A. 菌種保存的方法有哪些,菌種傳代操作規程
二、菌種傳代操作規程
1、點燃酒精燈,在火焰旁的上方灼燒接種環。
2、將原有的菌種斜面培養基(菌種管)和待接種的新斜面培養基(接種管)用左手的拇指、食指和中指夾住,菌種管在前,接種管在後,然後斜持試管(45°),讓試管內斜面向上,兩個試管的口子平齊。
3、右手在火焰旁邊轉動兩管的棉塞,然後右手拿著接種環的柄端,垂直將接種環在火焰上灼燒,頂端的環必須燒紅,而且凡是接種時進入試管的部分,均應通過火焰灼燒。
4、使用右手的小指和手掌之間以及無名指和小指之間,將兩管的棉塞拔出,拿住,然後將試管在火焰上通過。
5、將接種環插入菌種管內,接觸無菌苔生長的培養基,待冷後,從斜面上挑取少許菌苔,然後迅速插入接種管,在斜面上輕輕劃線接種(由下而上劃直線,然後由下往上劃曲線)。
6、接種完畢後,將管口通過火焰滅菌,並將棉塞塞上。
B. 保藏菌種的方法有哪些
1、傳代培養保藏法:包括又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等,培養後於4-6℃冰箱內保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法:液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間。
3、載體保藏法:載體保藏法是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而後進行乾燥的保藏法。
4、寄主保藏法:寄主保藏法用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物。
5、冷凍乾燥保藏法:先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然後在減壓下利用升華現象除去水分(真空乾燥),其中真空冷凍乾燥法最常見。
菌種保藏的原理:
菌種保藏有多種方法,其原理大多大同小異,主要是運用一些方式盡量降低生物體內的代謝,達到延長生命,減少變異的目的。通常採用的方法為低溫、缺氧、乾燥。
低溫主要對菌種產生兩方面的影響,首先,較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活,降低新陳代謝,達到保藏菌種的目的。其次,低溫同時會導致菌體誘發菌絲自溶機制,如果降溫過程失誤,同樣會造成機體的機械損傷和溶質損傷。