❶ 凝膠電泳條帶怎麼分析
凝膠電泳條帶怎麼分析?相關內容如下:
1. 觀察和記錄條帶:
在電泳完成後,打開電泳儀,將凝膠板取出。將凝膠置於透明的凝膠成像儀(或透光板)上,使用紫外線或藍光照射,觀察凝膠上的條帶。用相機或專業的凝膠成像系統拍照記錄條帶圖像。
5. 分析條帶的強度:
凝膠電泳圖像上的條帶強度通常反映了樣品中分子的數量。較深、較亮的條帶表示相應分子的數量較多,而較淺、較暗的條帶則表示分子數量較少。
6. 標記和記錄:
對不同樣品的條帶進行標記和記錄,包括遷移距離、大小估計、強度等信息。這些數據對於後續的實驗分析和結果解釋非常重要。
7. 定量分析(可選):
如果需要定量分析,可以使用專業的圖像分析軟體,對條帶進行定量測量。這種方法可以提供更精確的分析結果。
❷ Gelred核酸凝膠染料的使用方法
A. 預制凝膠法
將GelRed(10,000X)以1:10,000比例加入熔化的凝膠中,混合均勻,等待凝膠冷卻至45℃左右時添加GelRed。倒膠,室溫放置等待凝固,然後常規上樣電泳。觀察染色凝膠使用標準的透照儀(302或312 nm),成像使用溴化乙錠濾光器,SYBR或GelStar濾光器凝膠成像可以得到很好的結果。未使用的含有GelRed的預制凝膠可以重新熔化做膠,為保證最佳熒光信號,酌情添加適量染料。不建議長期儲存含有GelRed熔化形式的瓊脂糖。含有GelRed的預制膠可以保存在4℃供下次使用。
B. 泡染法
進行凝膠電泳,稀釋 GelRed :用水將10,000X儲備液稀釋3300倍製成3X染色液。通常情況下50mL染色液足夠染一小塊凝膠。把凝膠放於聚丙烯染色托盤中,添加足量的3X染色液至浸沒凝膠。室溫緩慢振盪染色30min,最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同略有不同。對於含3.5-10%丙烯醯胺的凝膠,染色時間通常介於30min至1h,並隨丙烯醯胺含量增加而延長。不必脫色,必要的話可以水洗以降低背景值。使用標準的透照儀(302或312 nm)觀察染色凝膠,成像使用溴化乙錠濾光器,SYBR 或 GelStar濾光器凝膠成像也可以得到很好的結果。染色液可重復使用2-3次,室溫下避光保存。