bod5检测方法简单步骤

‘壹’ 求检测海水BOD的具体操作方法

生化需氧量（BOD）是指在有氧条件下，好氧微生物在分解水中有机物和还原性无机物质过程中所消耗的溶解氧的量。由于生物氧化过程非常缓慢，故目前国内外广泛采用20℃五天培养法来测定BOD值，这就是BOD 5 的意义。
仪器法测定BOD 5 的实验步骤：采集水样→水样稀释→水样培养测定→数据处理。
用BOD作为水质有机污染指标，是从英国开始的，以后逐渐被世界各国所采用。当水体受到有机物污染时，有机物质就会被好氧微生物所分解，从而消耗水中的溶解氧。有机物含量越高，溶解氧的消耗就越多，BOD值就越高，水质也就越差。所以BOD是反映水体被有机物污染程度的一项综合指标。那么如何测定水体的BOD值呢？ 第一步：水样稀释用玻璃棒取少量水样涂在pH试纸上，测定pH值。如果水样的pH值不在6~8之间，需用盐酸或氢氧化钠溶液进行中和。通过测定COD值，估计BOD5在3~5之间，因此确定稀释比为1。取四只干净的250mL溶解氧瓶和一只干净的500mL量筒，溶解氧瓶要带有磨口玻塞，并具有供水封闭的钟形口。从保温箱中取出水样，向量筒中加入250mL水样。再用烧杯向量筒中加入250mL稀释水至量筒满刻度位置，并搅拌。
第二步：水样培养测定用虹吸法将混合均匀的水样分别装入两只干净的溶解氧瓶。在两只盛有水样的溶解氧瓶外壁分别贴上标有"水样1"和"水样2"的标签，并在其中一个溶解氧瓶中加入一个搅拌子，盖上瓶塞，用水封好。再用虹吸法将稀释水分别装入其余的二只溶解氧瓶。同样用标有"稀释水1"和"稀释水2"的标签贴于瓶外壁，然后在其中一个溶解氧瓶中加入一个搅拌子，盖上瓶塞，用水封好。将四只溶解氧瓶分为二组，将盖好盖子的二只溶解氧瓶放入20℃恒温培养箱，培养5天。将余下的一组水样立即进行测定。接通电源，打开仪器开关，预热30min。将溶解氧电极从电极套中取出。将溶解氧电极探头分别缓缓插入装有待测液的二只溶解氧瓶中，即开始进行测定。待仪器显示瓶右边出现"rady"字样时，即开始读数并记录数据。测量完毕后关闭仪器，切断电源。用蒸馏水将电极冲洗干净，晾干后放回原处。5天后取出培养箱中的另一组样品进行溶解氧测定，方法与前面的步骤完全相同，记录相应的测定结果。Lovibond ET99724BOD测定仪的特点：
1. 采用呼吸压力法BOD测定原理,高度环保无汞测量，测值准确；2. 用户可设定BOD培养周期（1-28天），满足不同实验要求；
3. 自动选择测量间隔，可分别查看每个时段的测量数据；
4. 最大量程为0-4000 mg/L，7种量程可由用户选择；
5. BOD值自动存储测量头中，用户可随时快捷调用；
6. 具有自动开启功能，待样品温度平衡后，自动开启测量；
7. 超薄高性能磁力搅拌系统，确保培养期间的均一条件；
8. 具有RS232接口，无需任何软件即可实现与电脑的快速连接与数据传输。常规条件下量程选择与精度对应表：ET99724BOD测定仪的技术参数：

‘贰’ 测量BOD实验步骤

110．1．2测定方法的选择

(1)直接培养法：此法适用于BOD5值不超过7mg／L的水样。

(2)稀释培养法：一般水样BOD5在10mg／L以上采用此法。

(3)测定瞬时需氧量。对于含有硫化物、亚硫酸盐、亚铁等还原性无机物的水样，有时需要测定瞬时需氧量(1DOD)。一般情况可省去此步骤。

110．1．3．5 BOD稀释水纯度的影响因素

所谓BOD，是水样中的有机物在生物化学分解过程中所消耗氧的量。它是以水样在一定温度(20℃)下，在密闭容器中保存一定时间(一般为5日)后，溶解氧的减少量来表示。当耗氧量超过水样中溶解氧时，需用配制的饱和“稀释水”将水样适当稀释，再测定氧的消耗量。因此稀释水的纯度是影响测定结果的重要因素。根据实验研究认为如下因素不可忽视。

(1)BOD稀释水的空白值

在不控制实验条件下，按常规方法测定81次稀释水BODs值，将这些数据进行统行处理，其最小值为O．01mg／L，最大值为1．06mg/L，并以测定值为横座标，检出频率％为纵座标，在半对数座标上作图，仅有34．6％测定数据在0．2mg／L以下。

此实验结果表明，配制BOD稀释水时，没有控制实验条件，而受到实验室内有机溶剂、空气降尘和细菌的污染，致使：B005值增高。为此必须严格控制实验条件，其BOD5值才能达到规定的O．2mg／L要求。

(2)BOD稀释水的来源对BOD5值的影响

用加人KMnO4重蒸馏的重蒸馏水及普通蒸馏水，分别装入培养瓶中，于20～25℃保存，逐日放人20±l℃培养箱中，按常规分析法测定BOD5，结果表明两种稀释水从第四天开始均能达到0．2mg／L以下，无明显差异。国外报道采用蒸馏水、离子交换后蒸馏水和蒸镏后离子交换水共三种水，于20℃条件下保存，逐日测定。B005值，当天测BOD5值结果顺序如下：

蒸馏后离子交换水>离子交换后的蒸馏水>蒸馏水，仅采用蒸馏水配制的稀释水BOD5值可达0．2mg／L以下。由此可见，BOD稀释水的水源选择甚为重要，离子交换水易受到树脂床的污染，不宜采用，而一般蒸馏水作为BOD稀释水源，其空白值可达到规定要求。

(3)温度对BOD稀释水的影响

将配制好的BOD稀释水，分装于BOD培养瓶，于15℃，20℃，22—25℃和30—34℃四种不同的温度保存，按常规方法测BOD5，选择最佳保存天数。15℃保存从第五天，20℃保存从第二天，20～25℃保存从第四天，30～34℃保存第五天，分别达0．2mg／L。

实验证明，温度无疑对BOD稀释水的BOD5值有明显影响。BOD稀释水以20±1℃条件保存最佳。若实验室受到条件限制，可根据不同的温度确定保存时间。

实验证明最简便方法是将配制好的稀释水在常温下放置5—7天，BOD完全可以满足规定要求。

(4)曝气过程中对BOD5值的影响

采用新鲜蒸馏水配制BOD稀释水，一份用活性炭过滤的空气曝气，另一份不过滤，在20℃条件下分别倒进BOD培养瓶中，置人20±1℃培养箱内保存，按常规法逐日测定BOD5值。

用活性炭过滤的稀释水，当日BOD5为O．15mg／L，不用活性炭过滤的稀释水当日BODs为0．25mg／L，结果表明，用活性炭吸附处理空气中污染物质，明显提高稀释水质量。

(5)硝化作用对稀释水BOD5值的影响

配制稀释水时，以加入氯化铵作为细菌生长所需氮源。细菌利用硝化作用增加了耗氧量，致使：B005值有所增高。有人提议加入一定量的硝化抑制剂：如N(2一丙烯基)硫脲，2一氯一6(三氯乙烷)吡啶和烯丙基硫脲等，以抑制细菌对含氮化合物的硝化作用。曾采用含有氯化铵的BOD稀释水D1，分装于培养瓶中，其中二份作含氮化合物测定，其余二份测定BOD5值，同时放人20℃条件保存，逐日分别测定BOD5、NH3-N、N02-N、N03-N的含量。 另将不含氯化铵的稀释水D2，分装于培养瓶中，每次二份，于20℃条件下保存。逐日测定加氯化铵与不加氯化铵的稀释水BOD5值，从第二天开始直到第12天BOD5值均在0．2mg／L以下。两组之间没有明显差异。与此同时，随着培养天数的增加，氨氮含量也伴随着减少。从第6天开始，N02-N被检出，浓度为0．8μg／L，到2l天为O．2μg/L，检出的浓度极微。N03-N从第9天开始被检出，其含量为3．2μg／L，到第21天为3．16μg／L。为此可见硝化作用影响甚微，可以忽略不计。因此，在BOD稀释水保存时，不必担心硝化作用发生。

BOD稀释水的纯度是重要的影响因素。因此，国外主张稀释水的BOB5值要求控制在0．2mg／L．以下，最佳为0．1mg／L。

110．1．3．6接种的目的是向样品中加入生物群以提高水中有机物分解的能力，在生活污水或未加氯的排放水和地面水中存在这些微生物，则没有必要接种也不应接种。当水样中微生物很少时，这时稀释水应进行接种，所用的标准接种物质是已在20℃条件下储存了24～36h澄清的生活污水。

根据理论推算1mg的氨氮完全氧化时需要消耗4．57mg氧，其中生成亚硝酸盐氮需消耗3．43mg氧，由亚硝酸盐氮变成硝酸盐氮消耗1．14mg氧。

日本工厂排水试验法JLSK0102中规定每稀释1升水样需添加N-(丙烯基)硫脲0．2～O．5mg，或在1升稀释水中添加2-氯-6-(三氯乙烷)吡啶10mg，用以抑制硝化过程。

110．1.5水样采取后应立即进行分析。在采样和分析样品之间的储存期，样品有明显的降解，可影响BOD值。若在15—20℃下放置数小时，可使BOD的含量减少二分之一。如置冰冻条件下保存3天时，其BOD值减少5％。日本《下水试验方法》中规定水样在密封冷藏条件下须在9h内测定。

美国《水和废水标准检验法》第15版规定了如样品采集后不能在2h以内开始分析，则应在4~C或低于4~C保存，并在6h内开始分析，当不能在6h以内分析时，则应将储存时间和温度与分析结果一起报告，不可超过24h分析。

110．1．6．1样品的预处理

(I)含有悬浮物质的试样，混匀后，取适当的体积分析。

(2)冬季采取水样，冷却保存时含氧量较高，藻类多的江、河、湖泊因光合作用也含有较多的氧，要注意夏季易使溶解氧出现过饱和，对于其它溶解性气体多的水样也要曝气处理。

(3)中和：试样呈酸性或碱性要用NaOH溶液[c(NaOH)=1mol／L]或用H2S04溶液[c(H2S04)=0．5mol／L)中和至pH7左右。

(4)水样中含有余氯为0．1mg／L时，短时间放置有时也会消失。氯含量高时除了用硫代硫酸钠外，还可以用以下方法去除。

预先在100mL水样中加入0．1gNaN3和lg的Ⅺ振荡混匀后，再加入HCl使pH约为1。以淀粉溶液作为指示剂，用亚硫酸钠溶液[c(Na2S03)=0．025mol／L]滴定游离的12至蓝色消失为止。另外，取试样根据预先的滴定值，加入相应量的亚硫酸钠溶液，使残留氯还原后，若有必要可用NaOH溶液(4Og／L)或盐酸溶液(1+1)调节pn值至7左右。

(5)重金属盐有抑制微生物生长的作用而影响BOD值。

日本弘拥正报道了抑制BOD各种金属离子浓度分别为(mg／L)：

Hg2+-0.5，Cu2+-0.5,Pb2+-50，Ni2+-5，Zn2+-10～20，Cr3+-2．5～5．O,Cr6+-10，Cd2+～5，C02+-5，这些金属离子可使用中和，沉淀和离子交换消除。

(6)当水中亚硝酸盐大于O．1mg／L时，能游离碘使结果偏高

2I-+2NO2-+4H+→I2+2H20+2NO

加叠氮化钠溶液消除亚硝酸盐干扰的反应如下

2NaN3+H2S04—2HN3+Na2S04

HN3+HNO2→N2+N20+H20

(7)含有其他毒性物质的水样，这种水样常需特别研究和处理。

110．1．6．3确定水样稀释倍数

由于水中有机物含量高，为了确定BOD的稀释度，首先需测定耗氧量或化学需氧量值再推测出BOD值，为了防止失败，通常采用不同阶段稀释法。

根据酸性高锰酸钾法测得耗氧量(OC)通常以l～3除之，商即为水样所需稀释的倍数。

如用重铬酸钾法测定化学需氧量(COD)则以4或5除之。

110．1．6．3．2 BOD测定操作中应注意：

(1)为了测定可靠，最好同时培养2～3瓶，从测定值算出平均值。

(2)稀释用的量器及BOD培养瓶要充分洗净，因为高倍稀释时，即使轻微的污染，也能影响BOD值。

(3)样品稀释时，水样及稀释水用虹吸管插入容器底部，轻轻流人防止产生气泡。

(4)BOD培养瓶中装入样品时瓶内不能有气泡，盖瓶塞和封瓶口后，瓶内不可存在气泡。

110．1．7．3一般认为稀释过的培养液在20℃温度下，经培养5天后溶解氧减少40～70％较为合适。减少量过多或过少都会带来较大误差，所以一份水样应同时做2～3稀释度，最后只采用溶解氧降低在40％～70％之间的平均值为测定结果。

下表表示不同稀释度的BOD5值。

表110．1 不同稀释度的BOD5*

*葡萄糖和谷氨酸各为150mg／L；

**被稀释的试样在1升中的，mL数。

从表110．1看出稀释67～40倍，氧消耗率为41．4～69％所得BOD5值最佳，用三者平均数227+213+227／3=222mg／L报告结果。

110．1．8精密度

据资料介绍，BOD的重复测定精密度为期不远5～10%，不同时间测定的精密度为15～30%

‘叁’ BOD5的测定

稀释与接种法(HJ 505-2009)
本标准参照采用国际标准ISO5815--1983，本国家标准规定采用稀释与接种法作为测定水中生化需氧量的标准方法，这是一种经验性的常规方法。
适用范围:本方法适用于BOD5或等于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样。BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。
原理:将水样注满培养瓶，塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量既为含碳物质的耗氧量。在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显着量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。在测定BOD5的同时，需要葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验。
试剂:分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L，并不应有氯、氯氨、可性碱、有机物和酸类。
1接种水
如试验样品本身不含有足够的合适性微生物，应采用下述方法之一，以获得接种水：
a.城市废水，取自污水管或取自没有明显工业污染的住宅区污水管。
这种水在使用前，应倾出上清夜备用。
b.在1L水中加入100g花园土壤，混合并静置10min。取10ml上清夜用水稀释至1L。
c.含有城市污水的河水或湖水。
d.污水处理厂出水。
e.当待分析水样为含难降解物质的工业废水时，取自待分析水排放口下游约3-8km的水或所含微生物适宜于待分析水并经实验室培养过的水
2盐酸液
下述溶液至少可稳定一个月，应贮存在玻璃瓶内，置于暗处。一旦发现有生物滋长迹象，则应弃去不用。
2.1磷酸盐：缓冲溶液。
降8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4)、33.4g七水磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵（NH4CI）溶于约500ml水中，稀释至1000ml并混合均匀。
此缓冲溶液的pH应为7.2。
2.2七水硫酸镁：22.5g/L溶液。
将22.5g的七水硫酸镁（MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000ml并混合均匀。
2.3氯化钙：27.5g/L溶液。
将27.5g的无水氯化钙（CaCl2)（若用水合氯化钙，要取相当的量）溶于水，稀释至1000ml并混合均匀。
2.4六水氯化铁（FeCl3·6H2O）：0.25g/L溶液。
将0.25g六水氯化铁（FeCl3·6H2O）溶解于水中，稀释至1000ml并混合均匀。
3稀释水
取每种盐溶液各1ml，加入约500ml水中，然后稀释至1000m并混合均匀，将此溶液置于20oC下恒温，曝气1h以上，采取各种措施，使其不受污染，特别是不被有机物质、氧化或还原性物质或金属污染，确保溶解氧浓度不低于8mg/L。此溶液的五日生化需氧量不得超过0.2mg/L。此溶液应在8h内使用。
4接种的稀释水
根据需要和接种水的来源，向每升稀释水中加1.0-5.0ml接种水，将已接种的稀释水在约20oC下保存，8h后尽早应用。已接种的稀释水的5天（20oC）耗氧量应在每升0.3-1.0mg之间。
5盐酸（HCl）溶液：0.5g/L。
6氢氧化钠（NaOH）溶液：20g/L。
7亚硫酸钠（NaSO3）溶液：1.575g/L，此溶液不稳定，需每天配制。
8葡萄糖–谷氨酸标准溶液。
将一些无水葡萄糖（C6H12O6）和一些谷氨酸（HOOC–CH2–CH2–CHNH2–COOH）在103oC下干燥1h，每种称量150±1mg，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml并混合均匀。此溶液于临用前配制。
仪器
使用的玻璃器皿要认真清洗，不能吸有毒的或生物可解物的化合物，并防止沾污。常用的实验室设备如下：
1培养瓶：细口瓶的容量在250-300ml之间，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟型口，最好是直尖的。
2培养箱：能控制在20±1oC。
3测定溶解氧仪器。
4用于样品运输和贮藏的冷藏手段（0-4oC）。
5稀释容器：带塞玻璃瓶，刻度精确到毫升，其容积大小取决于使用稀释水样品的体积。
样品的贮存
样品需充满并密封于瓶中，置于2-5oC保存到进行分析时。一般应在采样后6h内进行检验。若需远距离转运，在任何情况下贮存皆不得超过24h。样品也可以深度冷冻贮存。
操作步骤
1样品预处理
1.1样品的中和
如果样品的PH不在6-8之间，先做单独试验，确定需要用的盐酸溶液或氢氧化钠溶液的体积，再称样品，不管有无沉淀形成。
1.2含游离氯或结合氯的样品
加入所需体积的氢氧化钠溶液，使样品中自由氯和结合氯失效，注意避免过量。
2试验水样的准备
将试验样品温度升至约20oC，然后再半充满的容器内摇动样品，以便消除可能存在的过饱和氧。
将已知体积样品置于稀释容器中，用稀释水或接种稀释水稀释，轻轻地中和，避免夹杂空气泡。

‘肆’ BOD检测的原理及步骤

碘量法测定BOD5

一、实验原理
碘量法测定水中溶解氧是基于溶解氧的氧化性能。当水样中加入硫酸锰和碱性KI溶液时，立即生成 Mn(OH)2沉淀。Mn(OH)2极不稳定，迅速与水中溶解氧化合生成锰酸锰。在加入硫酸酸化后，已化合的溶解氧（以锰酸锰的形式存在）将KI氧化并释放出与溶解氧量相当的游离碘。然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定，换算出溶解氧的含量。可分别测同一水样五天前和五天后的溶解氧差值即为五日生化需氧量。
此法适用于含少量还原性物质及硝酸氮<0.1mg/L、铁不大于1mg/L，较为清洁的水样。
二、实验主要仪器
1．250mL碘量瓶
2．100 mL 碘量瓶
3．150mL锥形瓶
4. 恒温培养箱
5.移液管：1 2 5 10 25 50 mL
6.虹吸管
7.滴定仪
三、试剂配置
1．硫酸锰溶液：称取36.4gMnSO4•H2O，溶于蒸馏水中，稀释定容至100mL。（此溶液在酸性时，加入KI后，遇淀粉不产生蓝色。）
2．碱性KI溶液：称取500gNaOH溶于300～400mL蒸馏水中，应不停地搅拌摇匀（否则易成絮状），称取150gKI溶于200mL蒸馏水中，待NaOH溶液冷却后将两种溶液合并，混匀，用蒸馏水稀释至1L。若有沉淀，则放置过夜后，倾出上层清液，储于塑料瓶中，用黑纸包裹避光保存。
3．（1+5）硫酸溶液：用50mL移液管移取50mL蒸馏水，再用10mL移液管移取10mL浓硫酸（分析纯），缓慢流入装有50mL蒸馏水的烧杯中，用玻璃棒搅拌。
4．浓硫酸（分析纯）
5．1%淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量蒸馏水调成糊状，再用刚煮沸的水冲稀至100mL（可大概，不必精确定容）。冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌防腐。
6．0.02500mol/L(1/6K2Cr2O7)重铬酸钾标准溶液：称取于105--110℃烘干2小时并冷却的优级K2Cr2O71.2258g，溶于水，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。
7．0.025mol/L硫代硫酸钠溶液：称取3.2g硫代硫酸钠(Na2S2O3•5H2O)溶于煮沸放冷的水中，加入0.2g碳酸钠，用水（煮沸放冷）稀释至1000mL。储于棕色瓶中，使用前用0.02500mol/L重铬酸钾标准溶液标定。
标定方法如下：
于250mL碘量瓶中，加入100mL水和1gKI，加入10.00mL 0.02500mol/L重铬酸钾(1/6K2Cr2O7)标准溶液、5mL(1+5)硫酸溶液，密塞，摇匀。于暗处静置5分钟后，用待标定的硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量。
C=
式中：C—硫代硫酸钠溶液的浓度(mol/L)。
V—滴定时消耗硫代硫酸钠溶液的体积(mL)。
四、实验步骤
1.取水样及分装：
（1）、将水样先润洗500 mL两遍，再将水样沿烧杯壁缓慢流入烧杯中，应注意水流不应过快，严禁气泡产生。
（2）、调PH：用PH计将水样PH调至6.5~7.5范围内。
（3）分装水样：将虹吸管一端插入水样中，另一端用洗耳球将水虹吸出，然后将此端虹吸管靠碘量瓶缓慢流下，先装入250 mL碘量瓶中，装之前要润洗两遍；后装入100mL碘量瓶中。250 mL碘量瓶口应有水样溢出，保证有水封，之后在瓶口包保鲜膜封住，放入20℃恒温培养箱培养5天。
2．测定100 mL的碘量瓶中水样的溶解氧：
（1）将移液管插入液面下，依次加入0.5mL硫酸锰溶液及1.0mL的碱性碘化钾溶液，盖好瓶塞，勿使瓶内有气泡，颠倒混合15次，静置。待棕色絮状沉淀降到一半时，再颠倒几次。
（2）分析时轻轻打开瓶塞，立即将吸管插入液面下，加入1.0mL浓硫酸，小心盖好瓶塞，颠倒混合摇匀至沉淀物全部溶解为止。若溶解不完全，可继续加入少量浓硫酸，但此时不可溢流出溶液。然后放置暗处5分钟。
（3）用吸管吸取50mL上述溶液，注入150mL加有转子的锥形瓶中，用0.025mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定到溶液呈淡黄色，加入0.5mL淀粉溶液，注意接近终点时应缓慢地滴，用蒸馏水将残留于壁上内的药品冲下，继续滴定至蓝色恰好褪去为止，记录用量V1。
3.五天后测定250 mL碘量瓶中水样溶解氧：
（1）.将移液管插入液面下，依次加入1.0mL硫酸锰溶液及2.0mL的碱性碘化钾溶液，盖好瓶塞，勿使瓶内有气泡，颠倒混合15次，静置。待棕色絮状沉淀降到一半时，再颠倒几次。
（2）.分析时轻轻打开瓶塞，立即将吸管插入液面下，加入2.0mL浓硫酸，小心盖好瓶塞，颠倒混合摇匀至沉淀物全部溶解为止。若溶解不完全，可继续加入少量浓硫酸，但此时不可溢流出溶液。然后放置暗处5分钟。
（3）.用吸管吸取50mL上述溶液，注入150mL加有转子的锥形瓶中，用0.025mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定到溶液呈淡黄色，加入1.0mL淀粉溶液，注意接近终点时应缓慢地滴，用蒸馏水将残留于壁上内的药品冲下，继续滴定至蓝色恰好褪去为止，记录用量V2。
五、计算
溶解氧（mg/L）＝
式中：C—硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L；
V—滴定时消耗硫代硫酸钠标准溶液体积，mL；
8—1/4O2的摩尔数,g/mol；
50---水样体积，mL。
数据列表表示如下：

1．标定硫代硫酸钠：
编号 C(1/6K2Cr2O7)
(mol/L) V(1/6K2Cr2O7)
(mL) V(Na2S2O3)
(mL) C(Na2S2O3)
(mol/L) d相对（%）
1
2
3
平 均 值 V标
2.计算五日生化需氧量
需氧量（mg/L）=40(V1-V2)/V标

‘伍’ 什么是BOD，测定方法

BOD（Biochemical Oxygen Demand的简写）：生化需氧量或生化耗氧量(一般指五日生化学需氧量)，表示水中有机物等需氧污染物质含量的一个综合指标。说明水中有机物由于微生物的生化作用进行氧化分解，使之无机化或气体化时所消耗水中溶解氧的总数量。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在20℃的暗处培养5d，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5形式表示。其单位ppm或毫克/升表示。其值越高说明水中有机污染物质越多，污染也就越严重。
为了使检测资料有可比性，一般规定一个时间周期，在这段时间内，在一定温度下用水样培养微生物，并测定水中溶解氧消耗情况，一般采用五天时间，称为五日生化需氧量，记做BOD5。数值越大证明水中含有的有机物越多，因此污染也越严重。
BOD，生化需氧量（BOD）是一种环境监测指标，主要用于监测水体中有机物的污染状况。一般有机物都可以被微生物所分解，但微生物分解水中的有机化合物时需要消耗氧，如果水中的溶解氧不足以供给微生物的需要，水体就处于污染状态。BOD才是有关环保的指标。
BOD的测定采用GB7488-87水质五日生化需氧量测定法。
测定仪原理 含有饱和溶解氧的水样进入测定槽与生物传感器接触，当水样中无可生化降解的有机物时，溶解氧向氧电极的扩散速度（质量）达到恒定时，便产生了一个恒定电流。当水样中有可生化降解的有机物时，有机物便受到生物膜中微生物的同化作用，而微生物的细胞呼吸作用也增强，消耗掉一部分溶解氧，使扩散到氧电极表面上的溶解氧减少，当水样中溶解氧向电极扩散速度（质量）再次达到恒定时，又产生了一个恒定电流，由于该两个恒定电流之间的差值与水样中可生化降解的有机物浓度存在定量关系，因此该电流信号经微机放大、分析处理后，直接将BOD检测结果显示出来

‘陆’ BOD5的检测方法和步骤

将预先选好量程并按量程范围量好体积的水样倒入培养瓶中，在主机搅拌器上连续搅拌。并将主机和培养瓶放入培养箱中。

调节培养箱内温度为20C±1°，待样品恒温后进行五日培养。培养瓶中的水样在连续搅拌的情况下保证了足够的溶解氧供微生物进行生化反应。水样中的有机物经过生物氧化作用，转变成氮、碳和硫的氧化物。在这一过程中，从水样中溢出的气体二氧化碳被氢氧化钠(或氢氧化钾)吸收。

由于好气微生物的反应，将消耗水中的氧气，呼出二氧化碳，如果及时地用NaOH吸收生成的二氧化碳，培养瓶内上部空间的氧气不断地供给试样中微生物的需氧量，这就造成了气体氧分压的下降，用差压计测出氧分压的下降量就可以测出水样的B0D值。

(6)bod5检测方法简单步骤扩展阅读：

一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量既为含碳物质的耗氧量。

在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显着量的还原性氮。

而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。在测定BOD5的同时，需要葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验。

‘柒’ BOD分析仪的测定原理/方法

水五日生化需氧量（BOD5）的测定 1.1 理解BOD的含义及测定条件；
1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。 生物化学需氧量(BOD)定义为：在规定的条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量。该过程进行的时间很长，如在20℃培养条件下，全过程需100天，根据目前国际统一规定，在20±1℃的温度下，培养五天后测出的结果，称为五日生化需氧量，记为BOD5，其单位用质量浓度mg/L表示。
对于一般生活污水和工业废水，虽然含较多有机物，如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气，就可以将样品直接进行测定，但为了保证微生物生长的需要，需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。
某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等，测定前应接入可以分解水中有机物的微生物，这种方法称为接种。对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，可以将水样适当稀释，并用驯化后含有适应性微生物的接种水进行接种。
一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗氧量和少量无机还原性物质的耗氧量。由于许多
二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中，往往含有大量硝化微生物。这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。为了抑制硝化作用的耗氧量，应加入适量的硝化抑制剂。 BOD分析仪是高智能化在线连续监测仪。使用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗，防止油污、沾尘。玻璃器皿干燥后方能使用。
BDO-200A型中文在线溶氧仪是我公司生产高智能化在线连续监测仪。可以配极谱式电极，自动实现从ppb级到ppm级的宽范围测量，是检测锅炉给水、凝结水、环保污水等行业的液体中氧含量测量的专用仪器。其具有响应快、稳定、可靠、使用费用低等特点，适合火力发电厂大量使用。
常用实验室设备如下：
4.1 生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。
4.2 充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。
4.3 BOD培养瓶：容积550±1mL。
4.4 样品运输贮藏箱：温度保持0~4℃。
4.5 250mL溶解氧瓶或具塞试剂瓶2~6个。
4.6 50mL滴定管2支。
4.7 1mL移液管3支，25mL、100mL移液管各1支。
4.8 10mL、100mL量筒各1个。
4.9 250mL碘量瓶2个。 采用分析纯试剂。实验用水采用重蒸蒸馏水。
5.1硫酸锰溶液
将MnSO4·4H2O 480g或MnSO4·2H2O 400g溶于蒸馏水中，过滤后稀释成100mL。 (此溶液中不能含有高价锰，试验方法是取少量此溶液加入碘化钾及稀硫酸后溶液不能变成黄色，如变成黄色表示有少量碘析出，即表示溶液中含有高价锰)。
MnO+2I-+6H+=I2+Mn2++3H2O 23
5.2碱性碘化钾溶液
溶解500g氢氧化钠于300—400mL蒸馏水中，冷至室温。另外溶解300g碘化钾于200mL蒸馏水中，慢慢加入已冷却的氢氧化钠溶液，摇匀后用蒸馏水稀释至1000mL(强碱性溶液腐蚀性很大，使用时注意勿溅在皮肤或衣服上)，如有沉淀，则放置过夜取上清液，贮藏于塑料瓶或棕色试剂瓶中（用棕色试剂瓶时要用橡胶瓶塞）。
5.3 浓硫酸
比重1.84，强酸腐蚀性很大，使用注意勿溅在皮肤或衣服上。
5.4 1%淀粉指示液
称取2g可溶性淀粉，溶于少量蒸馏水中，用玻璃棒调成糊状：慢慢加入(边加边搅拌)刚煮沸的200mL蒸馏水中，冷却后加入0.25g水杨酸或0.8g氯化锌ZnCl2防腐剂。此溶液遇碘应变为蓝色，如变成紫色表示已有部分变质，要重新配制。
5.5 (1+1)硫酸溶液
将浓硫酸(比重1．84)与水等体积混合。
5.6 2 mol/L(1/2 H2SO4)
5.7盐溶液
下述溶液至少可稳定一个月，应贮存在玻璃瓶内，置于暗处。一旦发现有生物滋长迹象，则应弃去不用。
5.7.1 磷酸盐：缓冲溶液。
将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4)、21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g七水磷酸氢二钠(NaH2PO4·7H2O)、和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于500mL水中，西是指1000mL。
此缓冲溶液的pH应为7.2。
5.7.2 七水硫酸镁：22.5g/L溶液
将22.5g七水硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL并混合均匀。
5.7.3 氯化钙：27.5g/L溶液
将27.5g无水氯化钙（CaCl2）（若用水合氯化钙，要取相当的量）溶于水，稀释至1000mL并混合均匀。
5.7.4：0.25g /L溶液
将0.25g六水氯化铁（Ⅲ）（FeCl3·H2O）溶解于水中，稀释至1000mL并混合均匀。
5.8 硫代硫酸钠溶液C(Na2S2O3)=0.025mol/L
称取6.2g硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)溶于煮沸放冷的蒸馏水中，加入0.2g碳酸钠，用水稀释至1000mL。贮于棕色瓶中，使用前用重铬酸钾，C(1/6K2Cr2O7)=0.0250mol/L标准溶液标定，标定方法如下。
于250mL碘重瓶中，加入l00mL蒸馏水和1g碘化钾，加入10.00mL 0.0250 mo1/L重铬酸钾标准溶液，5mL 2 mol/L(1/2 H2SO4)硫酸溶液(5.6)，密塞，摇匀，于暗处静置5 min后，用待标定的硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1 mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪尽为止，记录用量。
标定反应：K2Cr2O7+6KI+7H2SO4=Cr2(SO4)3+312+4K2SO4+7H2O
(硫酸铬，绿色)
I2+2Na2S2O3=2NaI+Na2S4O6
(连四硫酸钠，无色)
C=10.00×0.0250/V
式中 C——硫酸钠溶液浓度(mol/L)
V——硫代硫酸钠溶液消耗量(mL)
5.9 氢氧化钠，0.5mol/L
5.10 盐酸，0.5mol/L
5.11 稀释水
在5-20L玻璃内瓶装入一定量的纯水曝气2-8h，使稀释水的溶解氧接近饱和；曝气后瓶口盖上两层干净纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量不少于8mg/L。临用前每升水中加入四种营养盐溶液(5.7.1)、(5.7.2)、(5.7.3)、(5.7.4)各lmL并混合均匀。稀释水的pH值为7.2，应在8h内使用完。
5.12 接种水
如被检验样品本身不含有足够的适应性微生物，应采取下述方法获得接种水。接种温度应在20±l℃。
5.12.1 城市污水，一般采用住宅区生活污水，过滤后在20℃培养箱内放置一昼夜，取上清液作为接种水。
5.12.2 待测样品经生化处理构筑物的出水处的出水。
5.12.3 当工业废水中含有难降解有机物时，取该工业废水排放口下游3-8Km 处的水作为做接种水；如无此种水源采用驯化菌种的方法在实验室培养含有适应于待测样品的接种水，建议采用如下方法：取中和或适当稀释后的该水样进行连续曝气，每天加少量新鲜水样。同时加入适量表层土壤、花园土壤或生活污水，使能适应水样的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或分析其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适应的微生物已经繁殖，可用做接种水。一般驯化过程需要3-8d。
5.13 接种的稀释水
根据需要和接种水的来源，向每升稀释水（5.11）中加入1.0~5.0mL接种水（5.12）中的一种。
以接种的稀释水的5天（20℃）耗氧量应在0.3~1.0mg/L之间。 6.1 实验前准备工作
6.1.1实验前8h将生化培养箱接通电源，并使温度控制在20℃下正常运行。
6.1.2将实验用的稀释水、接种水和接种的稀释水放入培养箱内恒温备选用。
6.2水样预处理
6.2.1水样的pH值不在6.5~7.5之间时；先做单独试验，确定需要的盐酸（5.10）或氢氧化钠溶液（5.9）
体积，再中和样品，不管有无沉淀形成。当水样的酸度或碱度很高，可改用高浓的碱或酸进行中和，确保用量不少过水样体积的0.5%。
6.2.2含有少量游离氯的水样，一般放置1-2h后，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间内不能消失的水样，可加入适量的亚硫酸钠溶液，以除去游离氯。
6.2.3从水温较低的水体中或富营养化的湖泊中采集的水样，应迅速升温至20℃左右，以赶出水样中过饱和的溶解氧。否则会造成分析结果偏低。
从水温较高的水体中或废水排放口取样，应迅速使其冷却至20℃左右，否则会造成分析结果偏高。
6.2.4若待测水样没有微生物或微生物活性不足时，都要对样品进行接种。诸如以下几种工业废水：
a、未经生化处理过的工业废水；
b、高温高压或经卫生杀菌的废水，特别要注意食品加工工业的废水和医院生活污水；
c、强酸强碱性的工业废水；
d、高BOD5值的工业废水；
e、含铜、锌、铅、砷、镉、铬、氰等有毒物质的工业废水。
以上的工业废水都需采用具有足够微生物。 7.1 不经稀释水样的测定
①溶解氧含量较高、有机物含量较少的地表水，可不经稀释而直接以虹吸法将约20℃的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程应注意不使产生气泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞。瓶内不应留有气泡。
②其中一瓶随即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在20培养5天。在培养过程中注意添加封口水。
③从开始放入培养箱算起，经过5昼夜后，弃去封口水，测定剩余的溶解氧。
7.2 需经稀释水样的测定
7.2.1 稀释倍数的确定
根据实践经验，提出下述计算方法，供稀释时参考。
7.2.1.1地表水
由测得的高锰酸盐指数与一定的系数的乘积，即求的稀释倍数。高锰酸盐指数与系数的关系见表2-3。
表2-3 由高锰酸盐指数与系数的关系
高锰酸盐指数（mg/L） 高锰酸盐指数（mg/L）
系数
<5
—
10~20
0.4、0.6
5~10
0.2、0.3
>20
0.5、0.7、1.0
7.2.1.2工业废水
由重铬酸钾法测得的COD值来确定，同程需作单个稀释比。
使用稀释水时，由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225，即获得三个稀释倍数。
使用接种稀释水时，则分别乘以系数0.075、0.15、0.25即获得三个稀释倍数。
7.2.2 稀释操作
7.2.2.1 一般稀释法：
按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水（或接种稀释水）于1000mL量筒中，加入需要量的均匀水样，再加入稀释水（或接种稀释水）至800mL，用带胶板的玻棒小心上下搅匀。搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。
按照（7.1）相同的步骤操作，测定培养5天前后的溶解氧。
另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水（或接种稀释水）作为空白试验，测定培养5天前后的溶解氧。
7.2.2.2 直接稀释法
直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。在已知两个容积相同（其差<1mL）的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀释水），再加入根据瓶容积和稀释比例计算出来的水样量，然后用稀释水（或接种稀释水）使刚好充满，加塞，勿留气泡于瓶内。
7.3溶解氧的测定：
溶解氧的测定方法用碘量法（通常用叠氮化钠改良法），详见本书第二章《实验六水溶解氧（DO）的测定》 8.1不经稀释直接培养的水样
BODs = DO1－DO2
BODs——水样的BOD5值，mg/L
DO1：水样在培养前的溶解氧浓度，mg/L
DO2：水样在培养五天后的溶解氧浓度，mg/L
8.2 经稀释后培养的水样2121215)()(ffBBCCBOD
C1——水样在培养前的溶解氧浓度，mg/L
C2——水样在培养五天后的溶解氧浓度，mg/L
B1——稀释水（或接种稀释水）在培养前的溶解氧浓度，mg/L
B2——稀释水（或接种稀释水）在培养五天后的溶解氧浓度，mg/L
f1——稀释水（或接种稀释水）在培养液中所占比例
f2——水样在培养液中所占比例1 9.1 根据废水浓度高低及毒性大小确定使用稀释水、接种水还是稀释接种水，若稀释比大于100，将分两步或几步进行稀释。
9.2 培养时要注意避光，防止藻类生长影响测定结果。
9.3 其他注意事项参见本书第二章《实验六水溶解氧（DO）的测定》中（7.2~7.6）。

‘捌’ BOD国标测定方法

标准稀释法。

‘玖’ BOD测定原理

简单地来说：
BOD:生化需氧量 表示的可被好氧微生物代谢分解的有机物的含量。因为此类有机物的含量不能直接被测量，而微生物代谢分解有机物需要进行呼吸作用才能完成，而呼吸作用消耗水中的溶解氧，故而可通过测量水中溶解氧的变化（肯定是减少量）来间接地测量水中有机物质含量的多少。
而微生物代谢是需要时间地，一般5天左右即可达到总BOD值的75%以上（官方数据， 不过实际上是因为当时提出这个概念的是英国卫生官员，5天的时间已经足够英国境内的任何一条河流入海了，6天BOD是没有意义的。。。），而若想得到总的BOD值 需要20天以上，时间较长，所以就有了BOD5这个统一指标。都用5天生化需氧量来做对比，即可表征水体被有机物污染程度的相对大小。
具体测量步骤和方法见
国标
五日生化需氧量（BOD5）的测定 稀释与接种法 GBT 7488-87
行标
生化需氧量（BOD）的测定 微生物传感器快速测定法 HJ/T 86-2002

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我想进个大型的环保企业 做仪表或者咨询的优先。。。哈哈～～

‘拾’ 测定BOD5的时候进水和出水的取样体积应该如何确定。。。求详细的试验步骤，国标法看的很晕

摘要 BOD5进水和出水你取样体积，也就是生化需氧量的体积，具体步骤：