洗脫常用方法

㈠ 梯度洗脫的原理及滿足條件

流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k，並使樣品中的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。
具體地講，當樣品隨梯度起點的流動相進入色譜柱入口時，由於起點流動相中強洗脫溶劑B含量較低，化合物C1(保留性適中)和化合物C2(保留較強)因分配系數(k值)較高而滯留於色譜柱入口附近，幾乎未移動。一段時間後，B增加到一定數值，C1的k值達到足夠小(比如小於10)，其在柱中的移動速率明顯增大，並且隨著B的增加，其移動速率愈加快速，直到tC1時流出色譜柱，被檢測器檢測到並被記錄成色譜峰C1，tC1雖然比等度時的保留時間長很多，但C1的的平均k值卻很小，因而色譜峰並未展寬，靈敏度仍處於較高水平。B持續增加，在隨後的某個時間點，C2的k值也降到10以下，C2的移動速率也開始變快，以與C1類似的方式於tC2被洗脫出色譜柱，其平均k值同樣很小，色譜峰亦未展寬，靈敏度處於較高水平。 提高柱效，改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最後一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恆流泵，否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。
如圖（兩個圖一種原理，前者為洗脫裝置和柱子之間封閉，適用於配備壓力泵的色譜柱，後者為洗脫裝置和柱子之間隔離開來，是梯度洗脫的簡易裝置。）：兩個容器放於同一水平上，兩容器連通，B與柱相連，當溶液由B流入柱時，A中的溶液就會自動來補充，經攪拌與第一容器的溶液相混合，這樣流入柱中的緩沖液的洗脫能力即成梯度變化。 ①洗脫液體積應足夠大，一般要幾十倍於床體積，從而使分離的各峰不致於太擁擠。②梯度的上限要足夠高，使緊密吸附的物質能被洗脫下來。③梯度不要上升太快，要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸，會引起區帶擴散；而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
梯度洗脫可分為低壓梯度(又稱為外梯度)和高壓梯度(又稱為內梯度)。
(1)低壓梯度裝置。低壓梯度是採用比例調節閥，在常壓下預先按一定的程序將溶劑混
合後，再用泵輸入色譜柱系統，也稱為泵前混合。
(2)高壓梯度裝置。由兩台(或多台)高壓輸液泵、梯度程序控制器(或計算機及介面板控
制)、混合器等部件所組成。兩台(或多台)泵分別將兩種(或多種)極性不同的溶劑輸入混合
器，經充分混合後進入色譜柱系統。

㈡ 4層析柱洗脫方式有幾種各適用於何種情況

簡單洗脫：始終用同一種洗脫劑洗脫，凝膠層析多採用這種洗脫方式。如果各組分對固定相的親和力差異不大，其區帶的洗脫時間間隔也不長，採用這種方法較為適宜。但要注意必須選擇合適的溶劑，才能使各組分的分配系數較大。
階段洗脫：該方法按照洗脫能力遞增的順序排列，用不同的洗脫液逐級洗脫。它主要對混合物組成簡單、各組分性質差異較大或需快速分離的物質適用。每次用一種洗脫液將其中一種組分快速洗脫下來。
梯度洗脫：當混合物中組分復雜且性質差異較小時，應採用梯度洗脫。它的洗脫能力是逐步連續增加的，梯度可以指濃度、極性、離子強度或pH等。常用的是濃度梯度，在溶液中也就是離子強度梯度。

㈢ 常用的洗脫劑有哪些

在洗脫法色譜操作中，流動相攜帶待測組分在色譜柱內向前移動並流出色譜柱的過程稱為洗脫。eluent所用流動相稱為洗脫劑。 詳情>>

㈣ 衣服染色了用什麼洗脫

84消毒液

㈤ ni-nta純化his標簽蛋白的洗脫方法有哪些

Ni-NTA純化His標簽蛋白的洗脫方法
結合緩沖液：20mM磷酸納，0.25M NaCl，10mM咪唑，pH7.4
洗脫緩沖液：20mM磷酸納，0.25M NaCl，500mM咪唑，pH7.4

㈥ 各類色譜洗脫規律，簡明扼要

HPLC高效液相色譜按 固定相與流動相的極性相對大小分為正相和反相色譜
正相中流動相極性小於固定相，極性組分被滯留，出峰順序：非極性->弱極性->極性
反相色譜流動相極性大於固定相，固定相常用C8-C18，非極性組分最後流出，出峰順序：極性->弱極性->非極性，反相色譜因其與組分無強烈作用，組分不會長時間滯留污染柱子，且反相色譜用水做底溶劑，摻入其他弱極性、非極性溶劑如乙腈等有機物改變流動相極性達到分離目的，水的紫外吸收遏制波長低，不會干擾檢測，且水易得便宜
還有要注意的點：大量物質中分離雜質應先讓含量小的雜質先流出，如果讓量大的組分先流出會拖尾導致雜質分離不純
GC氣相色譜沒什麼說的，原理類似，主要就是保留時間、峰高峰寬、校正因子
毛細管電泳，一般毛細管壁修飾成帶負電，電滲流速率大於電泳速率，正負離子、中性分子均向陰極移動，檢出順序：正離子->中性分子->負離子

㈦ 洗脫液的選擇

這個具體問題估計得具體分析，效果怎麼樣估計只有實驗之後才知道。洗脫效果與極性的關系估計也不是直接相關的。

㈧ 離子交換時常用的洗脫方式有哪些

再生劑置換再生

㈨ 液相色譜法中應該怎麼解釋組分的洗脫順序

使用高效液相色譜儀進行分析時，常用兩種洗脫方式，一種為等度洗脫，另一種為梯度洗脫。

用等度洗脫進行色譜分離時，由不同溶劑構成的流動相的組成，如流動相的極性、離子強度、pH值等，在分離的全過程中皆保持不變。用梯度洗脫進行色譜分離時，在洗脫過程中含2種或兩種以上不同極性溶劑的流動相組成會連續或間歇地改變，其間可調節流動相的極性，改善樣品中各組分間的分離度。

使用梯度洗脫時，也會使干擾分離的強保留雜質組分在較短的時間內從柱中清楚，使色譜柱保持干凈狀態，以進行下一次的分析。梯度洗脫一般是指流動相的組成隨分析時間的延長呈現線性變化，即線性梯度洗脫，可用於反相和正相高效液相色譜儀及離子對色譜法。

(9)洗脫常用方法擴展閱讀：

注意事項：

1、流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。

2、流動相過濾後要用超聲波脫氣，脫氣後應該恢復到室溫後使用。

3、不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

4、使用緩沖溶液時，做完樣品後應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然後用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鍾以上，以充分洗去離子。對於柱塞桿外部，做完樣品後也必須用去離子水沖洗20mL以上。

㈩ 常用溶劑的洗脫能力如何排序

一般情況下，各種溶劑在聚醯胺柱上的洗脫能力由弱致強的大致順序如下： 水—甲醇—乙醇—氫氧化鈉水溶液—甲醯胺—二甲基甲醯胺—尿素水溶液 大孔吸附樹脂： 大孔吸附樹脂一般為白色球形顆粒，通常分為極性和非極性兩類。