A. 如何用顯微鏡觀察人血塗片
用顯微鏡觀察人血塗片的步驟:
1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。
2.把顯微鏡放在實驗台上,略偏左(顯微鏡放在距實驗台邊緣7厘米左右
處)。安裝好目鏡和物鏡。
3.轉動轉換器,使低倍物鏡對准通光孔(物鏡的前端與載物台要保持2厘
米的距離)。
4.把一個較大的光圈對准通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開,便於以後同時畫圖)。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡,可以看到白亮的視野。
5.把所要觀察的玻片標本(也可以用印有「6」字的薄紙片製成)放在載物台上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉動粗准焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。
7.左眼向目鏡內看,同時反方向轉動粗准焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動細准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
8.移動裝片,使要觀察的目標移到視野中央。
9.轉運轉換器,換用高倍鏡。
10.調節細准焦螺旋,直到看到清晰的物像。
B. 顯微鏡下進行血細胞分類時應觀察的部位及方式
應該觀察血塗片上體尾交界處的血細胞,在這一塊區域血細胞單層分布,排列較均勻,形態典型,有利於觀察計數。常見使用「城垛式」的觀察方式,或者說弓字形的觀察方式。
C. 求觀察人血塗片的詳細步驟!!
1.右手握住井壁,左手托住鏡座。
2.把顯微鏡放在實驗台距邊緣7厘米左右處,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
3.移動轉換器,使低倍物鏡對准通光孔(物鏡前端與在物台要保持2厘米距離)
4.把一個較大的光圈對准通光孔。一隻眼注視目境內,另一隻眼睜開。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。
5.把所要觀察的玻片標本放在載物台上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉動粗准焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(此時眼睛一定要看著物鏡)。
7.一隻眼項目鏡內看,同時逆時針方向轉動粗准焦螺旋,使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉動細准焦螺旋,使看到的物象更加清晰。
注意事項:
實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭乾凈。如需擦拭目鏡和物鏡,請用擦鏡紙。轉動轉換器,把兩個物鏡偏到兩邊,並將物鏡緩緩下降到最低處。最後把顯微鏡放進鏡箱里,送回原處。
D. 血塗片染色檢查原蟲的方法和步驟
方法和步驟如下:
一、玻片清潔
玻片清潔。清潔的玻片無油脂,無劃痕,無灰塵,玻片
上有油跡,使厚血膜容易脫落,薄血膜塗布不均勻。在用手
指持玻片時,只能夾持玻片的兩側邊緣,不要接觸玻片的表
面以避免手指上的油污染污玻片。
1.新的載玻片先用熱肥皂水洗滌,再用清水沖洗,然後
用軟而潔凈的毛巾擦乾待用。
2.使用過的載玻片的清潔方法有兩種:
①5%的肥皂水煮沸法
將洗衣肥皂削成小片,加水配成約5%的肥皂 水,煮沸
後將玻片一張一張地平放進肥皂水內,微火煮約一刻鍾,然
後滅火待肥皂水稍冷後,用清潔干毛巾擦凈後待用。
②清潔液浸泡法清潔液配製如下
重鉻酸鉀 80g
濃硫酸 100ml
水(清凈水)1000ml
配製時須先將重鉻酸鉀研細放入水中,慢慢加溫到全部
溶解為止,然後緩緩加入濃硫酸,待溶液冷卻後倒入有蓋的
大口玻璃缸內。清潔玻片時,將待洗的玻片逐張放入清潔中
浸泡一兩天後,取出清水沖洗至完全沒有黃色為止。浸泡前
最好用二甲笨除去鏡油,清潔液顏色變為墨綠色後即失去清
潔作用,不能再用。
二、製片
1.薄血膜塗制
(1)先用75%酒精棉球將耳垂消毒,待酒精幹後用采血針
迅速刺入耳垂近下端邊緣處。
(2)用左手的拇指與食指以及右手的中指向相對的方向
將耳垂輕輕擠壓出血。
(3)取一張潔凈的載玻片,將它的左1/3的表面接觸耳垂
上的血滴不要將玻片接觸耳垂上的皮膚,使一小滴血在
玻片上。血量1-1.5mm
3
.1/4.火柴頭大小。
(4)將推片臵於血溶之前與血液相接觸,待血液沿推片邊
緣展開後,將推片與載玻片保持30角度,用力均勻迅速將
推片由右向左推出而製成薄血膜。塗製得較好的薄血膜只有
一層血球,血球的分布排列比較均勻,血膜的末端突出如舌
狀。
若取的血滴太大,則塗制的血膜太寬太厚,若推時用力
不均勻,則易成梯田狀
若用力太大,則血膜兩端過厚,若塗片上有油污,則血
膜成多孔狀。
2.厚血膜塗制,薄血膜塗好後,再輕擠耳垂擠出約火柴
頭大一血滴,將這一滴血滴在玻片的中心1/3處然後用推片
的一角由血滴中央向周圍旋轉塗成直徑約一厘米的圓形血
膜,旋轉塗制時間不宜過短,以免形成纖維蛋白束,遮蓋了
瘧原蟲。
厚血薄塗好後,應平放待干,防蒼蠅舔食血膜或灰塵落
在上面。受檢者的編號可用鉛筆或鋼筆寫在薄血膜的邊緣
上,也可用蠟筆寫在厚血膜一端。
三、染色
常用的染色方法有姬姆薩氏和瑞氏兩種
(一)吉氏染色法,吉氏染劑是最可靠的血膜染劑其優
點是易於掌握很少染色過度,染好後的血膜褪色較慢
1.吉氏染劑的配製
吉氏染劑粉 0.5g
甘油,中性,25ml
甲醇,純,分析純,25ml
將吉氏染劑粉0.5臵於乳缽中,加少許甘油充分研磨
再加甘油研磨,直至25甘油加完為止。將充分研磨的吉氏
甘油液倒入無水,干凈的棕色玻塞瓶中,然後分次加甲醇於
乳缽洗出染劑倒入瓶中,直至25甲醇將乳缽洗凈並全部倒
入瓶中,塞緊,充分搖勻,放臵室內一星期,每天搖動數次
以後即可使用.
2.緩沖液的配製;
為了保證染色良好,使瘧原蟲的核和胞漿紅蘭分明,感
染的紅血球上的薛氏小點清楚,在稀釋染劑厚液時所用的
蒸餾水必須加緩沖液,緩沖蒸餾水。新鮮蒸餾水可能接近
中性,但貯存在一個時期後,由於吸收了空氣中的 而變為
酸性,因此蒸餾水中必須加緩沖液,使其達到我們需要的效
果。
緩沖液配製
磷酸氫二鈉,無水 9.5g
蒸餾水 1000ml
磷酸二氫鉀 9.07g
蒸餾水 1000ml
將上二液分別貯存於緊塞的玻瓶中。
稀釋染劑所用的蒸餾水的ph以7.0-7.2為最適宜現
用現配可按下表配製緩沖蒸餾水的配製(ml)
ph 磷酸二氫鈉液 磷酸二氫鉀液 蒸餾水
6.6 37 63 900
6.8 49 51 900
7.0 63 37 900
7.2 73 27 900
E. 觀察血細胞常用的方法是什麼
製作血塗片,顯微鏡下觀察
F. 怎麼製作血塗片
血常規是醫院常作的檢查項目,但是由於大部分的醫院用的都是三分類的血球儀(五分類血球儀價格太高),在分析上存在一定的缺陷,而血塗片則能在一定程度上很好的補償,使得三分類的血球儀也能起到五分類的效果。而且血塗片的作用還不僅於此,它還能更直觀的放映細胞的形態,以及血液的一種狀態。現在就血塗片的製作和應用做一個介紹。
血塗片的製作:
血塗片的製作方法很多,但需要的材料也都是一樣的,載玻片和(或)蓋玻片。現在介紹一種我們醫院常用的塗片方法:
1、首先左手持一載玻片,將採到的血(做血常規剩下的血)滴一滴到載玻片一端:
細胞分類計數器
(細胞分類計數器)
通過這樣的方法,我們就可以得到白細胞下各個種類的比例,結合血常規的白細胞數目就可以得到一個五分類的項目,這對於分析動物的身體狀況更加的全面和科學。如上圖的結果是:嗜中性粒細胞百分比:70%(分葉:57%,桿狀:13%);淋巴性細胞百分比:25%;單核細胞百分比:3%;嗜酸性粒細胞百分比:2%;嗜鹼性粒細胞百分比:0。
再簡單舉例說一下血塗片在臨床上的應用,也是結合血常規的分析。如下圖為一隻犬的血常規結果:
從結果上看,RBC(紅細胞)下降,HGB(血紅蛋白)下降,HCT(紅細胞壓積)下降。很明顯的可以判定為貧血。但是貧血也分很多種的,到底是否為再生性,又或者是否是出血或溶血造成的。然後根據血塗片可以知道:
從該血塗片我們可以看到,紅細胞中間淡然區明顯擴大,說明了這是正紅細胞低色素性貧血,也就是由於缺鐵性貧血,需要補充鐵元素,增強營養。一方面我們知道動物的具體情況,可以針對性的幫助解決問題。
當然,血塗片在臨床上的作用不僅僅如此,我們不僅可以用來來計數分類白細胞,還可以觀察紅細胞的形態來判斷如果出現異性紅細胞的原因,白細胞形態異常的原因,還可以看到血液寄生蟲如:巴貝斯焦蟲,血吸蟲的微絲蚴。而且對於血常規儀器還可以起到一種驗證的作用,就是說如果血常規的結果與你在顯微鏡下看到的結果出入較大的時候,如果你保證你血塗片的製作和觀察都沒問題的話,就要懷疑機器的判讀有問題了。比喻抽血過程比較慢,導致血凝的出現而使得機器讀書的血小板極低,以及由於貓的血小板和紅細胞體積較近而出現的判讀等都可以用血塗片來糾正和驗證。
G. 某同學用顯微鏡觀察自製的血塗片,請根據所學知識回答以下問題: (1)如圖(一)是推血塗片的幾種方法
(1)沾一滴血在干凈載玻片右端,取一邊緣光滑平齊的玻片作為推片,推片與載片約成20~30°,並與血滴接觸,使血滴在玻片邊緣散開,迅速將玻片推向左方.作成一均勻和厚度適中的血塗片.故丙正確. (2)圖(二)中B血小板能止血和加速凝血. (3)我們在顯微鏡下看到的物像是上下左右均顛倒的物像,所以我們移動玻片標本時,標本移動的方向正好與物像移動的方向相反.如我們向右移動玻片標本,而在顯微鏡內看到的物像則是向左移動的.所以A物像位於視野左上方,要想把它移到視野中央,應該向左上方移動玻片標本,物像才向右下方移動移到視野中央. (4)圖(三)中Ⅰ是用高倍鏡觀察的情景,Ⅱ是用低倍鏡觀察的情景.所以觀察范圍內細胞個體較小的是Ⅱ,換成高倍鏡後,視野較暗,所以視野較暗的是Ⅰ. 故答案為:(1)丙; (2)B; (3)往左上方移動玻片; (4)ⅡⅠ |
H. 血塗片的血塗片-實驗步驟
4.1ABO血型鑒定
4.1.1取一塊清潔玻片,用記號筆標上記號。
4.1.2用小滴管吸A型標准血清(抗B)一滴加入左側,用另一小滴管吸B型標准血清(抗A)一滴加入右側
4.1.3以穿刺法自左手無名指指尖取血,在玻片的每側各放入一小滴血,用牙簽攪拌,使每側抗血清和血液混和。每邊用一支牙簽,切勿混用。
4.1.4靜置室溫下10—15min後,觀察有無凝集現象,並據此判斷血型。
4.2血塗片的製作及血細胞觀察
4.2.1取末捎血一滴置於玻片的一端,左手持載玻片,右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方後移接觸血滴,血滴即沿推片散開。然後便推片與載片夾角保持30-45度平穩地向前移動,載片上保留下一薄層血膜
4.2.2血塗片製成後可手持玻片在空氣中揮動,使血膜迅速乾燥,以免血細胞皺縮.
4.2.3用蠟筆在血膜兩側劃線,以防染液溢出,然後將血膜平放在染色架上.加瑞氏染液2-3滴,使覆蓋整個血膜,固定0.5-1.0分鍾.滴加等量或稍多的新鮮蒸餾水,與染料混勻染色5-10分鍾.
4.2.4用清水沖去染液,待自然乾燥後或用吸水紙吸干,即可置血塗片於顯微鏡下進行鏡檢。
4.2.5白細胞分類計數。
選擇塗片的體尾交界處染色良好的區域,在油鏡下計數100個紅細胞,按其形態特徵進行分類計數,求出各類細胞所佔比值。
1.瑞氏染液:瑞氏染料1g加甲醇(AR)600ML。將瑞氏染料放在清潔乾燥乳缽中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解.將已完全溶解的部分倒入棕色試劑瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解於甲醇為止。新配製的染料偏鹼,須在室溫和37℃下一定時間待染料成熟,主要美藍逐漸增多為天青B後才能使用.貯存時間越久染色效果越好,因此,Deamgilliland等採用吸光度比值(rA)作為瑞氏染料的質量規格.rA測定方法如下:取瑞氏染液15-25ul(視染液濃度而定)加甲醇10ml稀釋,混勻後以甲醇為空白管分別以波長650nm,525nm比色,rA=A650/A525。因為美藍吸收峰為波長650nm,伊紅吸收峰波長為525nm,天青B吸收峰也為650nm,但吸光度A約為美藍的一半.所以新配製染料的RA接近2,隨著美藍逐漸氧化為天青B,RA也相應下降,RA下降達1.3±0.1即可使用.瑞氏染料在貯存過程中必須塞嚴,以防甲醇揮發和氧化為甲酸.有人主張配方中加入30ml甘油,防止甲酸揮發,並可使細胞染色清晰.甲醇必須純凈,如甲醇中丙酮含量過多,染色偏酸,使細胞著色不良。磷酸鹽緩沖液(PH6.4-6.8):磷酸二氫鉀0.3g加磷酸氫二鈉0.2g再加蒸餾水至1000ml,配製成磷酸鹽緩沖液調整PH,如無緩沖液可用新鮮蒸餾水代替。
I. 我要最標準的觀察人血塗片的實驗操作,找的過程一定要具體啊,謝了,會有加分的
1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。
2.把顯微鏡放在實驗台上,略偏左(顯微鏡放在距實驗台邊緣7厘米左右
處)。安裝好目鏡和物鏡。
二、對光
3.轉動轉換器,使低倍物鏡對准通光孔(物鏡的前端與載物台要保持2厘
米的距離)。
4.把一個較大的光圈對准通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開,便於以後
同時畫圖)。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡,可以
看到白亮的視野。
三、觀察
5.把所要觀察的玻片標本(也可以用印有「6」字的薄紙片製成)放在
載物台上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉動粗准焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼
睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。
7.左眼向目鏡內看,同時反方向轉動粗准焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直
到看清物像為止。再略微轉動細准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
四 用高倍鏡觀察
8.移動裝片,使要觀察的目標移到視野中央
9.轉運轉換器,換用高倍鏡
10,調節細准焦螺旋,直到看到清晰的物像
(換高倍鏡切不可動粗准焦)
給我分吧,謝了!
J. 觀察血細胞常用的方法有哪些
做血塗片在顯微鏡下觀察,加入化學物質使反應或染色在鏡下觀察
因為太小了,只能在鏡下觀察啊