1. 基因检测的步骤是什么
基因检测口腔拭子采集,具体步骤:
1.基因检测准备棉签(单头),伸进口腔,从口腔内侧两颊粘膜处(腮帮子内侧)反复擦拭20次以上,取出采样拭子棉签,放在干净白纸上阴干。
2.以同样的方法采集5根拭子棉签。阴凉干燥后干净的纸质信封内保存
3.请不要忘记对样本做好标记。不要和其他人物质互相接触。以免接触其他dna, 上述方法采集的样本,可以在干燥环境下保存2-3个月。不管采集什么样本,鉴定结果的准确性是一样的。因为样本采集只是从中提取dna,而每个人的dna是终身不变的,所以即使采集不同的样本,鉴定结果的准确性是一样的。口腔拭子dna提取的方法口腔拭子dna提取可以用商业化的试剂盒,方便简单易操作,用华晨阳的配套dna提取试剂盒,主要是针对口腔脱落细胞dna提取的。口腔拭子在哪里买?
2. 基因检测有哪些方法
基因检测的方法不胜枚举,基本的步骤是样本的获取(包括血液、唾液、组织样本等)——处理(如DNA的提取与纯化、文库构建等)——序列测定——序列分析——结果解读——报告撰写。广泛应用的核酸序列测定方法是直接测序法,目前最先进而且被广泛使用的方法和仪器有第一代的Sanger测序法,第二代的高通量测序法(如美国Illumina公司的Hiseq测序仪和华大基因子公司CompleteGenomics开发的测序方法)等。目前也已出现被称为第三代测序技术的方法,如单分子实时DNA测序法。
第一代:sanger测序
第一代的Sanger测序技术的优点是,测序读长长,能达到800-1K bp,且测序用时短,只需要几十分钟即可完成一次测序,测序准确度高,目前仍是测序的金标准;缺点是通量低、成本高。
第二代:高通量测序(NGS)
第二代测序技术的优点是测序通量和效率高,成本低廉;缺点是测序读长普遍较短,且用时较长。以目前应用最为广泛的测序仪之一的illumina公司Hiseq2000测序仪为例,其一次测序的数据产出量可达500
Gb,但读长为100 bp,且需要耗时14天左右。而Life technology公司的IonProton测序仪是边合成边通过反应体系电位的微小差别来测定碱基序列。
第三代:单分子/纳米孔测序
由于第二代技术存在短读长和耗时长的缺陷,人们希望第三代测序技术能解决这些缺陷,所以第三代测序技术在长读长和短耗时出发,目前尚未完全成熟,市场应用面还不算广,而且各种测序仪之间差异较大,测序原理也是各出奇招。如Pacific Bioscience公司则是通过在PCR合成DNA的过程中,用显微镜检测由荧光基团标记的dNTP反应后释放出的荧光来测序。而一直未投产的牛津大学研发的测序仪,则是通过检测由核酸外切酶剪切DNA时,“掉落”到检测微孔的核苷酸来测序。
3. 目的基因的检测与鉴定过程是什么
目的基因的检测是看看目的基因进入受体细胞没,所以先利用基因探针检查受体细胞中是否含有目的基因;其次需要考虑,受体细胞中有了目的基因后是否能顺利转录,因此还是基因探针来检查信使RNA;含有信使RNA后还得考虑是否能翻译形成蛋白质,利用抗原-抗体杂交来检测蛋白质。最后,考试中经常考察最后的一步,有了蛋白质后是否就有了满意的性状,即个体生物学水平上的检测,例如,我国的抗虫棉经过了多次基因改造后才得到我们满意的性状。
4. 目的基因的检测
可以有很多种方法的~
可以像楼上所说的DNA杂交技术~
还可以用蛋白质检验~例如大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒成为重组质粒并被转入受体细胞后,可根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得目的基因
还可以运用RNA杂交技术检验~具体过程像DNA杂交技术~不过是换成RNA~
还可以用抗原-抗体技术检验~例如转基因抗虫稻米~想知道目的基因是否起作用~捉些虫子进去~看看虫子会不会吃~不会吃就说明目的基因成功导入了~
方法应该还有很多~我所学的就是这些~希望对你有用~
5. 目的基因的检测的步骤及方法
我是高二学生,课本上说的是用标记基因的抗性进行测试(这是检测目的基因是否导入受体细胞的方法) 用抗原抗体杂交技术的方法检测目的基因是否在受体细胞表达. 不知道你问的是哪个?
6. 怎样筛选目的基因
有4种方法:
1、从基因文库中获得目的基因.
方法:
第一步,通过PCR方法将目的基因已知的部分核苷酸序列扩增出来,进行放射性同位素标记(也可以用别的标记方法进行,如生物素、荧光素等),即用标记了放射性同位素的目的DNA片段作为探针,与扩增出来的DNA杂交.
第二步,将基因文库中的所有菌落转移至硝酸纤维膜上(也可以用其他类型的膜),然后,通过处理溶解消化掉细菌中的蛋白质,并使DNA固定在膜上.
第三步,按Southern杂交的方法进行杂交.
第四步,在X光底片上出现黑斑的菌落,这表明这个菌落中含有所需要的目的基因(若选用别的标记方法,有阳性信号的菌落则含有所需要的目的基因).
第五步,从该菌落中再提取目的基因.
2、PCR 筛选法方法:
第一步:将反应体系(包括双链模板、引物、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核糖核苷酸以及酶促反应所需的离子等)加热至90~95 ℃,使双链DNA模板两条链之间的氢键打开,变成单链DNA,作为互补链聚合反应的模板.
第二步:将反应体系降温至55~60 ℃,使两种引物分别与模板DNA链3′端的互补序列互补配对,这个过程称为复性.
第三步:将反应体系升温至70~75 ℃,在耐高温的DNA聚合酶催化作用下,将与模板互补的单个核苷酸加到引物所提供的3-OH上,使DNA链延伸,产生一条与模板链互补的DNA链.
上述三步反应完成后,一个DNA分子就变成了两个DNA分子,随着重复次数的增多,DNA分子就以2n的形式增加.PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的.
3、核酸杂交法、
DNA和DNA分子之间的杂交.目的基因是否整合到受体生物的染色体DNA中,这在真核生物中是目的基因可否稳定存在和遗传的关键.如何证明这一点,就需要通过Southern杂交技术.基本做法是:
第一步,将受体生物DNA提取出来,经过适当的酶切后,走琼脂糖凝胶电泳,将不同大小的片段分开;
第二步,将凝胶上的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上;
第三步,用标记了放射性同位素(或生物素)的目的DNA片段作为探针与硝酸纤维素膜上的DNA进行杂交;
第四步,将X光底片压在硝酸纤维素膜上,在暗处使底片感光;
第五步,将X光底片冲洗,如果在底片上出现黑色条带,则表明受体植物染色体DNA上有目的基因.
4、免疫筛选法
Western杂交──蛋白质分子(抗原—抗体)之间的杂交.它是检测目的基因是否表达出蛋白质的一种方法.具体做法是:
第一步,将目的基因在大肠杆菌中表达出蛋白质;
第二步,将表达出的蛋白质注射动物进行免疫,产生相应的抗体,并提取出抗体(一抗);
第三步,从转基因生物中提取蛋白质,走凝胶电泳;
第四步,将凝胶中的蛋白转移到硝酸纤维素膜上;
第五步,将抗体(一抗)与硝酸纤维素膜上的蛋白杂交,这时抗体(一抗)与目的基因表达的蛋白(抗原)会特异结合.由于这种抗原—抗体的结合显示不出条带,所以加入一种称为二抗的抗体,它可以与一抗结合,二抗抗体上带有特殊的标记.如果目的基因表达出了蛋白质,则结果为阳性.
7. 基因检测是怎么做的流程是什么样的
中源协和基因检测采样方法及流程(采样方法有2种,下面分别描述)
(一)、口腔黏膜采样检测方法很多检测单位采用口腔粘膜脱落细胞样本采集方式,采集程序如下:口腔清洁:用清水漱口一到二次。采前准备:从盒内取出1号管(平底),轻甩一下上下摇动使生理盐水全部沉积在管底。拧开盖子将管立于桌上备用。刮取细胞:取出口腔粘膜刮勺,伸入口腔将刮勺的头部带齿部分贴在一侧口腔内侧的脸颊部位于上下牙齿之间的部位,稍用力(相当于刷牙的力气)按前后方向在口腔粘膜上刮十余次,再用刮勺头部的另一侧(勿须转动刮勺)刮取另一侧的口腔粘膜,刮取十余次。收集细胞:将刮勺迅速浸入到1号管的生理盐水中搅动,将粘膜细胞洗到水中。将刮勺提离水面,提留片刻并抖动刮勺使勺上的水全部滴入管中。此时可见生理盐水溶液由清变浊。固定细胞:取出2号管,轻甩一下使溶液全部沉积在管底。将1号管中的溶液全部倒入2号管中,盖上并拧紧2号管的螺旋盖,上下用力摇10次。邮寄样品:将2号管置入自封袋的纸袋中,并将自封袋封紧送交检测。
(二)唾液采样检测方法目前出现较新的基因样本采集方法——唾液采样检测法,此方法更加方便快捷,并且实现无创采集,检测效果和提取口腔黏膜检测效果一样。基因样本采集流程如下:1、口腔清洁:讲解采样流程及注意事项,要求客户用清水漱口,半小时内不得进食、饮水、吸烟、饮酒或嚼口香糖等。2、采前准备:戴上一次性医用手套(采用医院标准戴法及程序),打开采集箱准备采样。从包装盒内取出采样管,拔出塞盖后,将采样管插入到采样漏斗中。4、采取唾液:通过采样漏斗将唾液收集到采样管中,直至采样管上标签所示位置。注意:要保证实际的唾液量能达到刻度线,上层的泡沫不包括在内,且必须在半小时内完成唾液采样过程。5、保存样品:从包装盒内取出杯盖,杯盖内含有固定液,将杯盖对准采样漏斗顺时针方向旋紧。确认杯盖旋紧后,颠倒10次,使唾液和固定液充分混匀,保持杯盖在上方,将采样管垂直放置5分钟。保持采样管垂直,拔出采样漏斗,用塞盖盖紧采样管,上下颠倒混匀10次。注意:杯盖内的固定液应该清亮、无色、透明,如有浑浊请抛弃。请不要用手撕开杯盖内的塑料薄膜。6、邮寄样品:丢弃采样漏斗与采样杯盖,将采样管与填妥的资料置入自封袋的纸袋中,并将自封袋封紧送交检测。
中源协和基因检测建议:利用基因检测技术在疾病发生前就发现疾病发生的风险,提早预防、或采取有效的干预措施。
8. 基因检测方法有哪些
基因是遗传的基本单元,携带有遗传信息的DNA或RNA序列,通过复制,把遗传信息传递给下一代,指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表达。基因检测是通过血液、其他体液、或细胞对DNA进行检测的技术,是取被检测者外周静脉血或其他组织细胞,扩增其基因信息后,通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测,分析它所含有的基因类型和基因缺陷及其表达功能是否正常的一种方法,从而使人们能了解自己的基因信息,明确病因或预知身体患某种疾病的风险。
基因检测可以诊断疾病,也可以用于疾病风险的预测。疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因。应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。
一般有三种基因检测方法:生化检测、染色体分析和DNA分析。
1.生化检测
生化检测是通过化学手段,检测血液、尿液、羊水或羊膜细胞样本,检查相关蛋白质或物质是否存在,确定是否存在基因缺陷。用于诊断某种基因缺陷,这种缺陷是因某种维持身体正常功能的蛋白质不均衡导致的,通常是检测测试蛋白质含量。还可用于诊断苯丙酮尿症等。
2.染色体分析
染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常,而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。
常见的染色体异常是多一条染色体,检测用的细胞来自血液样本,若是胎儿,则通过羊膜穿刺或绒毛膜绒毛取样获得细胞。将之染色,让染色体凸显出来,然后用高倍显微镜观察是否有异常。
3.DNA分析
DNA分析主要用于识别单个基因异常引发的遗传性疾病,如亨廷顿病等。DNA分析的细胞来自血液或胎儿细胞。
基因检测可以分为以下五类:
1.基因筛检
主要是针对特定团体或全体人群进行检测。大多数通过产前或新生儿的基因检测以达到筛检的目的。
2.生殖性基因检测
在进行体外人工授精阶段可运用,筛检出胚胎是否带有基因变异,避免胎儿患有遗传性疾病。
3.诊断性检测
多数用来协助临床用药指导。
4.基因携带检测
基因携带者如果与某些特殊基因相结合,可能会导致下一代患基因疾病,通过基因携带者的检测可筛检出此种可能,作为基因携带者婚前检查、生育时的参考。
5.症状出现前的检测
检测目的是了解健康良好者是否带有某种突变基因,而此基因与特定疾病的发生有密切的联系。
临床意义
1.用于疾病的诊断
如对结核杆菌感染的诊断,以前主要依靠痰、粪便或血液培养,整个检验流程需要在两周以上,采用基因诊断的方法,不仅敏感性大大提高,而且在短时间内就能得到结果。
2.了解自身是否有家族性疾病的致病基因,预测患病风险
资料证实10%~15%的癌症与遗传有关,糖尿病、心脑血管疾病等多种疾病都与遗传因素有关。如具有癌症或多基因遗传病(如老年痴呆、高血压、糖尿病等)的人可找出致病的遗传基因,就能够有针对性地调整生活方式,预防或者延缓疾病的发生。
3.正确选择药物,避免滥用药物和药物不良反应
由于个体遗传基因上的差异,不同的人对外来物质产生的反应也会有所不同,因此部分患者使用正常剂量的药物时,可能会出现药物过敏、红肿发疹的现象。根据基因检测的结果,可制定特定的治疗方案,从而科学地指导使用药物,避免药物毒副反应。
9. 如何对目的基因进行检测与鉴定
可以从三方面对目的基因进行鉴定:
1、直接测定:按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。
2、mRNA测定:根据目的基因组得出其转录的mRNA组成,利用探针检测。
3、蛋白测定:可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白,也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。
(9)目的基因检测的方法和步骤扩展阅读:
对目的基因进行鉴定和检测的多种方法:
基因鉴定技术是一项生物学检测技术,人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA,每个人的DNA都不完全相同,人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多,因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异,由此可以识别不同的人。
所谓“DNA指纹”,就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质,因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。
基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交,这种分子杂交是在缓冲液中进行的,由于DNA分子杂交时,两个分子相遇的机会不是很大,所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子。
而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段,所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的,而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。
网络-对目的基因进行检测与鉴定
10. 高二生物中的目的基因的检测与鉴定
目的基因的检测与鉴定分分子水平检测和个体水平鉴定。
个体水平鉴定简单说就是把导入了目的基因的生物体培养出来,看生物个体中是否能表达出你所需要的性状。
分子水平检测就相当麻烦了,它有三个步骤。
首先,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是采用DNA分子杂交技术,即将转基因生物的基因组DNA提取出来,同时,在外面(像基因文库中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与基因组DNA杂交,来检测。(实际上就是DNA复制的情况,DNA复制时,一条双链的DNA分子解旋成了两条单链的DNA,而探针也是一条双链的DNA片段解旋成了两条单链的DNA片段,因为探针上也有目的基因,基因组的DNA上也有目的基因,在重新形成新的2条DNA,也就是复制时,碱基互补配对,则含目的基因的探针上的单链能与同样含目的基因的基因组DNA单链配对,形成一条新的DNA双链分子,一旦形成新的DNA分子后,放射性标记能在新的DNA分子中含目的基因处发出荧光,从而表明目的基因已导入。)
其次,就是大大你说的检测目的基因是否转录出了mRNA,方法和上面一样,但不同之处是,从转基因生物中提取出的是mRNA,同样,同时,在外面(像基因文库中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与mRNA杂交,来检测。(这里实际上和DNA的转录翻译有点像,毕竟mRNA是单链的,实际上是探针DNA解旋成两条单链的DNA片段,就像转录一样,这时的mRNA会与单链的DNA碱基互补配对,显现出标记的同位素荧光,表明mRNA上有目的基因。)所以说,mRNA与目的基因杂交,是和DNA杂交,不是mRNA与目的基因的转录出的mRNA杂交。
最后要检验的就是看目的基因能否翻译成蛋白质,就不多说了。
不知道讲的清不清楚,语文表达有限,希望你能理解啊。