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常用細胞破碎方法有

發布時間:2024-11-04 22:39:58

① 論述進行細胞破碎時常用的方法有哪些

物理,化學。物理法比如搗碎研磨。化學法比如利用脂溶劑溶解細胞膜後破碎。

② 細胞破碎方法

很多,可以用滲透原理,讓細胞吸水漲大而達到細胞膜破碎的目的。
例:用純化水稀釋血液

也用離心的原理讓細胞破碎,如將血液放入離心機中在4000轉/分的轉速下離心3分鍾。

需注意的是細胞破碎用的是細胞而不是組織或其他。

③ 常用細胞破碎的方法有那些各有什麼優缺點

1、高速組織搗碎 :將材料配成稀糊狀液,放置於筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關後,逐步加速至所需速度。此法適用於動物內臟組織、植物肉質種 子等。2、玻璃勻漿器勻漿 :先將剪碎的組織置於管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用於量少和動物臟器組織。3、超聲波處理法 :用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震盪破裂,此法多適用於微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在 1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,應採取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用。4、反復凍融法: 將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。5、化學處理法: 有些動物細胞,例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可採用溶菌酶處理效果更好。無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸 (DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺醯氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活 力,但不是全部,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合於目的物質的提取。

④ 細胞破碎的方法有哪些

博凌科為解答:1、高速組織搗碎
:將材料配成稀糊狀液,放置於筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關後,逐步加速至所需速度。此法適用於動物內臟組織、植物肉質種
子等。2、玻璃勻漿器勻漿
:先將剪碎的組織置於管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用於量少和動物臟器組織。3、超聲波處理法
:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震盪破裂,此法多適用於微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在
1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,應採取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用。4、反復凍融法:
將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。5、化學處理法:
有些動物細胞,例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可採用溶菌酶處理效果更好。無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸
(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺醯氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活
力,但不是全部,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合於目的物質的提取。

⑤ 2、簡述主要的破碎方法有哪些

細胞的破碎方法可分為:機械法,包括(1)搗碎法(2)研磨法(3)勻漿法 物理法,包括(1)反復凍融法(2)超聲波處理法(3)壓榨法 化學與生物化學方法,包括(1)酶解法(2)化學法 
目的意義:除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶之外,對於細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化,都需要事先將細胞和組織破碎,使生物大分子充分釋放到溶液中,並不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體不同部位的組織,其組織破碎的難易不一,使用的方法也不相同。

⑥ 實驗室常用哪些細胞破碎方法

一般用物理或者化學方法來使得細胞裂解
物理法:
(1)反復凍融:將細胞反復放置於-20℃冷凍以及25-30℃環境下,反復冷凍溶解10次-20次。適用於例如血細胞等大部分哺乳動物細胞。
(2)煮沸法:與凍融法相反,將細胞放置於100℃沸水煮沸5-10分鍾,適用於大部分微生物細胞。
(3)超聲法:將細胞放置於超聲破碎儀中,以一定頻率的超聲破碎細胞,適用於絕大部分微生物細胞。
(4)滲透壓法:將血細胞等細胞膜較為薄弱的細胞放置於純水等低滲溶液,細胞吸收大量水分破解。
(5)液氮法:植物細胞一般採用液氮捻磨的方法破解細胞。
化學法:
(1)強酸、強鹼溶液:一般應用0.5N NaOH溶液可以裂解絕大部分動物細胞和微生物細胞。
(2)生物酶:一般用溶菌酶、蛋白酶K等酶裂解微生物細胞。

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