明德核酸提取仪的主要步骤及方法

Ⅰ RT-PCR检测方法的具体步骤

RT-PCR检测方法的具体步骤如下：

（一）RNA提取
1、根据标本数量分装RLT液：从Kit中取出RLT液，用1.5mL离心管分装，每管500μL（在体系配制区操作）。
2、在生物安全柜内将采样液（鼻拭子、咽拭子、胸水等）或病毒培养物（鸡胚尿囊液或细胞培养液）取100μL加入RLT液管中，充分混匀。 3、每管分别加入5μL β-巯基乙醇，混匀后依次加入600μL 70%的乙醇，充分混匀。
4、从Kit中取出带滤柱的2mL收集管，打开包装将其做好标记。取步骤（3）中的混合液600μL加入滤柱中，12000rpm，离心15s，弃收集管中的离心液。
5、滤柱仍放回收集管上，将步骤（3）剩余的混合液全部吸入滤柱中，12000rpm，离心15s，弃离心液。
6、于滤柱中加入700μL Wash Buffer RW1液，12000rpm，离心15s。
7、从QIAGEN RNeasy Mini Kit中取一支干净的2mL收集管，将离心后的滤柱移到新的收集管上，于滤柱中加入500μL Wash Buffer RPE液，12000rpm，离心15s。
8、弃收集管中的离心液，再于滤柱中加入500μL Wash Buffer RPE液，13000~14000rpm，离心2min。
9、将滤柱移到一个干净的1.5mL eppendorf管上，向滤柱中加入30~50μL的Rnase-free Water，室温静置1~3min。
10、12000rpm，离心1min，收集离心液即为提取的病毒RNA，立即做实验或-20℃以下保存。
注意：Buffer RPE使用之间加44mL无水乙醇。
（二）反应体系配制
1、实验设计： 检测标本RNA
阴性对照：无菌水（标本RNA提取时，跟标本同时提取无菌水。） 阳性对照：已知病毒RNA

2、PCR反应体系配制（在体系配制区配反应液） 1）按下表加入试剂： PCR反应体系
对每一个建立的反应确定反应数（n=拟进行的PCR管数，包括阴性，阳性对）。考虑到阴性无模板对照，阳性对照，误差，制备过量的反应混合物是必要的。具体如下：
（1）如果包括对照，样品的数量（n）为1到14，那么N=n+1；
（2）如果包括对照，样品的数量（n）大于15，那么N=n+2。
2）将上述反应液混匀，分装到0.2mL PCR小管中，每管20μL，分别做好标记。

3）加RNA模板（在核酸提取区）
将上述分装好的PCR小管分别加入模板。首先加入阴性对照管（5μL无菌水），然后分别加标本RNA（每管5μL），最后加入阳性对照RNA（每管5μL）。
3、RT-PCR反应
将上述加好模板的反应管混匀，短暂离心后放入PCR仪进行RT-PCR 扩增。

4、RT-PCR产物检测
1）2.0％琼脂糖凝胶制备：称取2.0g Agarose，倒入耐热玻璃瓶内，再加入电泳液（1×TBE）100mL，轻轻混匀后加热，使Agarose完全熔化。待Agarose胶温度降至50～60℃左右，加入核酸染料，轻轻混匀（不要产生气泡）。待胶温度降至50℃左右时，将其倒入制胶板，插好电泳梳子。待胶完全凝固（约30～60min）之后，将梳子拔出。
2）将制备好的电泳胶放入电泳槽（带梳子孔的一端在阴极），倒入电泳液（1×TBE）浸过胶面即可。
3）PCR产物各取10μL，加入2μL上样缓冲液（6×Loading Buffer），混匀后加入电泳胶孔内（先加Marker（DL－2000）5μL，然后依次加标本PCR产物，再加阴性对照，最后加阳性对照产物）。 4）电泳电压100V，约30～40min后看结果。 5）将电泳胶放入凝胶成像系统观察结果并照相。
5、结果判断。

Ⅱ 核酸提取或纯化技术主要有哪几类

核酸提取或纯化技术主要有三类：

1、传统方法（操作复杂，耗时长）

2、离心柱法（试剂盒）

3、磁珠法（可单独采购磁珠或买成品试剂盒）

其中，磁珠法可实现自动化操作，是目前比较主流的方法。

核酸提取应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。

(2)明德核酸提取仪的主要步骤及方法扩展阅读：

核酸提取的注意事项：

1、仪器的安装环境：正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃、相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下。

2、避免将仪器放置在靠近热源的地方，如电暖炉；同时为防止电子元件的短路，应避免水或者其他液体溅入其中。

3、进风口和排风口均位于仪器背面，同时避免灰尘或纤维在进风口聚集，保持风道的畅通。

4、核酸提取仪离其他竖直面至少10cm。

5、仪器接地：为了避免触电事故，仪器的输入电源线必须接地。

6、远离带电电路：操作人员不得擅自拆解仪器，更换元件或进行机内调节必须有持证的专业维修人员完成，不要在接通电源的情况下更换元件。

Ⅲ DNA提取的步骤及原理

酚-氯仿法提取人外周血基因组DNA的基本原理是什么？
答：蛋白质对DNA制品的污染常常影响到以后的DNA操作过程，因此需要把蛋白质除去。一般采用苯酚/氯仿抽提的方法。苯酚、氯仿对蛋白质有极强的变性作用，而对DNA无影响。经苯酚/氯仿抽提后，蛋白质变性而被离心沉降到酚相与水相的界面，DNA则留在水相。
取ACD抗凝血2~3ml，置于15ml的离心管内----加灭菌生理盐水至10ml，颠倒混匀，3000rpm，离心10min-----弃上清，重复步骤2两至三次，直至上清呈无色或微红色----加压积红细胞5.5倍的溶血试剂，混匀，放置-20℃冷溶10min后移至4℃，30min，直至溶液由红色悬液变成红棕色清亮溶液-----3000rpm，离心15min，倒扣离心管于滤纸，使管壁液体流尽-----依次加入STE 450 ml，用枪头吹打混匀后，加入蛋白酶K至终浓度100mg/ml，然后加入10% SDS 25 ml，混匀后移至1.5ml EP管，放置于37℃水浴过夜或56℃，3h----加入等体积饱和酚（约500ml），漩涡振荡器上混匀至溶液呈乳滴状，13000rpm，离心5min。------取上清，加入500μl酚/氯仿（等体积配制混合液），漩涡振荡混匀，13000rpm，离心10min。---------取上清，加入500μl氯仿/异戊醇（24：1混合），漩涡振荡混匀，13000rpm，离心10min。-------取上清，加入50μl物NaAc（1/10体积），混匀后再加入1ml 冰冻的无水乙醇，颠倒轻摇，即可见絮状的DNA沉淀，13000rpm，离心10~20秒，得到DNA沉淀。------------DNA沉淀用70%乙醇洗2~3遍。--------待乙醇挥发后，DNA沉淀用100μl TE缓冲液溶解，核酸蛋白测定仪分析DNA浓度和纯度，-20℃保存备用。

Ⅳ 全自动核酸提取仪介绍.

全自动核酸提取仪介绍：全自动核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、芦纤环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。

上海旦鼎国际贸易有限公司是实验室配套仪器和生命科学仪器的专业提供商。公司NP968全自动核酸提取仪是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品，具有自动化程度高，提取速度快，结果稳定，操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔陪宏仿反应盘，可同时操作1-32个样品，可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与以磁珠为载体的全自动核酸提取试剂于96孔专用反应盘中，选择或编辑适当程序后执行即可。搭配不同种类的磁珠核酸试剂组，可以快速提取动植物组织、血液、体液、刑事检体等样品中的绝哗DNA和RNA。

Ⅳ 核酸提取仪原理

1. 根据仪器型号大小不同划分 [1] 
1) 自动液体工作站
自动液体工作站是功能非常强大的设备，液体分液、吸液等自动完成，甚至能通过整合扩增、检测等功能，实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用，不太适合常规实验室提取核酸，一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个，一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作，需要比较大的资金。
2) 小型自动核酸提取仪
小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的，可以在任何实验室得到应用。
2. 根据提取原理不同划分
1) 采用离心柱法的仪器
离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法，通量一般在1-12个样本，操作时间和手工提取差不多，并不能提高实际工作效率，且价格昂贵，不同型号仪器的耗材也不能通用，仅适合经费充足的大型实验室使用。
2) 采用磁珠法的仪器
以磁珠为载体，利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸，在低盐高PH值下与核酸分离的原理，再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性，所以可设计成很多种通量，既可以单管提取，也可以提取8-96个样本，且其操作简单快捷，提取96个样本仅需30-45min，大大提高了实验效率，且成本低廉，因而可以在不同实验室使用，是目前市场上的主流仪器。

磁珠法核酸提取仪的基本原理
磁珠法核酸提取仪一般分为抽吸法和磁棒法两种 [2]  ：
1. 抽吸法，也叫移液法，是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取，一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:
1) 裂解：在样品中加入裂解液，通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应，细胞裂解，释放核酸。
2) 吸附：在样品裂解液中加入磁珠，充分混匀，利用磁珠在高盐低PH值下对核酸具有很强亲和力的特点，吸附核酸，在外加磁场作用下，磁珠与溶液分离，利用吸头将液体移出弃至废液槽，吸头弃掉。
3) 洗涤：撤去外加磁场，换用新吸头加入洗涤缓冲液，充分混匀，去除杂质，在外加磁场作用下，将液体移出。
4) 洗脱：撤去外加磁场，换用新吸头加入洗脱缓冲液，充分混匀，结合的核酸即与磁珠分离，从而得到纯化的核酸。

Ⅵ 磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程

磁珠法核酸提取过程：

1、裂解

取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。

2、结合
将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管底残液）。

3、洗涤
⑴加入洗涤液Ⅰ，点含行振数次（若有团状或丝状物可增加点振次数及力度），然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑵加入洗涤液Ⅱ，点振数次（若有团状或丝状物可增加点振次数及力度），然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑶誉老纳重复步骤⑵一次；
⑷室温下开盖干燥。

4、洗脱
加入洗脱液，放置水浴锅中温育后磁分离，小心吸取上庆没清液至新的EP管中，进行下游实验。

Ⅶ 磁珠法通用核酸提取的操作步骤有哪些

产品特点

◎操作简便快速，可在30分钟内获得理想的核酸，适用于较多样本的批量提取；

◎提取核酸纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.8-2.0；

◎采用自主研发的改性硅基磁珠，同样的样本量提取的核酸更多。

产品介绍

BIOG Routine NA Mag-B Kit是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取口腔拭子、泌尿生殖道拭子、细胞悬液、组织悬液、唾液、尿液和水样等样本核酸的试剂盒。BIOG Swab NA采用独特的裂解液配方，细胞裂解快速彻底，核酸提取效率高。试剂盒采用了我们自己研发的改性硅基磁珠，核酸吸附能力强，提取核酸纯度高。试剂盒操作简便快速，特别适用于一次试验较多样本的批量提取。与同类产品相比，提取得到的核酸纯度更高，产量更大，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染，可以直接应用于各种PCR检测和常规分子生物学实验。

操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、异丙醇、1.5mL离心管。

2. 取出洗涤液，按以下操作：

a) 洗涤液A：按终浓度30%的比例加入无水乙醇，如21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。

b) 洗涤液B：按终浓度70%的比例加入无水乙醇，如9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。

c) 请按需配制洗涤液，尽量不要多配。配制后的洗涤液如一次使用不完，可严格密封后放于室温阴凉处保存，1周内使用完毕。

3. 取1.5mL离心管，加入0.2mL 裂解液、20μL 消化液，再加入0.2mL样本，振荡混匀，65℃温育10 分钟。

4. 冷却到室温，加入0.2mL异丙醇，充分混匀。再加入20μL磁珠复合液（每次使用前须充分混匀），振荡混匀3min（注意不要颠倒混匀，以防磁珠粘附于管盖内壁）。

5. 将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注团穗意枪头不要接触磁珠）。.

6. 加入0.5mL配制后的洗涤液A，将离心管从磁力架上取下，中速振荡2min，确保磁珠完全分散。再将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

7. 加入0.5mL配制后的洗涤液B，将离心管从磁力架上取下，中速振荡2min，确保磁珠完全分散。再将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

8. 将离心管从磁力架上取下，开盖，干燥约3-5min，至无明显乙醇气味 (注意乙醇要挥发干净)。

9. 加入40 μL洗脱液，振荡至磁珠充分散开，60℃温育2min，振荡混匀30 sec。

10. 将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后，小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中，提取的核酸可直接用于下游实验，或-70℃保存

备用。

注意事项：

1、本试剂盒与1.5mL离心管磁力架配套使用，可选前卜用BIOG 多功能通用磁力架。

2、本试剂可用于DNA提取，也可用于RNA提取，试剂盒内液体已经去RNA酶处理，但如用于RNA提取，实验所用器具也应除去RNA

酶，实验中最好戴一次性洁净手套、口罩，提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子（货号：慧或穗51090，一般50μLRNA溶液加入3μL。）

3. 裂解液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻，洗涤液在使用前应加入乙醇后充分混匀。

Ⅷ 核酸检测具体步骤

1、核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存，RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。

2、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。

3、PCR扩增反应PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。

4、扩增产物定性分析；扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量标准比较，判断扩增片段是否在预期的戚粗分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。

5、结果判定和完成报告单：每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。

(8)明德核酸提取仪的主要步骤及方法扩展阅读：

检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR。因PCR反应模板仅为DNA，因此在进行PCR反应前，应将新型冠状病毒核酸逆转录为DNA。在PCR反应体系中，

包含一对特异性引物以及一个Taqman探针，该探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭档仔态荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信行源号被淬灭基团吸收；

如反应体系存在靶序列，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分离，发出荧光。

每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。

Ⅸ 核酸pcr步骤

一、个人三级防护穿戴

带一次性帽子、佩戴医用N95、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一层乳胶手套、外层一次性隔离衣、防护目镜、第二层乳胶手套、穿戴完毕后应尽快通过专用缓冲间或者走廊，进入核酸提取区（专业核酸提取实验室）。


二、样本灭活处理

核酸检测须有两名工作人员快速通过进入实验室，进行灭活实验操作。生物安全柜内需配备吸水棉与消毒酒精、有条件可配备吸水台布，对样本溢洒时进行紧急处理；打开二级容器，用75%酒精消毒物体表面，检测样本管密闭性后进行灭活处理，灭活条件（56℃，30min，恒温样本灭菌仪等多种方式），取出酒精灭活管用酒精擦拭外表，将样本放入到生物安全柜内。

三、手工核酸提取

操作人员进入试剂配置区或者单独的洁净实验室。

一、试剂区准备

根据说明说要求，在AW1中加入无水乙醇130mL，在AW2中加入无水乙醇160mL，计入无水乙醇后及时做好标记，在310μg的Carrier RNA中加入310μL AVE，并颠倒混匀使Carrier RNA充分溶解，就此完成洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA配置，而后通过传递窗传送到样本处理区，或者由专人送到核酸提取实验室中。

二、样本的裂解

用1.5ml的无菌EP管，移液器移取560μl AVL裂解液，加入5.6μl Carrier RNA，加入140μl的已灭活的待提取核酸的待测样本，涡旋振荡15s，室温静止10min。将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物，防止污染。裂解完成后，加入560μl无水乙醇，振荡混匀15s，将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物，防止污染。

向离心柱加入裂解产物630μl，8000转离心1min，若离心机在生物安全柜之外，每次使用都需进行外表面消毒。更换新废液收集管，要从离心机中小心取出离心柱，将上层离心柱转移到新收集管中，继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中，若样本体积大于140μl时需重复此步骤，直到全部裂解产物都过柱离心，8000转离心1min，小心将离心柱转移到新的收集管中。

取500μl AW1加入离心柱中（注意，此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样），8000转离心1min。小心取出离心柱，更换新的收集管。

取500μl AW2加入离心柱中，14000转离心3min，小心取出离心柱，更换新的离心柱上端收集管，置于离心机中使用最大转速离心1min，以确保将AW2中的残液完全离心干净。

取无菌1.5mlEP管收集核酸，将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中，取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中（注意：洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜），用EP管管盖盖住离心柱，使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖。

室温静止1min，将其放入离心机中8000转离心1min，回收核酸。丢弃离心柱，EP管中即为获取的提取核酸，做好标记与登记。

四、用仪器提取核酸

首先按照说明说准备核酸提取试剂，将200μl灭活样本添加到核酸提取试剂中，根据核酸提取仪的设置程序上机提取核酸，等仪器操作结束，提取核酸完成，回收核酸。

五、PCR体系配置

根据检测样本数量配制体系，将配制好的PCR体系充分混匀并离心后，将其通过传递窗送至样本处理核酸加样区，或单独的样本加样实验室。按照每孔分装20μL反应体系，进行分装，在各孔分别加入5μL待测样本核酸或阴阳对照物（请注意每次检测器包含1个阳性对照和3个阴性对照且阴性对照需随机分布），密封PCR管，有条件时模板加样尽量在单独的生物安全柜进行。

工作人员将配好的PCR管通过传送窗口送至PCR扩增区，或由专人送至PCR扩增实验室，上机检测。

六、上机检测及结果分析

工作人员进入基因扩增分析实验室，从传递窗取出PCR反应管，上机前需混匀并离心反应体系，按试剂盒说明说设置扩增参数并分析判读结果。分析结果时，严格阅读说明说充分了解试剂盒灵敏度、方法学局限性等综合判读实验结果。

为防止扩增污染，反应结束后的PCR扩增管严禁开盖并装入密封带中装入指定的垃圾桶中。

七、检测后的消毒处理

样本处理完成后，工作人员应用75%的酒精消毒处理外层手套并脱下外层手套，放入生物安全柜中的生物垃圾桶中。检测完成后，生物安全柜台面和地面应用0.5-1%的有效氯消毒剂或75%乙醇进行擦拭。将安全柜内产生的医疗垃圾用三层垃圾袋密封，并将其放入指定垃圾桶中，垃圾袋上需标记医疗垃圾信息。实验结束后，生物安全柜以及实验室均要进行紫外灯照射消毒，时间至少30min。

实验操作人员，应有他人用0.5-1%的有效氯消毒剂或75%乙醇对一次性隔离衣均匀喷雾消毒处理，而后脱去隔离衣将检测医用垃圾放入制定垃圾桶中，工作人员在离开二级实验室后，应在缓冲区或走廊按顺序摘脱个人三级防护用品，首先应带新的外层手套，摘掉护目镜并置于75%乙醇中消毒，自上而下、自内向外翻转脱掉一次性防护服，脱去外层手套，摘除、一次性帽子、脱一次性鞋套。脱掉手套，病毒防护服均需进行高压灭菌处理。高压前后医疗垃圾严格区分。

病毒相关垃圾需在120度，30min条件进行湿热高压处理，以高压试纸条变色为有效，而后作为普通医疗垃圾处理。

Ⅹ 核酸检测孵育箱的使用方法

主要分为采样，留样，保存，纯昌塌灭活，检测五步。
操作步骤为：
1、用咽拭子擦拭咽后壁及双侧咽扁桃体处各5-10次，且不断旋转拭子。
2、需要医务人员进行留样，将拭子头浸入细胞保存液中，折断尾部后文即旋紧管盖。
3、保存，将样本管放入密封袋中及时送检，而送检过程中需做圆要严格的运输环境，2-8摄氏度保存。
4、对样品进行灭活处理。
5、将样品放入孵育箱进行检测。
检测前，还需要对病毒迅举进行灭活，这样的作用会使病毒蛋白的结构受到破坏，蛋白不再有生理活性，所以失去感染、致病和繁殖能力，但是常规的灭活不影响病毒蛋白的一级结构，意思就是病毒蛋白的序列没有变化。四步操作核酸提取，将灭活病毒后的样本进行核酸提取，用于后续检测，可以采用自动化的设备，如核酸提取仪等。五步荧光PCR核酸检测，也就是上机器检测，将提取物进行荧光PCR扩曾反应，需要70-80分钟。