酶标仪动态测量方法

㈠ ELISA酶标仪,能连续动态测量OD值吗，就是横坐标为时间，纵坐标为OD值

可以连续读出OD数值，如果不可以的话，医院那么大标本量如何能连续实验呢。

㈡ 酶标仪检测luminescence怎么设置

酶标仪检测luminescence一般设置为0.1S~1S。

用来进行可见光与紫外光吸光度的检测，特定波长的光通过微孔板中的样品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系，由此可以用来定性和定量的检测，光吸收的检测技术成熟，成本低，操作简单。

但是动态范围窄，灵敏度比较低，特异性不强，一般可见光和紫外光分别采用钨灯及氘灯作为光源，而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换，适应不同测量波长的需求。

酶标仪检测介绍：

通过发射光栅后到达检测器，荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例，荧光检测灵敏度高，可实时检测，检测模式多样，但是容易受外界干扰，激发光与发射光容易互相影响，干扰检测。

来自生物化学反应中的自发光，可分为辉光型和闪光型两种类型，辉光型发光持久，稳定，能持续一段时间；闪光型发光时间短，变化快，稳定性不强需要应用自动加样器才可以进行，化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系。

㈢ 酶活力的测定方法及原理

酶活力的测定方法：有两种主要方法即终止反应法和连续反应法。
终止反应法：是在恒温反应系统中，每隔一定时间，取出一定体积的反应液，用强酸强碱或SDS以及加热等使反应立即停止，然后用化学法放射性化学法或酶偶联法分析产物的形成量或底物的消耗量。这是最经典的酶活力测定方法，几乎所有的酶都可以根据这一原理设计出具体的测定方法。
连续反应法：无须终止反应，而是在酶反应过程中用光化学仪器或电化学仪器等来监测反应的进行情况，对记录结果进行分析，然后计算出酶活力。
酶活性测定的原理：
1. 超氧物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）
活性的测定 SOD采用氮蓝四唑（nitro-blue tetrazolium，NBT）法（Beauchamp和Fridovich，1971）。反应步骤为：取200μl粗提液，加入3.7 ml NBT反应液50mmol/LpH7.8的磷酸缓冲液（PBS）配制的含77.12μmol/L氮蓝四唑, 100μmol/LEDTA－Na2和13.37mmol/L甲硫氨酸溶液〕，在30℃下保温2分钟后加入100μl核黄素溶液（pH7.8的50mmol/L磷酸缓冲液中含80.2μmol/L 核黄素和100μmol/LEDTA－Na2），在4000Lx日光下反应20min。然后迅速测定A560。以不照光的管做空白。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL。酶活性按以下公式计算：以抑制NBT光化还原的50％为一个SOD活性单位，结果以U/mg蛋白表示。以加缓冲液代替酶液的作为对照。
SOD总活性＝(Ack－AE)×V/(Ack×0.5×W×Vt) 式中， Ack为照光对照管的吸光度；AE为样品管的吸光度；V为样品液总体积（ml）；Vt为测定时样品用量（ml）；W为样品鲜重（g）或蛋白质含量（mg）。
2. 过氧化氢酶（Catalase，CAT）
活性测定 CAT 活性参照Aebi (1984)[7]的方法进行测定。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL 。400 μL反应液含50 mmol/L的PBS (pH 7.0)，30 mmol/L的H2O2和50 µL粗酶液。反应从加入过氧化氢开始计时，连续测定在240 nm吸光度的降低值。酶活性定义为：一个过氧化氢酶单位相当于在规定条件下于温度25℃，pH7.0条件下1分钟分解1μmol过氧化氢所需酶量，结果以U/mg蛋白或U/g鲜重表示。
3. 多酚氧化酶（Polyphenoloxidase，PPO）
活性的测定 PPO活性测定采用邻苯二酚法（Aquino-Bolaños和Mercado-Silva，2004）。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL。350µL反应液（用50mmol/L，pH6.4的PBS配制，内含100µmol/L邻苯二酚）中加入50 µL的粗酶液，平衡1分钟后连续测定398nm吸光度的变化。以1分钟内398nm吸光度上升0.01为一个酶活性单位，结果以U/mg蛋白或U/g鲜重表示。
4. 过氧化物酶（Peroxidase，POD）
活性测定POD活性测定采用愈创木酚法（Lurie等，1997)。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL。反应体系为30μL粗酶液，290 µL 0.3%愈创木酚（用50 mmol/L的PBS配制，pH 6.4）和 80µL0.3%H2O2（用50 mmol/L的PBS配制，pH 6.4）。反应在加入H2O2 后开始准确记时。连续吸光度在470 nm的上升值。酶活性以每分钟上升0.01为一个单位，结果以U/mg蛋白或U/g鲜重表示。

㈣ 用酶标仪如何测酶活

这东西是不可以直接测酶活的。 除非你的酶能使特定的底物显色，然后再用酶标仪测出其OD值，再与标准品作对比才可以的哦。 还要注意的是，你使用的底物的吸收波长应该与酶标仪兼容。

㈤ 请问如何用酶标仪批量测DNA浓度简述过程，谢谢！

如果没有石英的酶标板，酶标仪不能发280nm的光就做不了。
现在很多酶标仪会配专门的核酸检测板，上面有10几个石英的光路系统，只要将2ul，甚至更少的样品点到石英材料上，就可以一次测10几个样了。不过板子比较贵。
如果没有配特制的板，最好要找一些微量的96孔板（例如半孔板），要求上样量少，把DNA稀释一定比例后加到酶标板每一个孔中（要保证最低加样体积）进行检测。比比色皿好的一点就是，不需要测一个样，洗一次比色皿。

㈥ 如何用酶标仪检测荧光（荧光，酶标仪，荧光

酶标仪的使用方法可以参考： 1.开启仪器电源开关，预热5分钟，同时启动电脑。 2.启动Magellan.exe程序，加入程序主界面，仪器微孔板架同时自动打开。 3.将待测微孔板在板架上放好。 4.根据不同的测量要求，设置好测定波长和测量模式后，进行检测

㈦ 酶标仪可以检测哪些项目

检测项目主要包含以下几项：

1、传染病类：例如肝炎，艾滋病，衣原体，肺炎支原体，梅毒，水痘等。

2、甲状腺：促甲状腺激素，T3T4等。

3、不孕症：性激素六项，泌乳素，雌三醇，生长素，抗精子抗体等。

4、优生优育：弓形虫抗体，巨细胞病毒，风疹病毒等。

5、肿瘤标志物：癌胚抗原，甲胎蛋白，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，胃肠癌等。

6、糖尿病：C肽，胰岛素，胰岛素抗体，胰岛素原等。

7、过敏原，皮肤不耐受等。

莱恩德LD-96A酶标仪在食品以及农畜业的检测项目包括：营养成分，添加剂，农药残留量，菌毒素，无机毒素，抗生素激素残留，致癌物质残留，有毒有害物质污染等。

酶标仪的分类：

按照酶标仪功能的划分：

1、光吸收酶标仪：是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测，特定波长的光通过微孔板中的样品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系，由此可以用来定性和定量的检测，光吸收的检测技术成熟，成本低，操作简单，但是动态范围窄。

灵敏度比较低，特异性不强，一般可见光和紫外光分别采用钨灯及灯作为光源，而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换，适应不同测量波长的需求。

2、荧光酶标仪：是用来进行荧光的检测，通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后，会发出波长更长的发射光，通过发射光栅后到达检测器。

荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例，荧光检测灵敏度高，可实时检测，使用方便，检测模式多样，但是容易受外界干扰，激发光与发射光容易互相影响，干扰检测。

3、化学发光酶标仪：是来自生物化学反应中的自发光，可分为辉光型和闪光型两种类型，辉光型发光持久，稳定，能持续一段时间；闪光型发光时间短，变化快，稳定性不强。

需要应用自动加样器才可以进行，化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系，化学发光酶标仪灵敏度非常高，动力学范围广。

㈧ 如何用酶标仪测定RNA浓度

换滤光片，340、280、260、230
石英的96孔板，每个孔的体积为200ul，空白直接200ulDEPC水，实验组196ulPEPC水+4ulRNA
如果换了滤光片了，测试步骤与MTT测试步骤差不多，主要就是设置吸光度，点击四次吸光度，设置为340、280、260、230。
1、进板后确定板类型和板孔
2、设置吸光度，点击四次吸光度，分别设置为340、280、260、230。
3、开始

酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。