胶体金法的实验方法及步骤

A. 新冠胶体金法怎么用

新冠胶体金法，可能指新型冠状病毒抗原检测。新型冠状病毒抗原检测通常需要根据说明书进行正确的操作。通常需要进行检测前准备、样本采集、进行检测、结果判定和废弃物处理五个步骤。
1.检测前准备：仔细阅读说明书，了解检测流程及注意事项。查看试剂日期，以及检查说明书内提到的物品是否有缺失。如试剂过期或物品缺失、破损应及时更换检测试剂。用清水或者消毒水清洗双手。
2.样本采集：用卫生纸擤去鼻涕，取出鼻拭子，避免用手接触拭子头，头部微微后仰，拭子深入1~1.5cm后，贴鼻腔旋转至少4圈，采集过程至少15秒，让鼻拭子在鼻腔内充分采样，随后使用同一拭子对另一鼻运蠢敬腔重复相同操作。
3.进行检测：采集完成后，立即将鼻拭子置于采样管中，拭子头应在保存液中旋转混匀至少30秒，同时用手隔着采样管外壁挤压拭子头至少5次，充分混匀，确保样本充分洗脱于采样管中。将得到的液体滴入检测卡样本孔中检测，15~20分钟后，查看结果。
4.结果判定：按照说明书读出检测结果。如果C处位置无条带，说明该新型冠状病毒抗原检测可能出现问题，无论T处是否有条带出现，均属于无效结果。如果C处有清晰档改条带，但是T处无条带，一般说明与对照相比，样本中无对应抗原，而未发生反应，呈现新型冠状病毒抗原检测阴性结果。如果C处有清晰条带，如果T处有深色或浅色条带，通常说明该新型冠状病毒抗原检测结果为阳性，已发生抗原抗体结合反应，多提示机体可能存在新型冠状病毒感染的可能。
5.废弃物处理：所有使用后的检测卡、拭子、采样管等应该装入密封袋按照医疗废物处理。
新型冠状病毒抗体弱阳性一般是感染新型冠状病毒引起的，出现旁慎这种检测结果的原因可能是病毒潜伏期、检测试剂敏感度不高等，由于患者体内存在新型冠状病毒，新型冠状病毒具有一定的传染性，所以新型冠状病毒抗体弱阳性也具有一定的传染性，患者仍然需要居家隔离，如果没有明显的临床症状，可以通过调整饮食、适当运动增强体质，能够促进弱阳性转为阴性。

B. 胶体金试纸条的测试原理是什么

胶体金快速检测卡是采用胶体金免疫层析技术研制而成的，此技术是90年代初在免疫渗透技术的基础上建立的一种快捷简单的免疫学检测技术，市场上一般用到的有双抗体夹心法、双抗原夹心法、小分子竞争法等等。 胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，金离子还原后聚合成的一定大...小的金颗粒，它由一个基础的晶核（11个金原子形成的二十面体）和包围在外的双离子层构成（内层为负离子层AuCl2－，外层是带正电荷的H＋）。由于静电作用，金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，故称胶体金。 。质量差的溶液烧制后，液面有漂浮物，大小不一，形状各异。胶体金颗粒大小，决定了我们用肉眼观察到的胶体金溶液颜色，由红到紫色。 胶体金一般在弱碱环境下带负电荷，会与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，一般称这种结合叫静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。除了与蛋白质结合以外，它还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，从而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记技术，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。用于胶体金标记的蛋白必须要经过前处理，其目的在于 1、去除高浓度的盐分，高浓度的盐分往往干扰蛋白与胶体金的吸附结合，或导致胶体金粒子的凝聚，这一步往往采用低浓度缓冲液来进行。 2、使蛋白分子尽量分散为单体，冻干蛋白或高浓度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚为多聚体大分子，可同时与多个胶体金粒子结合，影响标记的灵敏度和定量分析。 3、使蛋白具有适当的分子量。蛋白分子量过小（30 kD），形成的蛋白复合体往往是不稳定，可短时间内失活。而分子量过大时，被认为影响探针的灵敏度，特别是已知蛋白的结构与活性中心的情况下，去除对活性影响的结构部分是提高标记灵敏度，延长探针寿命（防止凝集）的有效办法。把分子量过小的蛋白与其它蛋白（如牛血清蛋白等）结合后，能制备出稳定性更强的探针。 当蛋白前处理完成后，接着要确定胶体金与蛋白结合的最佳pH值。对于理化性质不确定的蛋白这一步尤为重要。过量的蛋白与不同pH值的胶体金结合后，只有某一特定pH值能够形成结合最稳定的探针。在高浓度电解质（如NaCl）作用下不会凝聚。不同蛋白的适宜pH范围的宽窄大不相同。一般选择最小适宜pH值为最佳pH值。但有些探针的实际情况并不完全如此，最稳定的探针并不完全代表活性最好，这要靠实验验证。 在确定最佳pH值后，最后要确定最小蛋白量，即能够形成稳定探针的蛋白的最小量。如果在制备探针时加入太多的蛋白，不仅造成浪费，而且更为严重的是容易造成探针凝聚，并严重影响标记活性。因为探针溶液中的游离蛋白容易抢先与标记位点结合，起到“封闭”（Blocking）作用，而胶体金探针标记不上。在标记位点希少、被标记物含量较少的情况下要特别注意。 胶体金具有很高的动力学稳定性，在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢，可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂，但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚，但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性，如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。. 当金溶胶吸附蛋白质后，溶胶的稳定性随溶液pH而变化，而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点，如ConA，过氧化物酶等，当pH较低时保持稳定，提高pH则显得不稳定，接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2～0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4～10℃贮存数月有效，不宜冰冻。贮存中可能会发生程度不同的凝聚，可离心除去。 当今国内有很多胶体金试纸条生产厂商，江浙这一带尤为突出，推荐厂家：苏州快捷康生物技术有限公司。

C. 艾滋病试纸的胶体金法

胶体金法（金标）人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术制成的集灵敏性、特异性及操作简便的一步法HIV 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HIV 1型和HIV 2型的特异性抗体，以辅助诊断HIV感染，其阳性结果需用免疫印迹法确认。
其检测原理是用HIV重组抗原和羊抗鼠IgG分别固定于硝酸纤维素膜，并和包被有胶体金标记的HIV重组抗原及鼠IgG的玻璃纤维纸片及其他试剂组成。应用胶体金免疫层析技术，采用双抗原夹心的原理检测人类血清及血浆样本中的HIV 1/2抗体。

D. 胶体金检测方法

胶体金检测方法如下：

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一贺孝种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。

在检测时，如样本中没有吗啡或其代谢产物存在，胶体金标记的特异性抗体与膜区抗原结合形成两条红线（一条反应线T，一条质控线C），表明检测结果为阴性；

如样本中存在吗啡或其代谢产物，而且浓度高于检测水平（300ng/ml）时，毒品分子就与胶体金标记的抗体竞争结合，从而阻止胶体金标记的抗体与膜区抗原结合，使其对应的红色反应线消失，仅出现一条红色的质控线，表明检测结果为阳性。

E. 什么是胶体金法为什么叫胶体金法

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。 胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。 由于胶体金具备这个特性，所以常用来检测，所以成为了一种检测方法，用胶体金法命名。比如 吗啡检测试纸（胶体金法）的原理：本品采用胶体金免疫层析技术，将吗啡抗原包被在硝酸纤维薄膜上，在玻璃纤维上包被胶体金标记的特异性抗体。在检测时，如样本中没有吗啡或其代谢产物存在，胶体金标记的特异性抗体与膜区抗原结合形成两条红线（一条反应线T，一条质控线C），表明检测结果为阴性；如样本中存在吗啡或其代谢产物，而且浓度高于检测水平（300ng/ml）时，毒品分子就与胶体金标记的抗体竞争结合，从而阻止胶体金标记的抗体与膜区抗原结合，使其对应的红色反应线消失，仅出现一条红色的质控线，表明检测结果为阳性。

F. 胶体金法的制备方法

用容迹灶量瓶量取200ml超纯水加入到 500ml锥形瓶中，将锥形瓶置于磁力加热搅拌器加热板上，放入磁力搅拌子，打开搅拌旋钮至适当速度。用兄州搭移液器吸取2ml 1%氯金酸溶液于上述 200ml超纯水中，搅拌1min，关闭搅拌旋钮，打开加热旋钮，加热至沸腾。打开搅拌旋钮至适当速度，快速加入经微孔滤膜羡拿过滤。1% 柠檬酸三钠溶液0.8ml，溶液在2分钟内由灰色变黑色最后变为红色，再继续加热搅拌 10分钟。关掉加热旋钮，适当速度搅拌至室温，定容至200ml，4~C保存。

G. 胶体金法怎么用

胶体金与标记蛋白简介
在不同还原剂的作用下，由氯金酸（HAuCL4）可以制备出金颗粒直径在0.8-500nm的胶体金。制备好的胶体金保存时间较长，可在4℃保存6个月以上，或在室温下可保存1-2个月。
胶体金在做为标记探针时，不同用途选用的胶体金的直径范围也不同，用于免疫快速检测的胶体金颗粒直径范围一般在3-40nm间。
胶体金粒子表面为一层AuC12—，粒子表面带有负电荷金颗粒表面包被一层生物大分子（如蛋白）可以稳定和保护金颗粒，维持胶体的稳定，可防止外来电解质的影响使粒子相互凝聚。
胶体金粒子对蛋白的吸附作用取决于溶液的pH值，这是因为蛋白中氨基酸的净电荷取决于溶液的pH值，在pH=pI时蛋白溶液呈中性。在pH=pI时蛋白溶解度最小，水化程度最小，更容易吸附到疏水的金粒子表面。但在实际的胶体金探针制备中，一般胶体金调整为pH=pI+0.5，这样更有利于结合更稳定。
胶体金探针所用的蛋白通过三种机制于吸附于金颗粒的表面：一、金粒子所带负电荷与蛋白部分碱性氨基酸（如赖氨酸，精氨酸，pH均大于10）所带阳性电荷的最初的相互吸引；二、蛋白通过某些疏水性氨基酸残基（包括色氨酸）与金粒子表面之间的疏水吸附作用；三、蛋白中的半胱氨酸或甲硫氨酸的硫基与金粒子间的电子对的共用以共价键结合。
用于制备胶体金探针的蛋白需要进行前处理后才能与金颗粒更好的结合。未经处理的蛋白质一般来说均含有较高浓度的盐分，而高浓度的盐分往往干扰蛋白与胶体金的吸附结合，或导致胶体金粒子的凝聚，所以首先要去除蛋白质溶液中的盐分。冻干蛋白或高浓度蛋白溶液中蛋白分子常凝聚为多聚大分子，可同时与多个胶体金粒子结合，影响探针的灵敏度，分散蛋白分子为单体也是蛋白前处理的重要一项。处理标记的使其蛋白具有适当的分子量，如果蛋白分子量过小（30kD），形成的蛋白复合体往往是不稳定。把分子量过小的蛋白与其它蛋白（如BSA，牛血清蛋白等）结合后，能制备出稳定性更佳的探针。分子量过大时，影响探针的灵敏度，在已知蛋白的结构与活性中心的前提下，去除对活性无影响的结构部分可提高标记的灵敏度。
二、免疫胶体金产品原理及应用
胶体金探针大多用单克隆抗体标记，应用免疫层析法制成快速诊断产品，具有较高的特异性，而且相对稳定性很高。检测一般在5-10min就可以读出结果，相比其它方法(如ELISA需1-2h，PCR需要时间更长)大大的缩短了检测时间。检测样(可以是组织液、血清、尿液、粪便等)只需做非常简单的处理或不做前处理即可进行检测。结果以颜色的变化读取，不需要特别仪器设备。
免疫胶体金法快速检测试纸利用层析原理、双抗体夹心法或免疫竞争法或间接法，应用被检测物质的特异性和能与其发生特异反应的抗原或抗体，并以金颗粒为显色剂达到快速检测目的。
使用快速检测产品时，在卡的加样孔加入待测样，利用层析原理不断的向另一端层析，随着层析的进行，样本中的待测成分固定于测试线（T线）并以颜色变化显示，并以对照线（即控制线，C线）确保检测的有效性。

H. 胶体金法测怀孕怎么用

现在测试怀孕的方法都是多种多样的，而且都是属于那种五花八门的测试的方法，现在比较常见的是一种叫做胶体金法的方法，很多人都已经用这种方法来测试怀孕，但是，其实具体的使用方法还是有很多的人都不知道到底是什么，所以，胶体金法测怀孕怎么用?

胶体金法测怀孕怎么用

1、 胶体金法就是我们在早孕试纸包装上经常看到的“HCG”，胶体金是由氯金酸在某些还原剂的作用下，聚合成的一定大小的金色颗粒，这种金色颗粒会由于静电的作用成为一种稳定的胶着状态，并且形成带负电的疏水溶液，故而称为胶体金还是比较形象的。

2、 能是氯金酸变成胶体金的还原剂主要有白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等物质，胶体金法测早孕的主要原理就是由于孕妇的尿液中含有大量的一种人绒毛膜促性腺激素，这是一种糖蛋白质类激素，而没有怀孕的妇女体内基本上没有HCG，胶体金发就是以胶体金为指示标记，通过测尿液中HCG浓度来判断是否有孕。

3、 早孕试纸顾名思义就是能在胎儿发育很早的时候就能够检测出孕妇已经怀孕，这个时间一般最短一周，如今这种试纸有很多种，有的测出时间比较早，并且比较准确，有的相对比较低端的，可能就不能很早的检测出怀孕，胶体金法早孕试纸还分为卡式和笔试。

正常情况下怀孕后2周以上才可以测试出来的，也就是排卵期性生活后2周以上测试结果才比较准确，血hcg测试这个的速度要快些，一般来说这个性生活后一周以上就可以测试出来了。

验孕棒掉水了还能不能使用

建议换一个，掉水里算已经使用了。没有重复使用功能。验孕棒是体外诊断(IVD)产品的一种，所谓测试即是利用验孕棒检测尿液中的人绒毛膜促性腺激素简称HCG。HCG是由怀孕女性的胎盘分泌的一种促激素，随血液分布于全身，从而作用于靶器官，尿液中亦存在一定浓度的HCG。目前市场上的绝大部分验孕产品都是采用胶体金法，根据双抗体夹心原理对尿液中的HCG进行定性或半定量检测，从而确定是否怀孕。值得注意的是，此类验孕产品并非100%准确，某些疾病也可能导致体内HCG浓度升高，从而造成假阳性结果。

虽然验孕棒可以测出来是否怀孕，但还是想给各位需要验孕的女性朋友们几点小建议来提高用验孕棒验孕的准确性。首先尽量采用早晨的第一次尿液进行检测，因为这个时候的激素水平最容易检测出来。不要为了增加尿液而喝过多的水分，因为这会稀释了激素的水平。一些药物可能会影响到测试的结果，所以一定要仔细阅读标签说明。