细菌数量的测量方法

1. 细菌菌落总数的测定方法

菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。
国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。

2. 食品中细菌总数和菌落总数是怎么样测定的

食品中细菌总数和菌落总数的测定方法如下：

平板培养计数法

实验方法原理

菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1 g或1 ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 实验材料

琼脂培养基 食品检样

试剂、试剂盒

乙醇生理盐水氢氧化钠溶液

仪器、耗材

电热恒温培养箱、冰箱、恒温水浴锅、托盘、天平、电炉、吸管、广口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿、试管、试管架、酒精灯、均质器、乳钵、灭菌刀、剪刀、灭菌镊子、酒精、棉球、玻璃、蜡笔、登记薄

实验步骤

一、检验程序

菌落总数检验程序见图5—1

二、检样稀释及培养

1. 以无菌操作，将检样25 g(或25 mL)剪碎以后，放于含有225 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预先置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8 000 r／min—1 0000 r／mln的速度处理1 min做成1：10的均匀稀释液。

2. 用1 mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1 mL，沿管劈徐徐注入台有9 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同)，振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。

3. 另取1 mL的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1 mL灭菌吸管。

4. 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2—3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。

5. 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基[可放置在(45土1) ℃水浴锅内保温注入平皿15 mI一20 mL，并转动平皿位混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1 mL稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。

6. 待琼脂凝固后，翻转平板，置(36土1) ℃恒温箱内培养(48土2) h取出板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得I g(1 mL)样品所含菌落总数。

注意事项

1. 平板培养计数法只能检出生长的活菌，不能检出样品中全部的细菌数，总是比实际生存在食品中的细菌数要少，这是因为食品中存在多种细菌，它们的生活特性各异，不可能在统一培养条件下全部生长出来。但是，仍能借此评定整个食品被细菌污染的程度，所以目前一般食品的卫生检验中都普遍采用这种方法。

2. 平板菌落计数测定食品中的菌落总数，一般均采用中温培养，特别是已属于直接供食用的制成食品，因为这些食品卫生的要求，是严格防止消化道传染病病原菌和食物中毒病原菌污染，这些病原菌都属于嗜温性菌，因而测定细菌数时，采用中温培养是比较合理的。

3. 如何测物品上的细菌数量我是高中生方法尽可能简单的阐述 ~

一。使用细菌总数测试片，只需要购买细菌总数测试片，再按要求使用，有说明书。
二。红细胞计数法
首先要了解这个方法的原理。把N个红细胞与细菌均匀混合，再数出一小块区域内的红细胞数n和细菌数m。因为细胞已经均均匀混合，所以，局部的细胞数比和整体的细胞数比是接近相同的。即 n/m=N/M (n为局部红细胞数， N为总红细胞数，m为局部细菌数，M为总细菌数）n,m已数出。N又已知。所以总细菌数N就可以算出来。再取几个局部，算平均值，就能得到较精确的细菌数目。
如果这样做，只要数出一小块区域内的细菌数就可以知道总细菌数。如果不加红细胞，一个一个数，用要数到何年何月啊！细菌可是对数增长。加入红细胞的作用就像比例尺一样，地图上总有1：XXX的比例尺，你在显微镜的一个是视野里看到的红细胞数目就像地图上你测得的距离，数清一个是视野的菌数后，乘以相应分散度就可以了，分散度时用红细胞算的，具体的教材上应该有。不用也可以，不过要换成相应大小别的东西代替，总之用光学显微镜差菌数，这是不可缺少的。

这里运用了样方法，就是在若干样方中计数全部个体，然后将其平均数推广，来估计种群总体数量的方法。样方法相关知识：
①样 方： 样方也叫样本，从研究对象的总体中抽取出来的部分个体的集合，叫做样方。

②随机取样： 在抽样时如果总体中每一个个体被抽选的机会均等，且每一个个体被选与其他个体间无任何牵连，那么，这种既满足随机性，又满足独立性的抽样，就叫做随机取样(或叫做简单随机取样)。随机取样不允许掺入任何主观性，否则，就难以避免调查人员想获得调查属性的心理作用，往往使调查结果偏大。

③适用范围：植物种群密度，昆虫卵的密度 ，蚜虫、跳蝻的密度，细菌数量测量等。
样方法取样方法
①点状取样法点状取样法中常用的为五点取样法，如图A，当调查的总体为非长条形时，可用此法取样。在总体中按梅花形取5个样方，每个样方的长和宽要求一致。这种方法适用于调查植物个体分布比较均匀的情况。
②等距取样法当调查的总体为长条形时，可用等距取样法，如图B，先将调查总体分成若干等份，由抽样比率决定距离或间隔，然后按这一相等的距离或间隔抽取样方的方法,叫做等距取样法。例如，长条形的总体为100 m长，如果要等距抽取10样方，那么抽样的比率为1/10，抽样距离为10 m，然后可再按需要在每10 m的前1 m内进行取样，样方大小要求一致。

样方法的两种边角统计方式如下图（红色为需统计边线）

样方法具体步骤如下：

①确定调查对象；

②选取样方：必须选择一个该种群分布较均匀的地块，使其具良好的代表性；

③计数：计数每个样方内该种群数量；
样方法的两种边角统计方式
④计算：取各样方平均数。

4. 细菌检测最简单的方法

一.使用细菌总数测试片,只需要购买细菌总数测试片,再按要求使用,有说明书.
二.红细胞计数法
首先要了解这个方法的原理.把N个红细胞与细菌均匀混合,再数出一小块区域内的红细胞数n和细菌数m.因为细胞已经均均匀混合,所以,局部的细胞数比和整体的细胞数比是接近相同的.即 n/m=N/M (n为局部红细胞数,N为总红细胞数,m为局部细菌数,M为总细菌数）n,m已数出.N又已知.所以总细菌数N就可以算出来.再取几个局部,算平均值,就能得到较精确的细菌数目.
如果这样做,只要数出一小块区域内的细菌数就可以知道总细菌数.如果不加红细胞,一个一个数,用要数到何年何月啊!细菌可是对数增长.加入红细胞的作用就像比例尺一样,地图上总有1：XXX的比例尺,你在显微镜的一个是视野里看到的红细胞数目就像地图上你测得的距离,数清一个是视野的菌数后,乘以相应分散度就可以了,分散度时用红细胞算的,具体的教材上应该有.不用也可以,不过要换成相应大小别的东西代替,总之用光学显微镜差菌数,这是不可缺少的.
这里运用了样方法,就是在若干样方中计数全部个体,然后将其平均数推广,来估计种群总体数量的方法.样方法相关知识：
①样 方：样方也叫样本,从研究对象的总体中抽取出来的部分个体的集合,叫做样方.
②随机取样：在抽样时如果总体中每一个个体被抽选的机会均等,且每一个个体被选与其他个体间无任何牵连,那么,这种既满足随机性,又满足独立性的抽样,就叫做随机取样(或叫做简单随机取样).随机取样不允许掺入任何主观性,否则,就难以避免调查人员想获得调查属性的心理作用,往往使调查结果偏大.
③适用范围：植物种群密度,昆虫卵的密度 ,蚜虫、跳蝻的密度,细菌数量测量等.
样方法取样方法
①点状取样法点状取样法中常用的为五点取样法,如图A,当调查的总体为非长条形时,可用此法取样.在总体中按梅花形取5个样方,每个样方的长和宽要求一致.这种方法适用于调查植物个体分布比较均匀的情况.
②等距取样法当调查的总体为长条形时,可用等距取样法,如图B,先将调查总体分成若干等份,由抽样比率决定距离或间隔,然后按这一相等的距离或间隔抽取样方的方法,叫做等距取样法.例如,长条形的总体为100 m长,如果要等距抽取10样方,那么抽样的比率为1/10,抽样距离为10 m,然后可再按需要在每10 m的前1 m内进行取样,样方大小要求一致.
样方法的两种边角统计方式如下图（红色为需统计边线）
样方法具体步骤如下：
①确定调查对象；
②选取样方：必须选择一个该种群分布较均匀的地块,使其具良好的代表性；
③计数：计数每个样方内该种群数量；
样方法的两种边角统计方式
④计算：取各样方平均数.

5. 紫外分光光度计如何测量细菌数目

【1】可以紫外分光法测量：OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。你是什么菌种？用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。 用测OD方法画微生物生长曲线时，同一株菌的起始培养浓度可以准备多管（根据检测点的需要，如需检测10个点，就准备10管），然后每个点取一管出来测OD值就行了。
【2】还有就是利用琼脂板涂板法： 是最准确地一种，可以知道活菌的数量。可以用OD600,对琼脂板涂板法的菌落数做条曲线，以后就测OD就可以测量细菌的数目了。

6. 测定微生物数量的方法

现在用的多的就是这几种，楼主挑着看吧

细菌计数1.计数器测定法：
即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。本法简便易行，可立即得出结果。
本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。
2、电子计数器计数法:
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
3、活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。
4、比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。
5、测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。
此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
6、测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分，含量较稳定，测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。
7、颜色改变单位法（colour change unit,简称CCU）
这种方法通常用于很小，用一般的比浊法无法计数的微生物，比如支原体等，因为支原体的液体培养物是完全透明的，呈现为清亮透明红色，因此无法用比浊法来计数，由于支原体固体培养很困难，用cfu法也不容易计数，因此需要用特殊的计数方法，即CCU法。它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标，来计数微生物的相对含量的，下面以解脲脲原体为例单介绍其操作：，简
（1）取12只无菌试管，每一管装1.8ml解脲脲原体培养基。
（2）在第一管加入0.2ml待测解脲脲原体菌液，充分混匀，从中吸取0.2ml加入第二管，依次类推，10倍梯度稀释，一直到最末一管
（3）于37度培养，以培养基颜色改变的最末一管作为待测菌液的CCU，也就是支原体的最大代谢活力，比如第六管出现颜色改变，他的相对浓度就是10的6次方CCU/ml.
一般来说，比浊法和菌落计数法就可以满足绝大多数细菌的计数，但是对支原体这样比较特殊的微生物，用CCU法比较合适。

7. 如何检测空气中细菌总数

检测空气中细菌总数的方法：撞击法
原理：采用撞击式空气微生物采样器采样通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

8. 如何测量微生物的菌数

日常生活中我们需要进行菌落总数检测的除了我们关心的各种食物外，还有水、化妆品、空气等。每种都有对应的检测标准和方法。此外，还有关于公共场所的卫生标准里也有一些物品是需要进行菌落计数的，比如旅馆里的浴缸，毛巾，拖鞋，卧具，茶具，理发店的理发用具等等，对于这些物品的菌落计数，我们一般会采用用无菌生理盐水湿润的棉拭子在相应位置涂抹一定面积（如茶具是在内、外缘涂抹50平方厘米），然后放入10毫升生理盐水内，振荡混匀后1:10稀释（通常会做1:10,1:100和1:1000三个稀释度），吸取1毫升稀释后的检样注入灭菌平板。平板放在适宜的温度培养，等平板上长出来菌落进行菌落计数也是有一套标准来进行判读和计算的（内容还是比较多的，手懒不想打了。）总之，这样计数出来的结果，我们称之为菌落总数。

其实，在评价卫生质量尤其是食品的卫生质量时，还有一个重要的指标——大肠菌群：一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌，因为主要来源是人畜粪便，因此能作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有无污染肠道致病菌的可能。食品中的大肠菌群数以100毫升（克）检样内大肠菌群最可能数（MPN）表示。最后，卫生部门还会对相应的致病菌进行专门的检测，沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌等等都有一套完整的检测流程和标准。

9. 食品安全检验中细菌总数的测定有哪几中方法

现在一般是用平板计数法，以前的标准是用营养琼脂，新标准时用平板计数琼脂。还可以用快速测试纸检验。前者比较普遍。