凝胶点测定的方法与步骤

① 凝胶时间

浆液凝胶时间是指在一定的温度条件下，浆液从混合（或制成）至不可流动时梁尺所经历的时间。凝胶时间是浆液可控性的主要指标之一，在注浆堵水施工中埋渣脊，浆液的凝胶时间指标尤其重要，若施工中采用的注浆材料凝胶时间过长，则极易受到地下水的稀释影响，从而造成注浆浪费，甚至造成注浆失败。浆液凝胶时间采用符号T_g表示。

浆液的凝胶时间测定方法主要有黏度计法和倒杯法。

黏度计法是采用旋转黏度计对注浆材料进行黏度测试。浆液的初期黏度较低，一旦浆液凝胶时，浆液黏度急剧增大，此时所经历的时间称为浆液凝胶时间。一般而言，当浆液的黏度达到100 cp时，浆液已基本失去流动性弯渗，因此，可将此时所经历的时间作为浆液凝胶时间。黏度计法适用于凝胶时间大于3min的注浆材料。

倒杯法是一种比较简单的方法，该方法是：首先用量筒量取A液（主液）与B 液（固化液），分别置于烧杯中，然后将A液倒入装有B液的烧杯中，立即把A、B混合液再倒入A液的烧杯中，重复交替混合液，直到浆液不再流动时或浆液呈现黏稠状为止，期间所经历的时间为浆液的凝胶时间。

② RNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和步骤

一、实验目的

掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。

二、实验原理

RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶，不同的RNA条带也能分开，但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下，RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时，一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1% 琼脂 糖凝胶即可。

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三、实验材料、器具及药品

蘑菇的总RNA溶液。 电泳仪，电泳槽，电子 天平 ， 移液器 ，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。 琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，0.5μg/ml溴化乙锭（EB）10X载样缓冲液。

四、实验步骤

（1）用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶，加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。

（2）在超净工作台上，用移液器吸取总RNA样品4μl于封口膜上。在 实验台 上再加入5μl 1×TAE电泳缓冲液及1μl 的10X载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔。

（3）打开电源开关，调节电压至100V，使RNA由负极向正极电泳，约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。

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RNA的变性琼脂糖凝胶检测

试剂 ：

（1）MOPS缓冲液（10*）:0.4mol/L 吗啉代丙烷磺酸（MOPS） (Ph7.0)，0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA 。

（2）上样染料：50%甘油，1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚蓝，0.4%二甲苯蓝。

（3）甲醛。

（4）去离子甲酰胺。v电泳槽清洗：去污剂洗干净（一般浸泡过夜）——水冲洗——乙醇 干燥 ——3%H2O2灌满——室温放置10分钟——0.1%DEPC水冲洗。

操作：

（1） 将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍，晾干备用。

（2） 配制琼脂糖凝胶。

①称取0.5g琼脂糖，置干净的100ml 锥形瓶中，加入40ml蒸馏水，微波炉内 加热 使琼脂糖彻底溶化均匀。

②待胶凉至60--70 ℃，依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5ul 溴化乙锭，混合均匀。

③灌制琼脂糖凝胶。

（3） 样品准备：

① 取 DEPC处理过的500ul小离心管，依次加入如下试剂： 10x MOPS缓冲液2ul，甲醛3.5ul,甲酰胺（去离子）10ul，RNA 样品 4.5ul,混匀。

② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟，再置冰上2分钟。

③ 向管中加入3ul 上样染料，混匀。

（4）上样。

（5）电泳：电泳槽内加入1XMOPS缓冲液，于7.5V/ml 的电压下电泳。

（6）电泳结束后，在紫外灯下检查结果。

③ DNA酶切及凝胶电泳的操作步骤

1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在管底。此步操作是整个实验成败的关键,要防止错加，漏加。使用限制性内切酶时应尽量减少其离开冰箱的时间，以免活性降低。
2、 混匀反应体系后,将eppendorf管置于适当的支持物上（如插在泡沫塑料板上）,37℃水浴保温2-3小时,使酶切反应完全。
3、 每管加入2μl 0.1mol/L EDTA(pH8.0),混匀,以停止反应,置于冰箱中保存备用。 1、 取5×TBE缓冲液20ml加水至200ml,配制成0.5×TBE稀释缓冲液,待用。
2、 胶液的制备：称取0.4g琼脂糖,置于200ml锥形瓶中,加入50ml 0.5×TBE稀释缓冲液,放入微波炉里(或电炉上)加热至琼脂糖全部熔化,取出摇匀,此为0.8%琼脂糖凝胶液。加热过程中要不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液。加热时应盖上封口膜,以减少水份蒸发。
3、 胶板的制备：将有机玻璃胶槽两端分别用橡皮膏(宽约1cm)紧密封住。将封好的胶槽置于水平支持物上,插上样品梳子,注意观察梳子齿下缘应与胶槽底面保持1mm左右的间隙。
向冷却至50-60℃的琼脂糖胶液中加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5μg /ml(也可不把EB加入凝胶中,而是碰正陵电泳后再用0.5μg/ml的EB溶液浸泡染色)。用移液器吸取少量融化的琼脂糖凝胶封橡皮清锋膏内侧,待琼脂糖溶液凝固后将剩余的琼脂糖小心地倒入胶槽内,使胶液形成均匀的胶层。倒胶时的温度不可太低,否则凝固不均匀,速度也不可太快,否则容易出现气泡。待胶完全凝固后拨出梳子,注意不要损伤梳底部的凝胶,然后向槽内加入0.5×TBE稀释缓冲液至液面恰好没过胶板上表面。因边缘效应样品槽附近会有一些隆起,阻碍缓冲液进入样品槽中,所以要注意保证样品槽中应注满缓冲液。
4、 加样：取10μl酶解液与2μl 6×载样液混匀,用微量移液枪小心加入样品槽中。若DNA含量偏低,则可依上述比例增加上样量,但总体积不可超过样品槽容量。每加完一个样品要更换tip头,以防止互相污染,注意上样时要小心操作,避免损坏凝胶或将样品槽底部凝胶刺穿。
5、 电泳：加完样后,合上电泳槽盖,立即接通电源。控制电压保持在60-80V,电流在40mA以上。当溴酚蓝条带移动到距凝胶前沿约2cm时,停止电泳。
6、 染色：未加EB的胶板在电泳完毕后移入0.5μg/ml的EB溶液中,室温下染色20-25分钟。
7、 观察和拍照：在波长为254nm的长波长紫外灯下观察染色后的或已加有EB的电泳胶板。DNA存在处显示出肉眼可辨的桔红色荧光条带。紫光灯下观察时应戴上防护眼镜或有机玻璃面罩,以免损伤眼睛。 经照相机镜头加上近摄镜片和红色滤光片后将相机固定于照相架上，采用全色胶片，光圈5.6,曝光时间10-120秒(根据荧光条带的深浅选择)。
8、 DNA分子量标准曲线的制作：在放大的电泳照片上,以样品槽为起点,用卡尺测量λDNA的EcoRⅠ和HindⅢ酶切片段的迁移距离,以厘米为单位。以核苷酸数的常用对数为纵坐标,以迁移距离为横坐标,在坐标纸上绘出连结各点的平滑曲线,即为该电泳条件下DNA分子量的标准曲线。
9、 DNA酶切片段大小的测定：在放大的电泳照片上笑戚,用卡尺量出DNA样品各片段的迁移距离,根据此数值,在DNA分子量标准曲线上查出相应的对数值,进一步计算出各片段的分子量大小(若用单对数坐标纸来绘制标准曲线,则可根据迁移距离直接查出DNA片段的大小)。反之,若已知DNA片段的大小亦可由标准曲线上查出它预计的迁移距离。
10、 DNA酶切片段排列顺序的确定：根据单酶切,双酶切和多酶切的电泳分析结果,对照DNA酶切片段大小的数据进行逻辑推理,然后确定各酶切片段的排列顺序和各酶切位点的相对位置。以环状图或直线图表示,即成该DNA分子的限制性内切酶图谱。
[注意]
1.酶切时所加的DNA溶液体积不能太大，否则DNA溶液中其他成分会干扰酶反应。
2、酶活力通常用酶单位（U）表示，酶单位的定义是：在最适反应条件下，1小时完全降解1mg lDNA的酶量为一个单位，但是许多实验制备的DNA不象lDNA那样易于降解，需适当增加酶的使用量。反应液中加入过量的酶是不合适的，除考虑成本外，酶液中的微量杂质可能干扰随后的反应。
3、市场销售的酶一般浓度很大，为节约起见，使用时可事先用酶反应缓冲液（1×）进行稀释。另外，酶通常保存在50%的甘油中，实验中，应将反应液中甘油浓度控制在1/10之下，否则，酶活性将受影响。
4、 观察DNA离不开紫外透射仪,可是紫外光对DNA分子有切割作用。从胶上回收DNA时,应尽量缩短光照时间并采用长波长紫外灯(300-360nm）,以减少紫外光切割DNA。
5、 EB是强诱变剂并有中等毒性,配制和使用时都应戴手套,并且不要把EB洒到桌面或地面上。凡是沾污了EB的容器或物品必须经专门处理后才能清洗或丢弃。
6、 当EB太多,胶染色过深,DNA带看不清时,可将胶放入蒸馏水冲泡,30分钟后再观察。

④ 凝胶保湿性测试方法

凝胶保湿性是指凝胶在皮肤表面形成一层水分保护屏障，使水分得以保留在皮肤上的能力。测定凝胶念稿保湿性可采用一些标准化的方法，例如通过测定皮肤水分蒸发率、皮肤膨胀力、凝胶吸水率等指标来评估凝胶的保湿能力。

以下是一毕团种简单的凝胶保湿性测试方法，供参考：

1. 将一定量的凝胶样品均匀地涂抹在手背或前臂的一部分皮肤上。

2. 使用电子秤仔数孝对皮肤及涂有凝胶样品的部位分别称重。

3. 记录时间并等待5分钟，使凝胶充分吸收皮肤中的水分。

4. 在5分钟后，分别称重皮肤及涂有凝胶样品的部位。此时，如果凝胶具有保湿性，则涂有凝胶的部位的重量将大于不涂凝胶的部位的重量。

5. 根据称重结果计算凝胶的保湿性能指数。

⑤ 求大神告知，怎么测酚醛树脂的凝胶点

可以采用飞秒检测的热分析方法去进行，只需要几个毫克就可以测定出来，当然还有一种需要量的比热法等

⑥ 凝胶剂沉降比怎么测

凝胶剂沉降比测定步骤如下：
1、准备一个直径大约为6毫米，高约12毫米的透明量筒，以迅仿及待测的凝胶剂。
2、在透明量筒中注入一定量的待测液体（如水、颂昌岁矿泉水等），并记录液体高度h1。
3、将一定量的凝胶剂缓慢地倒入透野睁明量筒中，使其均匀地分布在液体表面上，然后轻轻振动透明量筒，将空气排除。
4、记录凝胶剂开始沉降时的初始高度h2，并开始计时。
5、每隔一段时间（如30分钟、1小时等），观察透明量筒中液体和凝胶剂的高度变化，并记录下来。
6、当凝胶剂完全沉降后，停止计时，记录下凝胶剂沉降后上层液体的高度h3。
7、计算凝胶剂的沉降比：沉降比=（h2-h3）/h1，其中h2为凝胶剂开始沉降时的高度，h3为凝胶剂完全沉降后上层液体的高度，h1为液体注入量筒时的高度。

⑦ 导光凝胶的黏度检验方法是什么

导光凝胶的黏度检验方法主要分为两种：旋转黏度法和移液黏度法。
1. 旋转黏度法段瞎笑
旋转黏度法是通过旋转式黏度计来测定导光凝胶的黏度。该方法将样品加入旋转式黏度计的测量室中，然后旋转黏度计，测量样品与旋转器之间的扭矩随转速的神吵变化情况。根据扭矩和转速的比例关系，可以计算出样品的黏度。
2. 移液黏度法
移液黏度法是通过移液式黏度计来测定导光凝胶的黏度。该方法将样品加入移液式黏度计的玻璃管中，然后通过重力或压力将样品从一定高度或压力下流出，测量样品流动的时间或速度，从而计算出样品的黏度。
需要注意的是，不同的导光凝胶可能具有不同的黏度特性，握含因此在进行黏度检验时，需要根据具体的样品特性选择合适的黏度检验方法。此外，黏度检验还需要进行标准化，以确保测试结果的准确性和可比性。

⑧ 琼脂怎么测定凝胶强度

凝胶强度低于1000的都属于石花菜琼脂粉，95度水泡一泡就能融化，凝胶强度高于1000的是江蓠菜琼脂粉，需要开水煮沸才能完全融化。册念石花菜的弹性好，凝固点低，江蓠菜的硬度好。石花菜的用量大，江蓠菜的用量小，水粉比例400比1就能做出果冻状，42度凝固。你比照这些特性进行比例小试。青岛琼埋模脂制造有限公司州液困回答。

⑨ 氢氧化铝凝胶测定方法

方法如下：
1、取氢氧化铝凝胶5ml，加稀盐酸10ml，加热知宴溶解后，显铝盐的鉴别反应。
2、取氢氧化铝凝胶约8g，精密称定，照氢氧枝丛化铝含量测定项下的猛猛樱方法自加盐酸与水各10ml，加热溶解后起反应。