常用的滅菌方法及其特點

⑴ 消毒滅菌的方法都有哪些分類和方法

一、消毒滅菌的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過濾等。
1.熱力滅菌；分乾熱滅菌法和濕熱滅菌法兩大類，乾熱滅菌法有焚燒、燒灼、干烤、紅外線燈。濕熱消毒滅菌法有：巴氏消毒法、煮沸法、流通蒸汽法、間歇滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。
2.輻射法：紫外線燈
3.超聲波
4.濾過除菌法
二、化學消毒滅菌法
根據化學結構與性質不同分類
可以消毒劑分成酶類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑、烷化劑、染料、酸鹼類等。
常用的化學消毒劑：
1.鹵素化合物是有效的殺菌和滅菌劑，用於水、食品、設施消毒。
2.碘伏(iodophors,iodine
and
neutral
polyvinylalcchol)常用作於皮膚的除菌。
3.酚類化合物是強效殺菌劑，通常用於物品消毒,溫和類酚復合劑也可用於皮膚和粘膜的除菌。
4.醇類溶解細胞膜脂質和破壞細胞蛋白，一般起抑菌作用。
5.過氧化氫起殺菌效能，用於傷口防腐和器具消毒。高濃度的過氧化氫有殺滅芽胞性能。
6.表面活性劑降低細胞膜表面張力，引起細胞破裂，既有清潔作用又有除菌作用，用於皮膚黏膜除菌和器具消毒。
7.醛類破壞微生物酶系統，有潛在滅菌作用。烷化劑具高效的殺菌性能，是高效殺菌劑，但具有對組織毒性作用和致癌性能。

⑵ 滅菌方法分為哪幾種類別

滅菌方法分為：

1、熱滅菌法

熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性，酶活性消失，致使細胞死亡。通常有乾熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

2、乾熱滅菌

把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內，在150～170℃下維持1～2小時後，可達到徹底滅菌（包括細菌的芽孢）的目的。灼燒是一種最徹底的乾熱滅菌法，應用范圍僅限於接種環、接種針的滅菌或帶病原菌的材料、動物屍體的燒毀等。

3、濕熱滅菌

以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。

4、間歇滅菌

間歇滅菌連續3天，每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用於不能耐 100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌1小時。滅菌溫度不超過100℃，不致造成糖類等物質的破壞，而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死，從而達到徹底滅菌的目的。

5、輻射滅菌

輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法，較常用的有紫外線，其他還有電離輻射。波長在25000～80000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力，以波長26500納米最有效。輻射滅菌法僅限於某一定材料，因所需設備復雜，難於廣泛使用。

6、滲透壓滅菌

滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離，不能進行正常的新陳代謝，結果導致微生物的死亡。

7、化學試劑滅菌

大多數化學葯劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性，以便清除滅菌後材料上殘余的葯物。

⑶ 常用的滅菌方法有哪些，各有哪些優缺點

（1）加熱滅菌法

利用高溫來殺死微生物（超過最高生長溫度）的方法。加熱滅菌的原理：當高溫作用於微生物時，首先引起細胞內生理生化反應速率加快，機體內對溫度敏感的物質如蛋白質、核酸等，隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞，盡而導致細胞內原生質體的變化、酶結構的破壞，從而使細胞失去了生活機能上的協調，停止了生長發育。隨著高溫的繼續作用，細胞內原生質便發生凝固，酶結構完全破壞，活動消失，生化反應停止，滲透交換等新陳代謝活動消失，細胞死亡。加熱滅菌可分乾熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。

1）乾熱滅菌 利用灼燒或乾熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為乾熱滅菌法。由於乾熱滅菌使用方便，方法簡單，故在生產上廣泛應用。如火焰滅菌法：直接利用火焰把微生物燒死，故又稱焚燒滅菌法。採用此法滅菌既徹底又迅速，但只適用於金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法：即在電熱恆溫乾燥箱中利用乾熱空氣來滅菌。

2）濕熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。

①高壓蒸汽滅菌 由於高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度，能大大縮短滅菌時間，提高工作效率，加之蛋白質在濕熱條件下容易變性，在熱蒸汽條件下，細菌的芽孢在120℃，經20～30分鍾可全部被殺死。如滅菌材料體積較大，不易被穿透時，可將壓力增加到0.152兆帕，延長至1～2小時。在高壓蒸汽滅菌中，滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高（圖2-6）。

圖2-7 簡易常壓滅菌法

③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內，100℃處理1小時左右，殺死微生物的營養細胞，讓其冷卻至30℃左右，此時芽胞會萌發，再以同樣方法加熱處理，反復3次，可達到滅菌目的。該方法可用於不耐高溫的葯品、營養物、特殊培養基的滅菌。

④低溫巴氏滅菌法 即在60～70℃下，經一定時間，殺死有害微生物的方法。適應於不耐高溫的物品消毒。有些培養基，在高溫下遭到破壞，用此法既可殺死致病微生物的營養體，又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。食用菌生產中培養料堆積發酵工藝，就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。

（2）過濾除菌法

又分液體過濾和空氣過濾兩種，就是採用機械的方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器，通過機械過濾，只讓液體培養基或空氣從篩孔流出，各種微生物菌體則留在篩子上，從而達到除菌的目的。這種方法適用於對熱不穩定的體積小的液體培養基（如動物血清、蛋白質、酶、維生素等）及氣體的滅菌。超凈工作台的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣，從風洞中吹出，來造成工作台范圍的無菌狀態。過濾滅菌的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。常用的過濾器有用硅藻土製的、石棉製的、陶瓷土製的，也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜製成的。

（3）輻射滅菌法

利用輻射產生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種，α-射線、β-射線、γ-射線、X-射線、中子和質子、微波等屬電離輻射，紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。

1）紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發生光化學反應，將細菌細胞質誘導形成胸腺嘧啶雙聚體，從而抑制DNA的復制而發生變性、致死。另一方面，空氣在紫外線照射下產生的臭氧（O₃），也具有一定的殺菌作用。紫外線的有效作用距離為1.2～2.0米。紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方，個數依房間大小而定，容1～2個人操作的接種室，安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前，應將所需的器具一起放入接種室（箱）內，然後打開紫外燈照射。如果接種室體積較大，開燈照射2小時才能達到滅菌效果；如果較小，只需開燈半小時左右既可達到滅菌效果。由於紫外線穿透力弱，即使是普通玻璃也不能濾過，因此，只適於空氣或物體表面的滅菌。紫外線對人體皮膚，尤其是眼睛有殺傷作用，應避免直視，工作時應將紫外燈關閉。紫外線消毒時工作場所如果處在稍暗無光的情況下，能提高殺菌效果。細菌接受致死量紫外線照射後，隨即給予可見光照射，部分細菌有復活的可能。幹細胞比濕細胞對紫外線的抗性強，孢子比其營養細胞對紫外線更具抗性。

2）微波滅菌 由於微生物的細胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波電場中被極化，並隨著電場方向的改變而轉動，在轉動過程中分子之間高速度摩擦產生熱能，這種熱能不同於外部加熱，可在短時間里使細胞爆破而物體本身的溫度卻只有極微增加，從而達到滅菌效果。用YM7601型微波爐只需60秒鍾就能殺死食品中192萬個大腸桿菌。

3）臭氧發生器消毒 臭氧（O₃）具有強烈的氧化作用，能破壞微生物的細胞膜與核酸。O₃也是一種暫態物質，常溫下能自然分解，還原成氧。其滅菌原理實際上和紫外線消毒極相似。

⑷ 什麼叫滅菌滅菌方法有哪幾種

滅菌是指採用強烈的理化因素使任何物體內外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施。

滅菌常用的方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、乾熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。滅菌的徹底程度受滅菌時間與滅菌劑強度的制約。微生物對滅菌劑的抵抗力取決於原始存在的群體密度、菌種或環境賦予菌種的抵抗力。滅菌是獲得純培養的必要條件，也是食品工業和醫葯領域中必需的技術。

方法的選擇

根據物品污染後導致感染的風險高低選擇相應的消毒或滅菌方法：

1）高危險度物品，應採用滅菌的方法處理；

2）中危險度物品，應採用達到中水平消毒以上效果的消毒方法；

3）低危險度物品，宜採用低水平消毒方法，或做清潔處理；遇有病原微生物污染時，針對所污染的病原微生物種類選擇有效的消毒方法

根據物品上污染微生物的種類、數量選擇消毒或滅菌的方法：

1) 對收到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝桿菌和經學傳播病原體污染的物品，應採用高水平消毒或滅菌；

2）對受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體等病原微生物污染的物品，應採取中水平以上的消毒方法；

3）對受到一般細菌和親脂病毒等污染的物品，應採用達到中水平或低水平的消毒方法。

⑸ 微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些

主要包括以下三種：乾熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜.

⑹ 請你列舉出常用的滅菌方法

1、熱滅菌法

它主要是利用高溫使蛋白質變性，最終讓細胞達到死亡。通常來說有干、濕和間歇這些在加熱以後進行滅菌。

2、乾熱滅菌

火焰灼燒法也就被稱為乾熱滅菌。

可以把金屬器械放入烘箱內，在150～170度下，就是可以達到徹底滅菌目的，灼燒可以說是最徹底滅菌法，比較適合接種針的滅菌。

3、化學試劑滅菌

其實很多化學葯品都是在濃度低下有著抑菌作用，到了濃度高時就可以起到殺菌作用。比如說使用化學滅菌劑一定要有揮發性，方便以後清除材料上殘余的葯物。

化學滅菌比較常用就是消毒劑和抗生素，要知道這些在濃度低時就有可能會讓其它的生物受到感染。

4、間歇滅菌

這種要連續3天，每天要一次蒸氣滅菌。而且它比較適合用於100度以上的物質，對於一些大氣壓下差不多1小時才可以。滅菌溫度要比100度低，而且還有可能會破壞糖內物質，這樣才能達到徹底滅菌。

5、輻射滅菌

這種它是利用射線進行滅菌，比較常用就是紫外線，也還會有電離輻射。可以說它的波長要達到25000到80000納米這樣才能有著強烈的殺菌能力，可以說最有效是在26500納米。這種方法它的設備比較復雜，所以也沒有辦法廣泛使用。

⑺ 實驗室常用的滅菌方法有乾熱滅菌.高壓蒸汽滅菌.紫外線滅菌.過濾除菌四種各有那些優缺點

乾熱滅菌.高壓蒸汽滅菌.紫外線滅菌.過濾除菌各有利弊。 高壓蒸汽滅菌
為濕熱滅菌方法的一種。是微生物培養中最重要的滅菌方法。這種滅菌方法是基於水在煮沸時所形成的蒸汽不能擴散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密閉的情況下，隨著水的煮沸，蒸汽壓力升高，溫度也相應增高。壓力和溫度之間的關系見表9－1。

高壓蒸汽是最有效的滅菌法，能迅速地達到完全徹底滅菌。一般在15磅/英寸2壓力下（121.6℃），15～30分鍾，所有微生物包括芽孢在內都可殺死。它適用於對一般培養基和玻璃器皿的滅菌。

進行高壓蒸汽滅菌的容器是高壓蒸汽滅菌鍋。高壓蒸汽滅菌鍋是一個能耐壓又可以密閉的金屬鍋，有立式與卧式兩種。

可以用電熱、煤氣、蒸汽等。鍋上裝有壓力表，有的還裝有溫度計，能及時了解鍋內壓力及溫度。鍋上還設有排氣口，其作用是在密閉之前，利用蒸汽將鍋內的冷空氣排凈，另外還裝有安全活門，如果壓力超過一定限度，活門即可自動打開，放出過多的蒸汽。
乾熱滅菌

wei生物培養中常用的乾熱滅菌是指熱空氣滅菌。一般在電烘箱中進行。乾熱滅菌所需溫度較濕熱滅菌高，時間也較濕熱滅菌長。這是因為蛋白質在乾燥無水的情況下不容易凝固。一般須在160℃左右保持恆溫3～4小時，方能達到滅菌的目的。

乾熱滅菌適用於空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養基，都不能進行乾熱滅菌。
間歇滅菌

各種微生物的營養體在100℃溫度下半小時即可被殺死。而其芽孢和孢子在這種條件下卻不會失去生活力。間歇滅菌就是根據這一原理進行的。

間歇滅菌的方法是用100℃、30分鍾殺死培養基內雜菌的營養體，然後將這種含有芽孢和孢子的培養基在溫箱內或室溫下放置24小時，使芽孢和孢子萌發成為營養體。這時再以100℃處理半小時，再放置24小時。如此連續滅菌3次，即可達到完全滅菌的目的。

間歇滅菌通常在流動蒸汽的滅菌鍋中進行，也可用普通鋁鍋代替。這種滅菌方法多用於明膠、牛乳等物質的滅菌，這類物質在100℃以上的溫度下處理較長時間，會被破壞，而用間歇滅菌法就既起到了殺菌作用，又使被處理的物質免遭破壞。

紫外線滅菌

紫外線殺菌力最強的是波長2650～2660Å的部分。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。無菌室和緩沖間的照射時間為20～50分鍾（視房間大小而定），接種箱照射10～15分鍾即可。

為了加強紫外線滅菌的效果，在照射前，可在無菌室、緩沖間或接種箱內噴灑5%石炭酸，以使空氣中附著有微生物的塵埃降落，同時也可以殺死一部分微生物。無菌室的工作台的檯面和椅子，可用2～3%的來蘇兒擦洗。然後再照射紫外線。由於紫外線對人體有傷害作用，所以人不要直視正在照射的紫外線燈，也不要在照射情況下進行工作。

滅菌後，為了檢驗紫外線的滅菌效果，可以在無菌室、緩沖間或接種箱內放一套盛有培養基的培養皿，將皿蓋打開5～10分鍾，蓋好後，放入溫箱中培養。如果只有一、二個菌落，可認為滅菌效果良好。如雜菌叢生。則需延長照射時間或同時加強其它滅菌措施。

⑻ 常見的滅菌方法

常用的滅菌法：

1.高壓蒸氣法：應用最普遍，效果亦很可靠。高壓蒸氣滅菌法用於能耐高溫的物品，如金屬器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡膠製品等;

2.煮沸法：適用於金屬器械、玻璃製品及橡膠類等物品;3.火燒法：適用於金屬器械;

3.葯液浸泡法：適用於銳利器械、內鏡和腹腔鏡等不適於熱力滅菌的器械;

4.甲醛蒸氣熏蒸法：適用於金屬器械、玻璃、搪瓷及各種導管。