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固定化酵母菌常用方法名稱

發布時間:2024-09-23 17:28:12

⑴ 固定化酵母菌的操作過程

1、首先准備海鹽酸納、酵母以及氯化鈉溶液以及一支注射管。

⑵ 固定化酵母菌的操作過程

大概的回憶,沒有數據
海藻酸鈉固定酵母細胞
一、准備
1.對於要用到的酵母前一天活化。(!)
2.用到的針筒、燒杯、玻棒等,事先滅菌。
二、操作
1.配海藻酸鈉,稱量,溶解,小火持續(!),或大火間斷(!)。
2.配氯化鈣溶液。
3.冷卻至略溫(!)(摸摸杯壁可知),加入活化的酵母液,攪拌。
4.用去掉針頭的針筒吸。稀的海藻酸鈉要加針頭注射,濃的不用。
5.在離液面十來公分注射。
6.靜置一段時間。(!)
三、結果
1.把海藻酸鈉小球取出,蒸餾水反復沖洗。(!)
2.把小球放在葡萄糖溶液中,觀察結果。
以下是網上的資料
《酵母細胞的固定化》教學設計
XX第一中學
XXX
20XX年X月XX日
XX:XX
一、實驗原理
固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或者細胞固定在一定空間的技術,包括包埋法,化學結合法(將酶分子或細胞相互結合,或將其結合到載體上)和物理吸附法固定化,細胞多採用包埋法固定化。因為細胞個大,而酶分子很小,個大的細胞難以被吸附或結合,而個小的酶容易從包埋材料中露出。
常用的包埋載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維和聚丙烯醯胺等。本實驗選用海藻酸鈉作為載體包埋酵母菌細胞。
二、實驗目的
1.了解細胞固定化的原理;
2.掌握酵母細胞固定化實驗操作。
三、儀器與用具
水浴鍋,20ml注射器,燒杯,三角瓶,玻璃棒,酵母懸液,海藻酸鈉,無水氯化鈣,葡萄糖
三、試劑配製
CaCl2溶液:稱取0.83g無水氯化鈣加150ml水溶解待用;
海藻酸鈉溶液:稱取0.7g海藻酸鈉加入10ml水加熱溶液成糊狀;
10%葡萄糖溶液:稱取15g葡萄糖溶液溶於150ml水中。
四、實驗方法與步驟
1.海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合:將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已經活化的酵母細胞,用玻璃棒充分攪拌混合均勻。
2.固定化酵母細胞:用20ml注射器吸取海藻酸鈉與酵母細胞混合液,在恆定的高度(建議距液面12~15cm處,過低凝膠珠形狀不規則,過高液體容易飛濺),緩慢將混合液滴加到CaCl2中,觀察液滴在CaCl2溶液中形成凝膠珠的情形。將凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min
左右使其充分固定。
3.固定化酵母細胞發酵:用5ml移液器吸取蒸餾水沖洗固定好的凝膠珠2~3次,然後加入裝有150ml10%葡萄糖溶液的三角瓶中,置於25℃發酵24h,觀察結果。
實驗開始時,凝膠球是沉在燒杯底部,24h後,凝膠球浮在溶液懸浮在上層,而且可以觀察到凝膠球並不斷產生氣泡,說明固定化的酵母細胞正在利用溶液中的葡萄糖產生酒精和二氧化碳,結果凝膠球內包含的二氧化碳氣泡使凝膠球懸浮於溶液上層。

⑶ 固定化細胞的固定化原理及方法

細胞的種類多種多樣,大小和特性個不相同,故此細胞固定化的方法有很多種。歸結起來,主要可以分為吸附法和包埋法兩大類。 吸附法 利用各種吸附劑,將細胞吸附在其表面而使細胞固定的方法稱為吸附法。
用於細胞固定化的吸附劑主要有硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料、金屬絲網、微載體、和中空纖維等。
酵母細胞帶有負電荷,在pH3~5的條件下能夠吸附在多空陶瓷、多空塑料等載體的表面,製成固定化細胞,用於酒精和啤酒等的發酵生產;在環境保護領域內使用的活性污泥中含有各種各樣的微生物,這些微生物可以沉積吸附在硅藻土、多孔玻璃、多孔陶瓷、多空塑料等載體的表面,用於各種有機廢水的處理,降低廢水中的化學需氧量(COD)和生化需氧量(BOD);各種黴菌會長出菌絲體,這些菌絲體可以吸附纏繞在多空塑料、金屬絲網等載體上用於生產有機酸和酶等;植物細胞可吸附在中空纖維外壁,用於生產色素、香精、葯物和酶等次級代謝產物;動物細胞大多屬於貼壁細胞,必需依附在固體表面才能正常生長,故可吸附在容器壁、微載體、中空纖維外壁等載體上,製成固定化細胞,用於各種蛋白質的生產。
2.包埋法
將細胞包埋在多空載體內部而製成固定化細胞的方法稱為包埋法。包埋法可分為凝膠包埋法和半透膜包埋法。
凝膠包埋法是應用最廣泛的細胞固定方法。

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