真菌常用染色方法

① 細菌有哪些染色方法

1
革蘭氏染色法
是最常用的鑒別染色法之一。此法起始1881年，染色步驟是先用結晶紫或龍膽紫染液加於已固定好的標本上使之著色，其後加碘液作媒染劑，再用酒精脫色，最後用復紅或沙黃復染。革蘭氏染色的結果與培養基成分、培養條件及操作技術等有密切關系。如塗片太厚影響酒精脫色，革蘭氏陰性菌則可染成革蘭氏陽性菌。脫色時若酒精作用時間太長,
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,革蘭氏陽性菌又會染成革蘭氏陰性菌。在缺乏鎂鹽的培養基中，革蘭氏陽性菌可變成革蘭氏陰性菌。菌齡也能影響染色的結果，這與生長過程中核酸含量的改變有關。革蘭氏染色法的原理還不十分清楚，有化學學說、等電點學說、滲透性學法，目前最通常的解釋是革蘭氏陽性菌在95%酒精中因含粘肽多而導致細胞壁脫水，通透性減低，使在細菌細胞內著色的染料─碘復合物不易透出細胞壁，所以保留了紫色；革蘭氏陰性菌含粘肽少，其細胞壁在95%酒精作用下通透性變化不大，酒精容易進入菌體內溶解染料─碘復合物而透出，失去紫色後被復染成為紅色。
2
抗酸染色法
有些細菌，如結核桿菌，不般不易著色，一旦染上色後又不易被鹽酸酒精脫色，稱為抗酸菌。主要步驟是將細菌塗片、乾燥、固定後，以石炭酸復紅染液加溫進行染色，然後用含酸的酒精脫色，最後用美藍復染。一般細菌以及標本中的物質都被脫色，抗酸菌則不能，仍為紅色。在藍色背景上呈紅色的細菌即為抗酸菌。
3
細菌特殊結構的染色法
細菌的特殊結構，如鞭毛、莢膜、細胞壁、芽孢及異染顆粒等，用普通染色法不易著色，故需用特殊染色法。
4
負染色法
是指背景著色而細菌本身不著色。常用墨汁負染色法配合單染色法（如美藍）檢查細菌的莢膜，背景呈黑色，菌體染成藍色,
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,莢膜不著色，包繞在菌體周圍，成為一層透明的空圈。
5
熒光染色法
用熒光染料，如金胺、吖啶橙等進行染色。細菌用熒光染料著色後在熒光顯微鏡下檢查，可在黑的背景中觀察到細菌發出明亮的熒光。用熒光染色法檢查細菌，有加快檢查速度和提高陽性率等優點。
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② 常見的真菌塗片或組織切片的特殊染色有哪些各適用於

常見的真菌塗片或組織切片的特殊染色有哪些各適用於
凡是間葉組織細胞都可產生網織纖維，也可產生膠原纖維，纖維母細胞是產生膠原纖維的主要細胞。膠原纖維是結締組織中的主要纖維，是結締組織中起支持作用的重要部分，具有一定的韌性和堅固性，能抵抗一定的牽引力而不致撕裂。膠原纖維是原膠原互相錯開1/4平行排列交聯成膠原原纖維，膠原原纖維再聚合成較寬的結構。按膠原的化學成分可分為15種，間質中的膠原纖維主要由I、Ⅱ、Ⅲ型膠原組成，新鮮時呈白色，故又稱為白纖維。在HE染色中呈均一的粉紅色，與周圍間質區分不是很清楚。染色後，便可明顯區別開來，易於觀察病變時膠原纖維的變化。
應用：
（1）器官硬化性疾病的觀察：如肝硬變、心肌瘢痕的觀察，膠原染色更易於觀察診斷。
（2）瘢痕與澱粉樣物質鑒別：前者膠原纖維染色為陽性，後者為陰性。
（3）骨纖維異常增殖病與骨纖維化的鑒別：利用膠原纖維染色可較易觀察前者膠原纖維紊亂，縱橫交錯，後者較規則。 網狀纖維是非常細而短的纖維，大量堆積時則形成緻密的網狀，故有網狀纖維之稱。疏鬆組織中網狀纖維比較少，它多分布在結締組織與其它組織交界處，如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內，毛細血管周圍以及造血器官，內分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網狀纖維。
網狀纖維的變化，反映了疾病的發生和發展的不同過程，對疾病的診斷有極大意義。網狀纖維的多少、粗細緊密、疏鬆或斷裂，都是病理檢驗的重要指標，尤其是在臨床病理診斷中，可根據其存在和分布來鑒別癌與肉瘤。而在HE染色標本上，網狀纖維不易顯色。所以網狀纖維的組織化學染色，在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。
應用：
（1）癌與肉瘤的鑒別：在網狀纖維染色下可清楚顯示出肉瘤每一個細胞周圍有網狀纖維圍繞，或似為團狀或巢狀的瘤組織，但團巢內仍有破碎的網狀纖維，癌顯示為明顯巢或索狀，巢內無網狀纖維。
（2）骨基質與濃縮的分泌物、血漿或水腫液的鑒別：骨基質內有網狀纖維，而後者無。
（3）炎症細胞與癌細胞的鑒別：在支氣管活檢中有時擠壓較重，一些深染的細胞擠壓成團，難以判斷是受擠壓的炎症細胞。這種病例染網狀纖維有利於鑒別，炎症細胞不成巢，小細胞癌可有巢狀或索狀結構。
（4）壞死與死後自溶的鑒別：在胰腺是生前壞死還是死後自溶有時很難鑒別，染網狀纖維，前者網狀纖維支架破壞較嚴重，結構塌陷，而後者雖然死後自溶嚴重，但網狀纖維支架結構常可保存。
（5）血管性腫瘤的鑒別：有時血管內皮細胞瘤與血管周圍細胞瘤常規染色較難鑒別，網狀纖維染色，可顯示清楚的血管結構，看清腫瘤細胞與血管關系有利於鑒別。內皮細胞性腫瘤，腫瘤位於血管壁的網狀支架內，而外周細胞則圍繞著血管壁或與之呈放射狀排列。
（6）肝硬化及慢性肝炎肝細胞碎片狀壞死或纖維化的鑒別：
a．慢性活動性肝炎壞死灶有時較難辨認，染網狀纖維顯示局部有網狀支架的破壞與崩解，結合HE切片較易判斷小灶狀壞死。
b．慢性活動性肝炎輕度纖維化，在網狀纖維染色下較易判斷。
c．慢性淤血性肝硬變有時較難判斷，網狀纖維較易觀察中央靜脈及小葉下靜脈通道上的網狀纖維增生。增生較明顯，有反包圍現象，形成假小葉結構，就可診斷淤血性肝硬變。
（7）萎縮性胃炎的診斷：在HE染色胃粘膜有無萎縮較難判斷，網狀纖維染色可較清楚顯示胃粘膜正常結構破壞，間質纖維增生，有助於胃粘膜萎縮的診斷。
（8）有助於癌浸潤的診斷，有些上皮性腫瘤是否早期突破基底膜形成浸潤，HE染色難以確診，而網狀纖維染色可較清楚顯示基底膜，較易確定基底膜有無早期浸潤破壞現象。
（9）腦內原發瘤與轉移瘤的鑒別：腦內絕大多數腫瘤網狀纖維很少，只有血管周圍有少量網狀纖維，而轉移癌及肉瘤都有明顯的網狀纖維，故有利於鑒別。
（10）非乾酪性結核與結節病的鑒別：後者結節內及結節周圍較早出現明顯的網狀纖維，觀察此有利於二者鑒別。

③ 常用微生物染色的方法

革蘭染色

抗酸染色:分支桿菌屬,諾卡放線菌屬。石炭酸復紅染色,金永染色。

芽孢染色:用於區分細菌的芽孢和營養細胞。結果芽孢染成綠色,營養細胞為紅色。

晶體染色:觀察蘇雲金桿菌不同變種的晶體形狀大小。結果晶體染成紫色,芽孢為透明橢圓形,僅見具有輪廓的折光體。

鞭毛染色:有賴夫生染色法、銀鹽染色法,西薩-基爾染色法等。一般以西薩-基爾(Cesares-Gill)染法效果最佳。

異染顆粒染色:用於白喉棒狀桿菌染色,直接塗片或改良阿伯特法染色。

墨汁莢膜染色:觀察菌體有無莢膜,如新型隱球菌。碳素墨汁。

鍍銀染色:螺旋體

吉姆薩染色:螺旋體

熒光染色

魏申染色(wayson)染色:鼠疫耶爾森桿菌。

鉻酸P、A、S真菌類染色。結果:麴黴菌、念球菌屬、細胞漿菌屬、隱球菌屬為紅紫色。麴黴菌絲周邊紫紅色,彈力纖維紫色,背景綠色。

Mann氏甲基藍伊紅染色法:病毒包涵體染色。Negri氏小體紅色。

Nacchiavello氏染色:病毒包涵體染色。結果:包涵體、立克次氏體均染紅色,其餘組織呈藍色。

Crocott-Gomori氏六胺銀法:新型隱球菌

碘染色法吉姆薩染色:衣原體

乳酸酚棉藍染色,糖原染色:真菌,前者適用於所有真菌,呈藍色。

吉姆薩染色,瑞氏染色:鞭毛蟲,滴蟲,錐蟲,瘧原蟲,弓形蟲,隱孢子蟲等原蟲。

三色染色,碘染色:阿米巴等原蟲。

熒光素吖啶橙染色:瘧原蟲。

金胺-酚染色:隱孢子蟲。

甲苯胺藍,四胺銀染色:耶氏肺孢子蟲。

④ 實驗室常用的染色方法有哪幾種

印染行業的化驗室一般的都是浸染法，就是拿染液通過染色工藝把布浸染到上色，還有扎染，卷染，

⑤ 細菌常見的幾種染色方法

常用的是革蘭氏染色法，這個方法復雜一點，還有一個簡單染色法是用石炭酸復紅等等染色，還有一個特殊結構染色法和負染色法熒光染色法。

⑥ 鑒定真菌最常用的簡便方法是

農業生產中，作物病害防治至關重要，要想對症下葯，首先就要做到將作物幾種病害區分開來，本文教您辨別作物細菌性病害、真菌性病害、病毒性病害、生理性病害以及葯害。

一、各類病害的主要特徵

（一）真菌性病害

1、會產生不同形狀的病斑

2、病斑上會產生不同顏色的霉狀物或粉狀物，無臭味。

（二）細菌性病害

1、葉片上病斑無霉狀物或粉狀物，而且病斑處很薄易破裂或穿孔。

2、根莖葉易腐爛、有臭味。

3、果實上有瘡痂，在果實表面有小突起。

4、根部尖端維管束易變褐色。

（三）病毒性病害

病症主要表現在嫩葉上，種類雖少，但危害大，易得難治。

1、花葉病毒，葉片皺縮，黃綠相間，金黃易凹，深綠易凸，無病葉平展，葉眉扇形。

2、厥葉型，葉片細長，葉脈上沖，呈線狀。

3、卷葉型，葉片扭曲，向水彎曲。

4、條斑型，在西紅柿要成熟果實上，出現青白色，漸變鐵銹色，不易著色，果實皮里肉外有褐色條紋。辣椒果尖端向上變黃色，在變黃部位出現短的褐色條紋。

（四）生理性病害

屬非生物病害，不具傳染性。一般上午低於20℃，開花結果作物不能正常開花授粉，易出空洞果、畸形果，及落花落果。下午3時至半夜溫度低於16℃，養份不易轉化積累在葉生上和花芽上，造成葉片黑厚而小濃綠、易化瓜落果，形成花打頂、瓜打頂、自封頂。下半夜溫度低於10℃，易低溫受阻，葉易老化、乾枯。

茄果蔬菜缺素症：作物龍頭彎曲，自封頂很容易是缺硼。開花不結實也是缺硼。龍頭下新出來的新葉干尖，干邊是缺鈣。龍頭下新葉是黃葉為缺硫。龍頭下新葉是白葉缺鐵。下部葉片葉全變黃這是缺鎂。下部葉脈綠，葉下垂、葉肉有黃斑這是缺錳。下部葉肉變黃，葉脈是綠色這是缺鋅。下部葉全綠，黃邊是缺鉀。

⑦ 顯微鏡下真菌標本染色

一般來說，染過色的細胞顏色肯定更深一些，尤其是細胞質顏色更清楚。但是也要看是什麼染料，因為有些染料是特異性的染色。

⑧ 常用的細胞染色方法有哪些

常用的細胞染色方法有：

1、簡單染色法，常用鹼性染料如美藍等進行簡單染色；

2、革蘭氏染色法，主要包括結晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程；

3、瑞氏染色法，瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成；

4、吉姆薩染色法，吉姆薩染色原理與結果和瑞特染色法基本相同；

5、細胞免疫熒光染色法，免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結合。

染色是生物顯微玻片標本製作中最重要的環節之一。先把破壞細胞膜的選擇透過性，再使用染色劑，將生物組織浸入染色劑內，使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色，產生不同的折射率，以便觀察。

另外，銀染法也較常用。當組織塊浸入硝酸銀溶液中時，有的組織結構能直接把硝酸銀還原，使銀粒附於其上，呈棕黑色或棕黃色。有些結構本身對硝酸銀無直接還原能力，若加入還原劑，可使硝酸銀還原沉澱顯色。

(8)真菌常用染色方法擴展閱讀：

染色細胞固定有物理法與化學法，物理法為乾燥和火焰固定，化學法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。

1、偶氮偶聯法：利用人工合成的酶底物，在酶作用下，產生分解產物，再與重氮鹽結合引起偶氮偶聯，使其形成不溶性的偶氮色素，以此證明酶的存在。

2、聯苯胺法：粒細胞和單核細胞中的過氧化物酶作用於過氧化氫，釋放新生態氧，使無色的聯苯胺形成藍色沉澱。

3、普魯士藍法：細胞內、外鐵與酸性亞鐵氰化鉀作用，形成藍色亞鐵氰化鐵沉澱。

4、雪夫反應：過碘酸氧化細胞內糖類中乙二醇基形成乙醛基，醛基與雪夫試劑作用，使無色品紅形成紅色沉澱。

5、金屬沉著法：其他尚有物理學方法，如脂溶性染料染色（顯示脂質）、熒光顯示、放射自顯影以及體外活體染色亦常用於臨床血液細胞學診斷。

⑨ 微生物染色的染色方法

微生物染色方法一般分為單染色法和復染色法兩種。前者用一種染料使微生物染色，但不能鑒別微生物。復染色法是用兩種或兩種以上染料，有協助鑒別微生物的作用。故亦稱鑒別染色法。常用的復染色法有革蘭氏染色法和抗酸性染色法，此外還有鑒別細胞各部分結構的（如芽胞、鞭毛、細胞核等）特殊染色法。食品微生物檢驗中常用的是單染色法和革蘭氏染色法。
用一種染色劑對塗片進行染色，簡便易行，適於進行微生物的形態觀察。在一般情況下，細菌菌體多帶負電荷，易於和帶正電荷的鹼性染料結合而被染色。因此，常用鹼性染料進行單染色，如美蘭、孔雀綠、鹼性復紅、結晶紫和中性紅等。若使用酸性染料，多用剛果紅、伊紅、藻紅和酸性品紅等。使用酸性染料時，必須降低染液的PH值，使其呈現強酸性（低於細菌菌體等電點），讓菌體帶正電荷，才易於被酸性染料染色。
單染色一般要經過塗片、固定、染色、水洗和乾燥五個步驟。
染色結果依染料不同而不同：
石碳酸復紅染色液：著色快，時間短，菌體呈紅色。
美蘭染色液：著色慢，時間長，效果清晰，菌體呈藍色。
草酸銨結晶染色液：染色迅速，著色深，菌體呈紫色。
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創立。
細菌先經鹼性染料結晶染色，而經碘液媒染後，用酒精脫色，在一定條件下有的細菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌（G+），後者為革蘭氏陰性菌（G—）。為觀察方便，脫色後再用一種紅色染料如鹼性蕃紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數和球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應；弧菌，螺旋體和大多數致病性的無芽胞桿菌都呈現負反應。
革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學組成和生理性質上有很多差別，染色反應不一樣。現在一般認為革蘭氏陽性菌體內含有特殊的核蛋白質鎂鹽與多糖的復合物，它與碘和結晶紫的復合物結合很牢，不易脫色，陰性菌復合物結合程度底，吸附染料差，易脫色，這是染色反應的主要依據。
另外，陽性菌菌體等電點較陰性菌為低，在相同PH條件下進行染色，陽性菌吸附鹼性染料很多，因此不易脫去，陰性菌則相反。所以染色時的條件要嚴格控制。例如，在強鹼的條件下進行染色，兩類菌吸附鹼性染料都多，都可呈正反應；PH很低時，則可都呈負反應。此外，兩類菌的細胞壁等對結晶紫—碘復合物的通透性也不一致，陽性菌透性小，故不易被脫色，陰性菌透性大，易脫色。所以脫色時間，脫色方法也應嚴格控制。

⑩ 真菌的染色方法有哪些分別可以把真菌染成什麼顏色

碘