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對細菌技術常用的方法是

發布時間:2024-05-28 03:54:55

⑴ 細菌培養的方法有哪些

根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法三種。

1、一般培養法:將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18-24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長。少數生長緩慢的細菌,需培養3-7天直至一個月才能生長。

為使培養箱內保持一定濕度,可在其內放置一杯水。培養時間較長的培養基,接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固,以防培養基乾裂。

2、二氧化碳培養法:某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格。將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,

3、厭氧培養法:常用的厭氧培養方法有厭氧罐法、氣袋法及厭氧箱三種。


(1)對細菌技術常用的方法是擴展閱讀:

培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基,制定培養條件(溫度、pH值、時間,對氧的需求與否等)。

一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上,做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。

一般細菌可在有氧條件下,37℃中放18~24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2~3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。

通過日常管理、檢測、檢查,了解光合細菌的生長情況,就可以結合當時環境條件的變化進行分析,找出影響光合細菌生長繁殖的原因,採取相應的措施。影響光合細菌生長的原因很多,內因是菌種是否優良,外因是光照、溫度、營養、敵害和厭氣程度等。

溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長,而且溫度、光照和pH值之間是互相制約的,溫度與光照的強弱是對立統一的,所以光合細菌生長的最適條件應是互應的,即溫度高,光照應弱;溫度低,光照應強。

如果是溫度高,光照強,pH值就會迅速升高,培養基產生沉澱,抑制光台細菌的生長;如果溫度低,光照弱,光合細菌得不到最佳能源,生長速度也慢。經試驗得出光合細菌生長的最適條件是:

①溫度15~20℃時,光照30000~50000lx,培養基pH值為7.0;

②溫度25~30℃時,光照為3000~5000lx,培養基的pH值為7.0。

⑵ 接種細菌的三種方法各有什麼用途

接種細菌的方法各有什麼用途:

1、平面接種法:此方法主要用於鑒定或保存菌種,或觀察細菌的某些生化特性和動力。

2、菌落分純法:此方法主要用於分離瓊脂平板上的混合菌。

3、液體培養基接種法:此方法可用於比濁試驗中。

4、平板劃線接種法(又稱分離培養法):平板劃線接種法為最常用的分離培養細菌的方法,通過平板劃線後,可使細菌分散生長,形成單個菌落,有利於從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法比較多,其中以分區劃線發育曲線劃線法較為重用。其目的都要時細菌呈現單個菌落生長,便於同雜菌菌落鑒別。

5、純培養細菌接種法:用於培養保存菌種及其實驗用。

6、半固體培養基穿刺培養法:用於保存菌種及間接觀察細菌之動力(無動力之細菌僅沿穿刺線生長,清晰可見;有動力的細菌使培養基呈現渾濁樣,穿刺線甚至難以看出。)

接種注意事項:

1、在超凈工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等。

2、應在酒精燈火焰前操作。

3、取菌種前灼燒接種針或接種環(要燒紅)。

4、燒紅的接種針(環)少使冷卻在取菌種,以免燒死菌種。

5、接種後應盡快塞上面塞。

⑶ 簡述臨床常用的細菌檢驗技術

細菌的培養和分離技術微生物分離鑒定流程第一節 細菌的形態學檢查工具:顯微鏡顯微鏡檢查的目的:1.鏡檢可以了解標本中有無細菌及大致的菌量2.根據細菌形態、排列和染色性有助於對標本中的病原菌進行初步診斷,對臨床早期診斷和治療疾病有一定的參考意義方法:包括不染色標本檢查法和染色標本檢查法常用的顯微鏡(1)普通光學顯微鏡(light microscope)光源:自然光或燈光,波長0.4μm最大解析度:0.2μm(2)暗視野顯微鏡(darkfield microscope)(3)相差顯微鏡(phase contrast microscope)(4)熒光顯微鏡(fluorescence microscope)(5)電子顯微鏡(electron microscope)返回普通光學顯微鏡一、不染色標本直接鏡檢目的:主要用於檢查生活狀態下細菌的動力及運動狀況。常用的方法:懸滴法和壓滴法 懸滴法檢查細菌的動力不染色標本鏡下結果觀察:動力(+),動力(-)觀察時注意:用普通光學顯微鏡高倍鏡觀察,調小顯微鏡的光柵。有動力:可看到細菌自一處移至另一處,有明顯的方向性位移。無動力:細菌呈現布朗運動,只在原地顫動而無位置的改變。 意義:有些病原菌通過不染色標本的動力檢查可作出初步鑒定: 如疑似霍亂患者「米泔水樣」便中發現穿梭樣運動細菌,可輔助診斷。 螺旋體輔助診斷二、染色標本的顯微鏡檢查(一)常用染料(色基+助色基)1.鹼性染料:鹼性復紅、結晶紫、美藍等, 電離後帶正電荷,常用於細菌染色(原因何在?)。2.酸性染料:有伊紅、剛果紅等,電離後帶負電荷。3.復合染料(中性染料):復合染料有瑞氏染料(伊紅美藍)、姬姆薩染料(伊紅天青)等 。

⑷ 細菌學有哪些檢驗方法

直接塗片檢查:取混勻新鮮尿塗片,健康人的尿塗片無細菌。若每個油鏡視野下可見1條或以上的細菌,提示為菌尿。並可行革蘭氏染色,初步確定尿路感染細菌是陽性球菌或陰性桿菌。細菌培養:目前多採用定量接種環法,培養24h,計數菌落。陰性桿菌分裂快,菌落數>l〇5cfo/ml,提示菌尿,菌落數104〜105cfo/ml為可疑。陽性球菌分裂慢,菌落數>103cfU/ml為菌尿。結核菌檢查:尿結核菌檢查是確定有無泌尿系結核的重要方法,尿沉渣塗片抗酸染色較簡單,陽性率為50%〜70%;清晨第1次尿送檢則陽性率高。尿結核菌培養陽性率可達90%,但結核菌生長緩慢。使用改良羅氏培養基,一般需4〜8周始能報告結果。近年常用聚合酶鏈反應(PCR)方法,使含微量結核菌DNA擴增,40條結核菌即可有陽性結果,此法特異性強,2d可有結果,但時有假陽性或假陰性的情況。菌尿的輔助檢查亞硝酸鹽試驗:革蘭陰性桿菌如大腸、副大腸桿菌能將尿中的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,而球菌和結核菌無還原硝酸鹽的能力,因此亞硝酸鹽試驗陽性,提示革蘭陰性桿菌的感染。氯化三苯四氮唑試驗(TTC試驗);大部分革蘭陰性活桿菌能將無色TTC還原為紅色的三苯甲替,而球菌及變形桿菌則呈陰性。故可用以初步判定是哪一類細菌感染。尿抗體包裹細菌(ACB):腎盂腎炎為腎實質感染,在細菌抗原作用下,機體可產生相應抗體,抗體將致病菌包裹,在熒光鏡下觀察用熒光素標記的抗人體蛋白抗體處理的尿細菌,若表面有熒光抗體包裹則大多屬腎盂腎炎,膀胱炎為黏膜淺表感染,故細菌表面無熒光抗體包裹。用ACB法有助於上、下尿路感染的定位診斷。但在前列腺炎患者,其ACB試驗亦呈陽性,應注意鑒別。其他:另外還有過氧化物酶試驗、葡萄糖氧化酶試驗、鱟試驗及尿氧壓測定均可幫助診斷尿路感染,但目前臨床上應用較少。

⑸ 微生物的幾種滅菌方法

不過由於中國的原奶質量差,所以許多企業的巴氏滅菌法都採用85-90度,甚至更高,以殺滅原奶中的大量微生物群落。這兩年還出現了所謂的「超巴」滅菌的工藝

⑹ 微生物學實驗常用的滅菌方法有哪些

一般分為濕熱滅菌法和乾熱滅菌法兩種。

一、濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法,由於蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,所以該法的滅菌效率比乾熱滅菌法高,是最常用的滅菌方法。濕熱滅菌法可分為:煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法。

(1)煮沸滅菌法:將水煮沸至100攝氏度,保持5-10分鍾可殺死細菌繁殖體,保持1-3小時可殺死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氫鈉時沸點可達105攝氏度,能增強殺菌作用,還可去污防銹。此法適用於食具、刀箭、載玻片及注射器等。

(2)巴氏消毒法:一種低溫消毒法,因巴斯德首創而得名。有兩種具體方法,一是低溫維持法:62攝氏度維持30分鍾;二是高溫瞬時法:75攝氏度作用15-30秒。該法適用於食品的消毒。

(3)流通蒸氣滅菌法:利用常壓下的流通蒸汽進行滅菌。

(4)間歇蒸汽滅菌法

(5)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3攝氏度,維持15-20分鍾。

二、乾熱滅菌法是指在乾燥環境(如火焰或乾熱空氣)進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。

(1)火焰滅菌法:是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便,適合於耐火焰材料(如金屬、玻璃及瓷器等)物品與用具的滅菌,不適合葯品的滅菌。

(2)乾熱空氣滅菌法:是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。該法適用於耐高溫的玻璃和金屬製品以及不允許濕熱氣體穿透的油脂(如油性軟膏機制、注射用油等)和耐高溫的粉末化學葯品的滅菌,不適合橡膠、塑料及大部分葯品的滅菌。

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