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2.4 化學和微生物分析
在試驗日糧干物質和粗蛋白含量的分析中，排泄物和益生菌產品是根據AOAC（1990）方法（分別為930.05和976.05 ）分析。使用彈式量熱計（model 1261, Parr Instrument Co., Moline, IL）測定總能量，根據芬頓博士（1979）的使用自動化分光光度計確定鉻濃度。
第14和28天排泄物樣本和第28天的腸道消化物的微生物分析，將樣品在不同培養基中培養，測定總厭氧菌（胰酶解物大豆瓊脂),雙歧桿菌（MRS培養基），乳桿菌種（MRS培養基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸鹽酸鹽水化合物），梭菌屬某些種（TSC培養基）和大腸桿菌群（紫色紅膽汁瓊脂）。通過培養技術對"益生菌"產品進行了微生物分析。嗜酸乳桿菌用MRS培養基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸鹽酸鹽水化合物培養，枯草芽孢桿菌通過瓊脂培養基平板計數，酵母菌和米麴黴菌通過土豆葡萄糖培養基計數。通過使用厭氧袋厭氧系統創造厭氧條件，(BBL, No. 260678; Difco, Detroit, MI)。大豆胰酶解物的瓊脂(No.236950)，MRS瓊脂培養基(No. 288130)，結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(No.216695)，平板計數瓊脂(No. 247940)，和馬鈴薯葡萄糖培養基(No. 213400)的使用是從Difco實驗室（(Detroit,MI)購買的，和TSC培養基是從Oxoid (Hampshire, UK)購買的。益生菌產品的pH值由pH計(Basic pH Meter PB-11, Sartorius,Germany).測定。
2.5 小腸形態學
每個腸道樣本取三橫截面，使用標準的石蠟包埋程序與天青A和曙紅染色。共有10個完好無損，良好的導向隱窩絨毛單位被選定為每個腸道截面，每個樣品一式三份的 (Jin et al.2008)。從絨毛尖端絨毛到隱窩交界處測量絨毛高度，這個被定義為相鄰絨毛內陷深度和隱窩深度。所有形態測量（絨毛高度和隱窩深度）通過使用一個圖像處理的分析系統（擎天柱軟體版本6.5，網路媒體遺傳學，北讀，MA），增量為10-μm。
② 如何培養厭氧菌
有幾種密封方法：
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌，必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑，或用物理、化學方法去除環境中的游離氧，以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基，牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多，可根據實際情況選用。
1．厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管，可放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的乾燥缸，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而將厭氧菌培養出來。
2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內裝氣體發生管（有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後，盡量擠出袋內空氣，然後密封袋口。先折斷氣體發生管，後折斷美蘭指示劑管，命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態，可以孵育。
3．厭氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作，故名。箱側有一交換室，具有內外二門，內門通箱內先關著。欲放物入箱，先打開外門，放入交換室，關上外門進行抽氣和換氣（H2，CO2，N2）達到厭氧狀態，然後手伸入手套把交換室內門打開，將物品移入箱內，關上內門。箱內保持厭氧狀態，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究，大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售。
5.生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物（多是植物），消耗氧氣，同時產生二氧化碳，供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的白蠟封邊，造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養，簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基：本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林，造成無氧環境。
至於厭氧培養基怎麼配我就不太清楚了，不過就是按一般要的各種營養，滅菌即可，個人看法