导航:首页 > 安装方法 > 测量分子量的方法

测量分子量的方法

发布时间:2022-01-22 09:17:35

1. 【求助】 分子量的测定方法有哪些

最简单的粘度法,不过需要查到α,K等相关的参数。 可以试一试GPC(SEC),可得到数均、质均分子量及分子量分布male7151(站内联系TA)高聚物分子量的测定一般有下面几种方法:端基分析沸点升高和冰点降低膜渗透压光散射(绝对) 小角激光光散射(LALLS)(绝对) 超速离心沉降(绝对)粘度凝胶色谱(如与光散射连用则绝对)sui422(站内联系TA)我也在找这个方面的内容,苦于没有人能给我指条明路hyw.2006(站内联系TA)做个GPC嘛!皇甫功凯(站内联系TA)高吸收性树脂(SAP)也可以用GPC测分子量分布吗?yingram(站内联系TA)PI?溶解性好的话可以做GPC,不过 肯定是相对的啊,再说GPC的标样一般都 是PS,所以也是做个参考吧提丰之灾(站内联系TA)三楼的兄弟厉害! 我就补充一点,有点班门弄斧了 还有核磁共振(NMR)也可以测量分子量 三楼的兄弟厉害! 我就补充一点,有点班门弄斧了 还有核磁共振(NMR)也可以测量分子量 可以说的具体点么

2. 测定聚合物平均分子量的方法有哪些得到的是何种统计平均分子量

分子量和分子量分布的统计计算如图 分子量和分子量分布的测定方法 测定分子量的方法很多,包括端基分析法、沸点升高和冰点降低、膜渗透压和光散射等方法,由于测定方法的不同,分子量的含义也不同,因而具有各种不同的数值。

3. 测定相对分子质量的方法有哪些

1,
端基分析法
。通过
化学分析
的方法测特定的端基含量从而推导出分子量,前提是必须对
高分子结构
有充分的了解,它还可以用于
支链
数目的测定。使用这种方法分子量不一般不能太大。
2,沸点升高和冰点降低。这是利用
稀溶液

依数性
测定溶质分子量的方法,是经典的
物理化学方法
。溶剂中加入不挥发性的溶质后,溶液的
蒸气压
下降,导致溶液的沸点比纯溶剂的高,溶液的冰点比溶剂的低。这种方法没用过,对温差的
测量精度
要求很高。
3,膜
渗透压
。用
半透膜
通过渗透压测定的方法,也应该是一种物理化学方法。
4,气相渗透法(VPO)。利用纯溶剂与加入溶质的溶液
饱和蒸气压
不同来测定分子量。测出的是数均分子量。
5,光散射/
小角
激光光散射
(LALLS)。这两个方法只是仪器,数据处理和所用光源等方面有差异,原理差不多的。这种方法比较常用,而且仪器现在也发展到了一定水平,是测试高分子绝对分子量最有效的方法。
6,
超速离心
沉降。很复杂,最先用于蛋白质分子的测量。是一种相对方法。
7,
凝胶色谱法
(GPC)。很常用,根据不同大小的分子在介质中的停留时间不同来测量分子量。是一种相对方法,须结合其它方法的配合。
8,粘度法。利用玻璃
粘度计
(乌式粘度计,奥式粘度计)增比粘度,然后外推
特性粘数
,根据Mark-Houwink方程算出分子量,是最经济的方法吧,而且重新度很好。
水溶性高分子
一般都用这种方法测量分子量,也是一种相对方法。

4. 测量有机小分子物质的分子量有哪些方法啊

柱层析,或气相色谱、液相色谱测小分子物质分子量挺好的,也很准确。

5. 高分子测分子量的方法都有哪些以及优缺点

1,端基分析法。通过化学分析的方法测特定的端基含量从而推导出分子量,前提是必须对高分子结构有充分的了解,它还可以用于支链数目的测定。使用这种方法分子量不一般不能太大。
2,沸点升高和冰点降低。这是利用稀溶液的依数性测定溶质分子量的方法,是经典的物理化学方法。溶剂中加入不挥发性的溶质后,溶液的蒸气压下降,导致溶液的沸点比纯溶剂的高,溶液的冰点比溶剂的低。这种方法没用过,对温差的测量精度要求很高。
3,膜渗透压。用半透膜通过渗透压测定的方法,也应该是一种物理化学方法。
4,气相渗透法(VPO)。利用纯溶剂与加入溶质的溶液饱和蒸气压不同来测定分子量。测出的是数均分子量。
5,光散射/小角激光光散射(LALLS)。这两个方法只是仪器,数据处理和所用光源等方面有差异,原理差不多的。这种方法比较常用,而且仪器现在也发展到了一定水平,是测试高分子绝对分子量最有效的方法。
6,超速离心沉降。很复杂,最先用于蛋白质分子的测量。是一种相对方法。
7,凝胶色谱法(GPC)。很常用,根据不同大小的分子在介质中的停留时间不同来测量分子量。是一种相对方法,须结合其它方法的配合。
8,粘度法。利用玻璃粘度计(乌式粘度计,奥式粘度计)增比粘度,然后外推特性粘数,根据Mark-Houwink方程算出分子量,是最经济的方法吧,而且重新度很好。水溶性高分子一般都用这种方法测量分子量,也是一种相对方法。

6. 列举几种测量分子大小的方法

一滴水的体积是多少,算出一滴水是多少个分子 除以个数

7. 测定蛋白质分子量的常用方法

知道蛋白质分子量、氨基酸组成计算器
http://www.proteomics.com.cn/tools/mwcal/

一般的方法:
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量

[原理]

十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate, 简称SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量,是六十年代末Weber和Osborn在Shapiro等人在实验基础上发展起来的一项新技术。用这种方法测定蛋白质的分子量具有快速灵便,设备简单等优点。

蛋白质的电泳迁移率在一般的电泳方法中,主要取决于它在某PH下所带的净电荷量、分子大小(即分子量)和形状的差异性,而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对大多数蛋白质,主要取决于它们的分子量,与原有的电荷量和形状无关。

SDS是一种阴离子表面活性剂,在一定的条件下,它能打开蛋白质氢键和疏水键,并按比例地结合到这些蛋白质分子上形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物,每克蛋白质一般结合1.4克SDS。SDS与蛋白质的定比结合使蛋白质-SDS复合物均带上相同的负电荷,其量远远超过蛋白质原有的电荷量,因而掩盖了蛋白质间原有的电荷差异。在水溶液中,蛋白质-SDS复合物具有相同的构象,近似雪茄烟形的长椭园棒(短轴均为1.8nm,长轴则随蛋白质的分子量成正比变化),克服了蛋白质间原有的形状差异。这样蛋白质-SDS复合物在凝胶中的迁移率不再受原有电荷和形状的影响,而只是蛋白质分子量的函数。蛋白质分子量与电泳迁移率间的关系可用下式表示:

lgMr = K – bm

式中 Mr为分子量;K为常数;b为斜率;m为迁移率。

因此,用本法测定蛋白质的分子量只需根据待测蛋白质在已知分子量的标准蛋白质的lgMr~迁移率的图中的位置,就能得知分子量。

用本法测得的分子量,除单链蛋白质外,均不是天然蛋白质的完整分子量,而是组成这些蛋白质的亚基或肽链的分子量。本法对一些电荷异常,或构象异常,或带有大辅基的蛋白质不适用,如组蛋白F1和某些糖蛋白等。对一些结构蛋白如胶原蛋白等也不适用。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳按照凝胶电泳系统中的缓冲液、pH值和凝胶孔径的差异可分为SDS-连续系统电泳和 SDS-不连续系统电泳两类;按照所制成的凝胶形状和电泳方式又可以分为SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直管型电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳两类。

本实验采用SDS-不连续垂直板型操作方法。通过实验使学生掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板式电泳的原理及技术,包括制胶、灌胶、加样、剥胶及固定染色等,学会用这些方法测定蛋白质分子量。

[方法与步骤]

一、加样液的制备

1、标准蛋白质加样液的制备 称取细胞色素,胰凝乳蛋白酶原,胃蛋白酶,卵白蛋白,牛血清白蛋白各0.5~1mg,置小离心管(Eppendorf管)中,加入样品溶解液1mL,充分溶解,如有不溶物应离心除去。沸水浴热处理3min,冷却备用。

2、待测蛋白质加样液的制备

根据待测蛋白质样品存在的状况而定。

(1)固体

待测蛋白样品,如为无盐的纯蛋白质固体制剂,加样液的制备方法同标准蛋白质加样液的制备;如为含盐的纯蛋白质固体制剂,应先加水充分溶解,对透析缓冲液透析12~16h,然后吸取0.5mL(蛋白浓度应为0.5~1mg/mL),置Eppendorf管中,并加入等体积浓样品溶解液,沸水浴热处理3min,冷却备用。

(2)液体

待测蛋白样品,如为无盐的纯蛋白质液体制剂,则加入等体积浓样品溶解液,然后热处理;如为含盐的液体制剂,则需先透析。

二、凝胶的制备

1、凝胶板的准备

(1)洗板

将洗洁精用温水稀释后,用它浸透海绵擦洗玻板,然后用自来水洗净,再用酒精将板擦干。

(2)安装制胶板

制胶前将玻板与塑料嵌条和凹型陶瓷板的边缘对齐,下沿用密封胶带封口,用塑料夹子或铁夹子将两端夹好,注意要确保密封,安放在固定架上。

2、分离胶和浓缩胶溶液的配制

组 分
分离胶/mL
浓缩胶/mL

凝胶贮备液
2.5
0.26

分离胶缓冲液(pH8.8)
1.9


浓缩胶缓冲液(pH6.8)

0.5

10%SDS
0.075
0.02

TEMED
0.026
0.02

双蒸水
3.05
1.22

10%过硫酸铵
0.013
0.02

总体积
7.6
2

注意:①最后加入10%过硫酸铵溶液,混合制成凝胶液,迅速灌制凝胶。

②丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺均为神经毒剂,对皮肤有刺激作用。因此必须小心操作,不得吸入和接触皮肤,聚合完全聚丙烯酰胺凝胶无毒。

3、制分离胶

将制胶板垂直放好,插上与相应厚度的样品梳,在梳子下缘线1cm处做标记,卸下样品梳。将配好的分离胶溶液缓慢加入制胶板之间,直至液面达到标记处。用滴管贴近胶液界面小心而又缓慢地覆盖厚度约0.5cm的正丁醇层,以防止溶液蒸发并保证胶面平整。

4、制浓缩胶

分离胶聚合后,倒去正丁醇,用蒸馏水冲洗分离胶胶面两次,用滤纸吸去残液。用滴管将浓缩胶溶液加在分离胶面上,充满制胶板,插入样品梳。

(三)电泳

1、安装电泳槽

浓缩胶聚合后,除去梳子、密封胶带以及六个铁夹。将制胶扳、电泳糟内芯、另一对制胶板依次放入槽内。两制胶板的凹型陶瓷板均应与电泳槽内芯接触。然后插入楔型板以固定两套制胶板。如果每次电泳只用一块胶板,必须用提供的有机玻璃板代替另一套制胶板。

2、加样

在内外水槽加注缓冲液,使内外槽的水位均超过凹形板的缺口但低于塑料板的上沿。用微量加样器在梳井内加样。

3、电泳

盖好上盖,在80V~100V的电压下电泳约3h,至溴酚蓝指示的电泳前沿到达制胶板的下缘止,关掉电源。然后拔掉楔形板,取下制胶扳。

(四)染色、脱色

用刀片或薄板将白塑料板与陶瓷板轻轻撬开,用刀片沿分离胶与浓缩胶的交接处,将分离胶切下,并在分离胶的左上角切掉一小角,以标记样品顺序。然后手戴橡胶手套将分离胶小心移入染色器皿中。在染色器皿中加入100mL考马氏亮蓝染液(含0.25%考马氏亮蓝R-250,30%乙醇,10%乙酸的水溶液),加盖,在摇床上染色2h。

将染液倒回贮存瓶(可反复使用)。在染色皿中加入100mL脱色液(10%乙酸,30%乙醇),振荡脱色至蛋白条带清晰。

[结果和计算]

1、凝胶脱尽底色后,色带清晰显出。按实样描下或摄下电泳图谱。

2、根据各蛋白迁移距离和染料迁移距离的比值,求出各蛋白的相对迁移率mr,然后作出lgMr~mr关系图,从图中找出未知蛋白mr对应的分子量。

8. 总结一下测定分子量的大小,哪些是绝对方法哪些是间接方法其优缺点如何

聚合物平均分子量为平均聚合度与聚合单元分子量的乘积。
测定聚合物分子量的方法很多,例如:化学方法—端基分析法;热力学方法—沸点升高法、冰点降低法、蒸汽压下降法、渗透压法;光学方法—光散射法;动力学方法—粘度法;超速离心沉淀及扩散法;其他方法—电子显微镜及凝胶渗透色谱法。
测定数均分子量的方法有冰点下降法、沸点升高法、蒸气压下降法、渗透压法以及端基分析法等。 重均分子量的测定方法有光散射法、超速离心沉降速度法以及凝胶色谱法等。 粘均分子量通常用粘度法测得。
各种方法都有各自优缺点和适用的分子量范围,各种方法得到的分子量的统计平均值也不相同,如下表所示。
不同平均分子量测定方法及其适用范围 平均分子量 方法 类型 分子量范围(g/mol) Mn

9. 简述测量蛋白质相对分子质量的方法

1。根据化学组成测定最低分子量
用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量,并假设分子中只有一个这种元素的原子,就可以计算出蛋白质的最低分子量。
2.
渗透压法
当蛋白质浓度不大时,可用以下公式:
M=RT/lim(∏/C)
其中R是气体常数(0.082),T是绝对温度,∏是渗透压(以大气压计),浓度单位是g/L。
3.
沉降速度法:
M=RTs÷D(1-Vρ)
其中s是沉降系数,D是扩散系数,
ρ是溶剂的密度,
V是蛋白质的偏微分比容。
4.
SDS-PAGE法:
lgM=K1-K2μR
其中K1和K2是与试验条件有关的常数。用已知分子量的标准蛋白作标准曲线,即可求出未知蛋白的分子量。

10. 测定原子量或分子量的方法有什么及原理个是什么

分子量,组成分子的所有原子的原子量的总和。
在准确地推出化学式以前,一个亟待解决的问题就是分子的性质,特别是对于分子量的准确把握。同分异构表明具有相同实验式不同分子量的聚合物使问题变得更为复杂。由此可知一个确信无疑的分子量对于写出化全物的分子式的重要性。
19世纪中期,分子量的计算仍然是不可靠的,揣测和人为规定在这时期是司空见惯的,甚至连碳和氧的原子量也提法不一。
这时,有一位化学家看到了阿佛加德罗假说可以提供一条线索把诸多麻烦的事实穿在一起,这位化学家就是意大利人康尼查罗。1826年,康尼查罗生于意大利,幼时长于算学,15岁学医,19岁到拿波斯学习化学,21岁参加了西西里起义,失败之后侨居法国,开始了长期的化学研究工作。
1858年,康尼查罗在科学杂志上发表了《经学哲理课程提纲》一文,概述了阿佛加德罗假说在教学中的应用。他根据水银及其挥发性化合物蒸气密度的测定,建议将日拉尔所取得的原子量增加一倍。又根据汞的化合物与其他金属化合物有相似的地方,建议将铜、锌和锡的原子量加倍,康尼查罗根据金属有机物蒸气密度的测定结果和另外的实验资料,提出了必须改进许多金属的原子量,以及大量金属与基化合能力的资料统计。正确分子量的提供,是在康尼查罗论证佛加罗德罗假说的正确性时做出一个贡献,这一工作也使阿氏假说得到了新生。
康尼查罗指出,应用阿佛加德罗和安培的假说,即使在物质的组成尚不知道情况下,也可以测定它的分子量。根据上述假说,分子量与气态物质的密度成正比。康尼查罗在测定物质分子量时,选取气体中最轻的氢气作为比较的基准。他规定氢气的密度为2,因此,氢的分子量就是2.因为他认识到氢分子中含有2个氢原子,如果规定氢分子量为1作为基准,氢的原子量就将是1/2了。
康尼查罗在测定分子量的基础上,结合化学分析的结果,提出了一个合理的确定原子量的方案,取得了很好的效果。在化学理论发展中康尼查罗做出了很大贡献。值得指出的是,测定分子量以及限定原子、分子等概念的严格定义,是他多年从事教学工作的结果。然而,遗憾的是康尼查罗的论文发表后,并未引起应有的重视。

阅读全文

与测量分子量的方法相关的资料

热点内容
简单的所有雪糕制作方法 浏览:162
ob德国卫生棉使用方法 浏览:347
兔子喂养方法图片 浏览:357
黄连套种玉米种植方法 浏览:886
唾液检测幽门螺旋杆菌方法 浏览:506
治骨性关节炎的锻炼方法 浏览:39
零件几何测量检测方法 浏览:669
萧的使用方法 浏览:113
快速背书的方法gif 浏览:264
如何去除体内湿气最快方法 浏览:957
宝马ak90软件安装方法 浏览:915
有限元分析方法有哪些 浏览:207
视频回答问题及解决方法 浏览:81
脑梗保守治疗方法 浏览:765
橡胶履带横挡安装方法 浏览:208
木蜡油制作方法视频 浏览:687
21岁正确的增高方法 浏览:649
温度控制回路联校的方法和步骤 浏览:34
假樱桃的种植方法 浏览:445
自己家存酒的正确方法 浏览:689