‘壹’ MDA(丙二醛)含量的计算公式还有单位是什么
大哥什么里面测量含量?我给的是动物内脏里测它的含量
MDA(nmol/mg蛋白)=样品高峰-空白高峰/标准高峰-空白高峰*5nm/样品含量*实际用量
‘贰’ 丙二醛的提取及含量测定的方法
刚做完毕业设计正好也有,就跟你分享吧。希望能帮到你。
丙二醛(MDA)含量的测定
① 测定步骤
称取剪碎的试材1g,加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆在4000r/min离心10分钟,上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水),加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液,混匀物于沸水浴上反应15min,迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。
② 计算
(3-6)
式中:C—MDA的浓度, ;
A450,A532 和A600—分别代表450、532和600nm波长下的吸光度值。
‘叁’ 丙二醛用TBA检测为什么要测600nm的值
600nm一般用于排除非特异性吸收,如样本自身的浊度或者颜色所导致吸光值上升,最终要减去
丙二醛在酸性和高温条件,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二酮),在532nm处有最大光吸收,在600nm处有最小光吸收,该复合物的吸光系数为155[mmol/( L.cm )] ,可按公式:A532-A600=155000×C×L算出MDA浓度C(μmol/L),进一步算出单位重量鲜组织中 MDA 含量(μmol/g)。式中,A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。L为比色杯厚度(cm )。
需要指出的是,植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰,经试验,可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
C(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450
式中: A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm处的吸光度值。算出植物样品提取液中MDA的浓度后,可进一步算出其在植物组织中的含量。
‘肆’ 丙二醛的测量方法
一:原理
丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm,但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加,因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显着增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值,所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug/g,根据植物样品量和提取液的体积,加入Fe3+的终浓度为0.5umol/L。
二:试剂
1:质量分数为10%三氯乙酸(TCA);
2:质量分数0.6%硫代巴比妥酸:先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解,再用10%的三氯乙酸定容;
三:方法
1:MDA的提取 称取剪碎的试材1g,加入2mll0%TCA和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA研磨,匀浆在4000r/min离心10min,上清液为样品提取液。
2:显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水),加入2ml0.6%TBA溶液,混匀物于沸水浴上反应15min,迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。
四:结果
C1=11.71D450
C2={6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1
C1——可溶性糖的浓度(mmol/L)
C2——MDA的浓度(·umol/L)
D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。
N:提取液总体积(ml)
W:植物组织鲜重
‘伍’ 丙二醛测量方法
我看见有一个答案。。。
‘陆’ 丙二醛含量的测定中为什么要加TCA
TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:①在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.②作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀.③随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显; 在电泳时使用TCA对蛋白质样品的浓缩或除盐时,对于分子质量大的蛋白质,要慎重选择TCA.对小分子量蛋白质的浓缩,采用TCA时也有两点需要注意:一是用TCA沉淀后,尽量用丙酮彻底抽提TCA;二是样品处理后要尽快进行电泳分析,以免发生聚集及断裂,造成结果分析的不准确。
‘柒’ 丙二醛的检测方法
含有醛基 可与氢氧化铜溶液煮沸反应生成 氧化亚铜砖红色沉淀 或与银氨溶解发生银镜反应
‘捌’ 丙二醛的提取与含量测定
刚做完毕业设计正好也有,就跟你分享吧。希望能帮到你。丙二醛(MDA)含量的测定① 测定步骤称取剪碎的试材1g,加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆在4000r/min离心10分钟,上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水),加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液,混匀物于沸水浴上反应15min,迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。② 计算 (3-6)式中:C—MDA的浓度, ; A450,A532 和A600—分别代表450、532和600nm波长下的吸光度值。