㈠ 原生質體融合的誘導融合法是怎樣做的
誘導融合的方法大體可以分為物理的和化學的兩類。前者是利用顯微操作、灌流吸管、離心或振動等機械以促使原生質體融合,這種方法目前多與誘導劑結合起來使用,化學融合法是用不同的試劑作誘導劑,促使原生質體融合,形成異核體(heterokaryons)。
目前常用的較有效的是高pH—高鈣法、NaNOsubscript3subscript和聚二乙醇法。
圖3-1:原生質體融合方法
㈡ 原生質體融合的方法
原生質體融合的方法主要包括化學融合法、電融合法和激光誘導融合法。具體內容如下:
1、化學融合法。最常用的是聚乙二醇(PEG)助融法,通過在無菌條件下混合雙親原生質體並加入PEG溶液來誘導融合,此方法融合效率高,適用范圍廣。
2、電融合法。這種方法涉及將雙親原生質體懸浮混合後,置於微電極之間,施加交變電場,導致原生質體質膜瞬間被擊穿,從而發生融合。
3、激光誘導融合法。這種方法利用激光微束技術對細胞進行照射,誘導細胞發生融合,其優點是毒性小、損傷小,但設備昂貴,操作技術難度大,融合效率相對較低。