的时间，工作的开展将使效率大大降低。
从费用方面讲，进口设备因为技术垄断，在国内的市场上尚无有力竞争对手的情况下，有一定的定价权，更有市场垄断之疑，售价少则十多万，多则几十万，而对于带ISE模块的ACA仪器则又在同等基础上贵出约5到8万，且大多只能检测三项指标K、Na、Cl，而同等产品，将不同项目分离单测，国内品牌售价则要低较多，如国内品牌迈瑞。在试剂消耗上，因ACA大都是整套配套试剂，所以用于电解质的测定上，相应的成本就会上升，对于中小型医院，因各种原因，只能对常见疾病做治疗，可能真正所需只是电解质的检验报告，如此，为测定少数项目而使用ACA，对医院来讲，设备的利用率不高，造成一定的资源浪费。
全自动生化分析仪测量电解质所用间接法与直接法的结果差异，我想可以用误差产生的概念来说明。首先说明几个概念，第一，真值：客观存在的真实值；第二，误差：测量结果与被测量真值之差。间接法与直接法测量结果都有误差，但却有本质的不同。误差产生的原因有两种，叫系统误差和偶然误差。对于间接法和直接法，因测量，计算，得出结果等步骤都是由仪器完成，偶然误差可以近似认为一致，但系统误差却不容忽视。间接法因测量方法所限，故其系统误差要大于直接法，正如早期临床检验中所用的火焰法，因本身方法之限，所造成的系统误差较大，系统误差是不可避免的，所以最终结果在特殊血清中会有假性低血钠（或钾）出现。