常用農葯毒力表示方法

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㈢ 殺線蟲劑的毒力測定方法有哪些

植物線蟲病害在世界范圍內廣為為害，並嚴重威脅農業生產。目前防治線蟲病害的農葯品種少、毒性高、用量大，且主要依賴進口，因此，測定創制化合物的殺線蟲活性是發現優秀殺線蟲劑的關鍵。現在的一般篩選方法是用活體篩選。一般步驟是：

（一）供試線蟲的選擇

供試植物線蟲需滿足易培養，繁殖量大，生活史短。其中，根結線蟲屬的線蟲較為符合要求。

（二）線蟲的純培養

以根結線蟲為例，首先須對線蟲的寄主植物如番茄進行無菌土栽培，使用無土栽培或滅菌土澆灌無菌苗，然後在田間選取有根結的病株，輕輕洗根至無泥土，用線蟲挑針挑取單卵塊，置0.1%的瓊蠟三甲溴化銨（cetavlon）溶液中，將卵消毒，用無菌水漂洗，再浸在0.5%的雙對氯苯基雙胍基己烷雙醋酸鹽（hibitanediacetate）溶液中消毒，再用蒸餾水漂洗干凈。放在孵化器中進行培養，每24h用毛筆蘸取卵塊，用貝曼漏鬥法（baermannfunnel）或離心漂浮分離法（centrifugalfloatation）於25℃孵化，收集根結線蟲的2齡幼蟲。

（三）供試葯劑活性測定

1．離體篩選

（1）觸殺法：大致步驟如下：供試線蟲放入已配製好的葯液中，經24h或48h處理後，在顯微鏡下檢查線蟲死活和被擊倒的情況，計算毒力。

線蟲死活鑒別一般採用體態法及染色法。體態法的判斷標準是死的蟲體多呈僵直狀態，而活的體態是幾度彎曲，一般盤卷和蠕動。但這種方法對呈休眠態和體形膨大的雌蟲以及卵不適用，且不能絕對肯定線蟲的不動就等於死亡，而彎曲的線蟲等於生存。染色法是用曙紅等染料對供試葯劑處理過的線蟲進行染色，活線蟲不會被染色，死線蟲會被染料染上顏色，根據線蟲是否被染色，很容易判斷線蟲的死亡與否。用此方法對水稻潛根線蟲（Hirschmanniellaspp.）、松材線蟲（Bursaphelenchusxylophilus）等線蟲效果都比較好。

（2）熏蒸法：該方法是測定供試葯劑是否具有熏蒸作用。其方法與殺蟲劑葯物篩選類似，即將供試化合物和線蟲放入封口的容器內，處理24h或48h，觀察線蟲死活情況。

2．盆栽試驗

（1）土壤淋浴法：這是一種兼觸殺和內吸活性測定的方法。基本程序是受試植物種植在小缽內，待幼苗長至3～5cm高，用配製好的葯液淋土，第2d接種2齡幼蟲，每小缽約500頭。待空白對照根部感病症狀明顯（約20d）後進行調查。目測感病程度或設計「病情指數」進行計算，確定葯效。

（2）葉面噴霧法：此方法是一種測定葯物是否具葉面內吸性及是否具有向下輸導特性的方法。基本程序於土壤淋浴法相似，只是施葯時控制范圍只限制在葉面。

另外，由於許多殺線蟲劑的作用機理與結構類似的殺蟲劑相同，如有機磷類和氨基甲酸酯類殺線蟲劑的作用機理是抑制線蟲體內的乙醯膽鹼酯酶（AChE），因而對供試化合物採用酶抑製法，測試殺線蟲活性有一定的理論依據。

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