植物細胞獲得原生質體的常用方法

⑴ 植物原生質體的分離方法主要有機械法和___________。

植物原生質體的分離方法主要有機械法和酶解法。

1、機械分離法：常用於分離藻類原生質體，採用滲透方法使細胞發生質壁分離，用刀把細胞壁切破，使原生質體流出。（手工操作難度大，得率低，費時費力）

2、酶解分離法：用酶（瓊脂酶，果膠酶，纖維素酶等）將細胞壁分解。（條件溫和，原生質體完整性好，活力高，得率高）因此原生質體制備多採用酶解法，此法操作過程分為：取材消毒，酶解制備，原生質體收集。

植物原生質體融合的方法

1、鹽類融合法：此法是最早的誘導原生質體融合的方法，鹽類融合法的優點在於鹽類融合劑對原生質體的破壞力小，其缺點是異核體形成的頻率不高；

2、高Ca2+、高pH融合法：它的優點是能獲得較高的融合率，其缺點是對於有些原生質體系統來說，較高的pH可能會產生一定的毒害作用；

3、聚乙二醇融合法(PEG法)：其優點是異核體的形成率很高，可重復性較強，對於大多數細胞類型來說毒性很低，形成雙核體的比例很高；

4、電融合法：電融合法是將一定密度的原生質體懸浮至於一個融合的小室中，小室兩端裝電極，其優點是融合的條件更加數據化，便於控制和相互比較。