常用蛋白質沉澱的方法是

❶ 沉澱蛋白質的方法五種

蛋白質從溶液中析出的現象，稱為蛋白質的沉澱。蛋白質沉澱常用的方法有鹽析法、等電點沉澱法伏碧輪、有機溶劑沉澱法、重金屬鹽沉澱法、生物鹼試劑與某些酸（如三氯醋酸）沉澱等。

鹽析法

在蛋白質溶液中加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽，破壞蛋白質的水化膜和中和電荷，使蛋白質顆粒相互聚集，發生沉澱。

等電點沉澱

等電點沉慧旁淀法是利用蛋白質在等電點時溶解度最低而各種蛋白質又具有不同等電點的特點進行分離的方法。

有機溶劑沉澱

有機溶劑能降‎低溶液的電解‎常數，從而增加蛋白‎缺信質分子上不同‎電荷的引力，導致溶解度的‎降低；另外，有機溶劑與水‎的作用，能破壞蛋白質‎的水化膜，故蛋白質在一‎定濃度的有機‎溶劑中的溶解‎度差異而分離‎的方法稱有機溶劑分段‎沉澱法。常用於蛋白‎質或酶的提純‎。使用的有機溶‎劑多為乙醇和‎丙酮。

重金屬鹽沉澱法

其原理是重金屬鹽可與蛋白質形成不溶於水的蛋白鹽沉澱，從達到沉澱蛋白質的目的。

生物鹼試劑/酸沉澱

蛋白質又可與生物鹼試劑以及某些酸結合成不溶性的鹽沉澱，沉澱的條件應當是pH小於等電點，這樣蛋白質帶正電荷易於與酸根負離子結合成鹽。

❷ 沉澱蛋白質的方法有哪些，各有和特點

等電點沉澱法和鹽析

一、等電點沉澱法

等電點沉澱法是利用蛋白質在等電點時溶解度最低而各種蛋白質又具有不同等電點的特點進行分離的方法。

在等電點時，蛋白質分子以兩性離子形式存在，其分子凈電荷為零(即正負電荷相等)，此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉澱，所以蛋白質在等電點時，其溶解度最小，最易形成沉澱物。

等電點時的許多物理性質如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小，從而有利於懸浮液的過濾。

二、鹽析

鹽析是指在蛋白質水溶液中加入中性鹽，隨著鹽濃度增大而使蛋白質沉澱出來的現象。中性鹽是強電解質，溶解度又大，在蛋白質溶液中，一方面與蛋白質爭奪水分子，破壞蛋白質膠體顆粒表面的水膜；另一方面又大量中和蛋白質顆粒上的電荷，從而使水中蛋白質顆粒積聚而沉澱析出。

向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液後，可以降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析，是物理變化，可復原。向某些蛋白質溶液中加入某些重金屬鹽，可以使蛋白質性質發生改變而凝聚，進而從溶液中析出，這種作用叫作變性，性質改變，是化學反應，無法復原。

把動物脂肪或植物油與氫氧化鈉按一定比例放在皂化鍋內攪拌加熱，反應後形成的高級脂肪酸鈉、甘油、水形成混合物（膠體）。往鍋內加入食鹽顆粒，攪拌、靜置，使高級脂肪酸鈉與甘油、水分離，浮在液面。

(2)常用蛋白質沉澱的方法是擴展閱讀：

蛋白質的變性

1、物理因素包括：加熱、加壓、攪拌、振盪、紫外線照射、X射線、超聲波等

2、化學因素包括：強酸、強鹼、重金屬鹽、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。

3、在熱、酸、鹼、重金屬鹽、紫外線等作作用下，蛋白質會發生性質上的改變而凝結起來。這種凝結是不可逆的，不能再使它們恢復成原來的蛋白質．蛋白質的這種變化叫做變性。蛋白質變性之後，紫外吸收，化學活性以及粘度都會上升，變得容易水解，但溶解度會下降。

4、蛋白質變性後，就失去了原有的可溶性，也就失去了它們生理上的作用，因此蛋白質的變性凝固是個不可逆過程。

❸ 請問使蛋白質沉澱的方法有幾種

1、鹽析法：多用於各種蛋白質和酶的分離純化，不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同，所以可通過調節鹽濃度將目的蛋白沉澱析出。

2、等電點沉澱法：不同蛋白質的等電點不同，可用等電點沉澱法使它們相互分離。

3、有機溶劑沉澱法：多用於生物小舉廳分子、多糖及核酸產品的分離純正搜隱化，中性有機溶劑如乙醇、丙酮，它們的介電常數比水低。能使大多數球狀蛋白質在水溶液中的溶解度降低，進而從溶液中沉澱出來，因此可用來沉漏蘆淀蛋白質。

❹ 沉澱蛋白質的方法有哪些，各有和特點

沉澱蛋白質的方法有哪些？各有何特點？
答：（1）鹽析法，此方法並未破壞蛋白質天然狀態，沉澱出的蛋白質可不變性，所以鹽析法是分離制備蛋白質或蛋白類生物制劑的常用方法。
（2）有機溶劑沉澱法，通過破壞蛋白質的水化膜而使蛋白質沉澱，此方法在常溫下可使蛋白質變性，低溫下可使變性速度減慢。
（3）重金屬鹽沉澱法，可與蛋白質結合形成不溶於水的蛋白質鹽沉澱，引起蛋白質變性。臨床用於救重金屬鹽中毒。

❺ 蛋白質沉澱的方法有那些，各有什麼特點

沉澱蛋白質的方法主要有：鹽析、有機溶劑、生物鹼試劑、重金屬鹽、加熱凝固。
分析如下：
（1）鹽析破壞蛋白質的水化膜和電荷，採用不同濃度鹽可將不同的蛋白質分段析出，鹽析的蛋白質不變性，鹽析作用是可逆的。（2）有機溶劑可破壞蛋白質的水化膜，若調節pH=pI，則更易沉澱。低溫操作，快速分離溶劑不會使蛋白質變性，而常溫操作，蛋白質易變性。（3）沉澱生物鹼試劑：鎢酸、三氯乙酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質結合沉澱，會使蛋白質變性。（4）重金屬離子可與帶負電荷的蛋白質結合沉澱，會使蛋白質變性。（5）在等電點加熱蛋白質可形成凝塊沉澱，會使蛋白質變性。

❻ 沉澱蛋白質的幾種方法及應用實例

1.鹽析法——多用於各種蛋白質和酶的分離純化
在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出,這種方法稱為鹽析.常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等.各種蛋白質鹽析時所需的鹽濃度及pH不同,故可用於對混和蛋白質組分的分離.例如用半飽和的硫酸銨來沉澱出血清中的球蛋白,飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉澱出來,鹽析沉澱的蛋白質,經透析除鹽,仍保證蛋白質的活性.調節蛋白質溶液的pH至等電點後,再用鹽析法則蛋白質沉澱的效果更好.鹽析法分為兩類,第一類叫Ks分段鹽析法,在一定PH和溫度下通過改變離子強度實現,用於早期的粗提液；第二種叫b分段鹽析法,在一定離子強度下通過改變PH和溫度來實現,用於後期進一步分離純化和結晶.影響鹽析的因素包括：蛋白質濃度、離子強度和類型、PH值、溫度等.針對溫度這一條,需要強調：在低離子強度或純水中,蛋白質溶解度在一定范圍內隨溫度增加而增加.但在高濃度下,蛋白質、酶和多肽類物質的溶解度隨溫度上升而下降.在一般情況下,蛋白質對鹽析溫度無特殊要求,可在室溫下進行,只有某些對溫度比較敏感的酶要求在0-4℃進行.
使用硫酸銨沉澱蛋白需要注意：硫酸銨中常含有少量的重金屬離子,對蛋白質巰基有敏感作用,使用前必須用H2S處理：將硫酸銨配成濃溶液,通入H2S飽和,放置過夜,用濾紙除去重金屬離子,濃縮結晶,100℃烘乾後使用.另外,高濃度的硫酸銨溶液一般呈酸性(PH=5.0左右),使用前也需要用氨水或硫酸調節至所需PH.
2.有機溶劑沉澱法——多用於生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化；
有機溶劑的沉澱機理是降低水的介電常數,導致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,最後析出.該法優點在於：1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉澱；2)沉澱不用脫鹽,過濾較為容易；3)在生化制備中應用比鹽析法廣泛.但是,在常溫下,有機溶劑沉澱蛋白質往往引起變性.例如酒精消毒滅菌就是如此.因此,操作要求在低溫下進行.有機溶劑的選擇首先是能和水混溶,使用較多的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮,還有二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等.
3.等電點沉澱法——此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用；
兩性電解質分子上的凈電荷為零時溶解度最低,不同的兩性電解質具有不同的等電點,以此為基礎可進行分離.如工業上生產胰島素時,在粗提液中先調PH8.0去除鹼性蛋白質,再調PH3.0去除酸性蛋白質.利用等電點除雜蛋白時必須了解制備物對酸鹼的穩定性,不然盲目使用十分危險.不少蛋白質與金屬離子結合後,等電點會發生偏移,故溶液中含有金屬離子時,必須注意調整PH值.等電點法常與鹽析法、有機溶劑沉澱法或其他沉澱方法聯合使用,以提高其沉澱能力.
很全面實用的答案,

❼ 有哪些沉澱方法可以純化蛋白質多寫幾種

1、等電點沉澱空基法纖嘩.蛋白在其等電點位置溶解度最低,因而易於沉澱出來.
2、鹽析法.根據蛋白在不同濃毀虧行度的鹽溶液中溶解度不同,進行蛋白分離純化.
3、有機溶劑沉澱法.如乙醇、丙酮能使大多數球狀蛋白在水溶液中的溶解度降低,使得蛋白從溶液中沉澱出來.

❽ 請問使蛋白質沉澱的方法有幾種

使蛋白質沉澱的方法有3種。

1、鹽析法

在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出，這種方法稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等。例如用半飽和的硫酸銨來沉澱出血清中的球蛋白，飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉澱出來，鹽析沉澱的蛋白質，經透析除鹽，仍保證蛋白質的活性。

2、重金屬鹽沉澱蛋白質

蛋白質可以與重金屬離子如汞、鉛、銅、銀等結合成鹽沉澱。重金屬沉澱的蛋白質常是變性的，但若在低溫條件下，並控制重金屬離子濃度，也可用於分離制備不變性的蛋白質。如臨床上利用蛋白質能與重金屬鹽結合的這種性質，搶救誤服重金屬鹽中毒的病人，給病人口服大量蛋白質，然後用催吐劑將結合的重金屬鹽嘔吐出來解毒。

3、生物鹼試劑以及某些酸類沉澱蛋白質

蛋白質又可與生物鹼試劑（如苦味酸、鎢酸、鞣酸）以及某些酸（如三氯醋酸、過氯酸、硝酸）結合成不溶性的鹽沉澱。如臨床血液化學分析時常利用此原理除去血液中的蛋白質，此類沉澱反應也可用於檢驗尿中蛋白質。

(8)常用蛋白質沉澱的方法是擴展閱讀：

蛋白質的沉澱可分為兩類：

1、可逆的沉澱反應：蛋白質分子的結構尚未發生顯著變化，除去引起沉澱的因素後，蛋白質的沉澱仍能溶解於原來的溶劑中，並保持其天然性質而不變性。如大多數蛋白質的鹽析作用或低溫下用乙醇（或丙酮）短時間作用於蛋白質。

2、不可逆的沉澱反應：蛋白質分子內部結構發生重大改變，蛋白質常變性而沉澱，不再溶於原來溶劑中。如加熱引起的蛋白質沉澱與凝固，蛋白質與重金屬離子或某些有機酸的反應。