濕液動物標記常用的方法是

㈠ 請教:飼料用的動物油脂鑒別的指標和測定方法有哪些

飼用油為高能量飼料。由於價格高，市場上的飼用油摻假現象嚴重。被檢出的摻假物主要有水，溶點較高的動物油中還檢出麵粉和食鹽。下面先就通用的感官簡易判定油脂是否摻假的的方法進行簡單介紹，再對飼料中常用的油脂進行逐一介紹。
（一） 油脂的檢測項目
1、總脂肪酸
此系包括游離脂肪酸及與甘油結合之脂肪酸總量。動物性或植物性油脂其量通常為92%—94%。油脂能量大部分系由脂肪酸供應，因此總脂肪酸量為能量值之指標。
2、游離脂肪酸
脂肪分解後會產生游離脂肪酸，故其量可做為鮮度判斷之根據，完全飼料所用油脂一般約在15%—35%。在營養上而言，游離脂肪酸對動物無害，但太高的游離脂肪酸（50%以上）表示油脂原料不好，對金屬機械、器具有形蝕性，而且會降低嗜口性。
3、水分
油脂中含有水分，不但引起加工設備的腐蝕，同時易使油脂起水解作用產生游離脂肪酸，加速脂肪之酸敗，並降低脂肪之能量含量。
4、不溶物或雜質
包括纖維質、毛、皮/骨、金屬、砂土等細小顆粒無法溶解於石油醚之物質。這些物質沒有能量價值，而且會阻塞篩網和管口，或在貯存椅造成沉積。其量應限制在0.5以下。
5、不可皂化物
包括白酶類、碳氫化合物、色素、脂肪醇、維生素等不與鹼發生皂化反應之物質，大部分成分仍有飼用價值，對動物無不良影響，但其中蠟、焦油等則無營養價值，甚至有些成分對動物有害，如水腫因子。
6、酸價
酸價雖測定容易，但通常不能單純以之評價油脂品質，須配合其他方法供簽定。油脂酸價之提高，部分由於油脂水解而生成游離脂肪酸，部分由於過氧化物的分解所產生羥基化合物再氧化而生游離脂肪酸，因此游離脂肪酸生成機構隨條件而異，不易做為油脂氧化程度的判斷指標。
7、過氧化價
羰氧化物系在油脂氧化過程中生成，該過氧化價可做氧化程度判斷。但過氧化物在水中的存在或高濕下甚易分解，因此油脂氧化至某一程度後，過氧化價反而會降低。因此我們應了解，過氧化價==所存在過氧化物量與分解量之差，故需配合其他氧化測定方法，以利品質之正確判斷。
8、羰基化合物
測定油脂中經酸敗而產生的羰基化合物含量，亦為判斷油脂氧化程度的一種方法。
9、TBA試驗（硫代巴比妥酸試驗），一般要求不大於2。
通常TBA與上述油脂氧化生成物作用而呈紅色，於530毫米下測吸光度，可供酸敗程度之鑒定。TBA試驗可測出丙二醛（Malonaldehede）含量，丙二醛乃油脂氧化過程中第二階段產物，故本試驗無法測出初期氧化變化，加之丙二醛本身亦不穩定，可再氧化變成丙二酸（Malonicacid）人造成氧化與否之誤判。
10、Kreis試驗
此為醛類及酮類化合物之簡便呈色反應，可做油脂氧化變質與否之定性反應。
11、AOM（活性氧法，Active Oxygenmethod）
系將油脂保持一定高溫而通入定量空氣以促進氧化而評價。油脂之穩定性以過氧化價達到某一定值所需時間來表示，不同種類油脂有不同過氧化物標准，通常對植物性油脂之過氧化物標准為100meg/千克；對動物性油脂則為20meg/千克（如豬油），並以不超過20小時為飼料級油脂規格。由於AOM測定系採用光電比色法，對某些顏色較深之飼料級油脂而言，其有效性雖有待商榷，但仍不失為最佳之方法。
12、安全性及其他
農葯、多氯聯苯、殺蟲劑、氯戴奧興及其他具毒性物質均可能移行油脂中，為防止可能之中毒，應行李一伯二氏（Liberman Buchard）反應及Hdphen反應及其他試驗檢出。
（二）油脂的鑒別
1、不同油脂其物理特性亦不同
故可由粘度、折光率、色澤、碘價、皂化價、溶解性、比重、融點、沸點等鑒別油脂是否純品。
2、動植物油脂之鑒別
動植物油脂之鑒別是基於其所含特徵成分，如動物性油含膽固醇（Cholesterlo）而植物性油則為植物固醇（Phytosterol）。致動物性油脂的不皂化物中含有膽固醇，而植物性油脂的不皂化物中則含有植物固醇。由其定性可認定動植物油之區分。
3、魚油鑒別
魚油含有高度不飽和脂肪酸，經氧化反應所生之乙醚不溶性之氧化物通常不溶於熱苯，而亞麻酸所生成之乙醚不溶性多六氧化物可溶於熱苯。
4、硬化油之鑒別
硬化油通常含有微量觸媒（如鎳人又因氫化而產生異油酸（Isl-Oleic acid）。可由這些物質的存在與否而判別之。
5、豬油中含牛油之鑒別
豬油與牛油之Boemer數值不同，可由其測定值辨別之，通常純豬油的值為73.4-78.1℃；牛油為62.8-67.1℃，豬油+10%牛油為67.7-75.4℃，豬油加20%牛油為65.3-73.9℃。
6、礦物油鑒別
通常礦物油比重為0.84-0.93，碘價6-12，折光率1.490-1.507，不溶於酒精，可利用油脂中不皂化物之比重、碘價、對酒精溶解度等做鑒別之依據。
7、石蠟烴的鑒別
本品乃石油中抽出廢棄之碳氫化合物，秤取樣品1.43克，置試管（具0.1毫米刻度，長15厘米，內徑10毫米），加入甘油二氯醇7毫米及水1.2毫米，於65℃加熱振盪後靜置10分鍾（65℃），然後測其不溶解部分之容積即可判別石蠟羥之存在，其容量0.1毫米約等於5%石蠟羥。
（三）油脂酸價的檢驗
測定原理：用中性乙醇和乙酸混合溶劑溶解油樣，然後用鹼標准溶液滴定其中的游離脂肪酸，根據油樣質量和消耗鹼液的量計算出油脂酸價。
用到的儀器有：滴定管：25毫升；三角瓶：250毫升；天平：感量0.001克；容量瓶、移液管、稱量瓶、試劑瓶等。
用到的試劑有：0.1摩爾/升氫氧化鉀（或氫氧化納）標准溶液；中性乙醚：乙醇（2：1）混合溶劑：臨用前用0.1摩爾/升鹼液滴定至中性。
具體操作步驟：稱取混勻試樣3—5克，注入錐形瓶中，加入混合溶劑50毫升，搖動使試樣溶解，再加三滴酚酞指示劑，用0.1摩爾/升鹼液滴定至出現微紅色在30秒不消失，記錄下消耗的鹼液毫升數。
計算結果 酸價（毫克KOH/克油）=V×C×56.1/m。
式中：V—滴定消耗的氫氧化鉀溶液體積，毫升；C—氫氧化鉀溶液濃度，摩爾/升；m—試樣質量，克；56.1—每毫升1摩爾/升鹼液相當於氫氧化鉀的質量56.1毫克。
雙試驗結果允許差不超過0.2克KOH/升油，求其平均數，即為測定結果。測定結果小數點後保留一位有效數字。

（四）油脂的通用感官檢測法
1、氣味檢查
要注意是否酸敗，即有無哈喇味：①盛裝油脂的容器開口的瞬間用鼻子挨近容器口，聞其氣味；②取1—2滴油樣放在手掌或手背上，雙手合攏快速摩擦至發熱聞其氣味；③用鋼精勺取油樣25克左右，加熱到50℃上下聞其氣味。
2、滋味檢查
每種油脂都有其固定的獨特滋味。通過滋味的鑒別可以知道油脂的種類，品質的好壞，酸敗程度，能否使用等。用嘴嘗試油脂，不正常的變質油脂會帶有酸、苦、辛辣等滋味和焦苦味，質量好的油脂則沒有異味。方法是用玻璃棒取少許油樣，點塗在已漱過口的舌頭上，辨其滋味。
3、色澤檢查
每種油脂都有它固有色澤，根據這一點可鑒別油脂是否具有該種油脂的正常色澤、按油脂組成而言，純凈的油脂是無色、透明，常溫下略帶粘性的液體。但因油料本身帶有各種色素，在加工過程中，這些色素溶解在油脂中，而使油脂具有顏色，國家標准規定，色澤越淺，質量越好。
色澤的鑒別方法如下：一般用直徑1—1.5米長的玻璃插油管抽取澄清無殘渣的油品，油柱長約25—30厘米（也可移入試管或比色管中）在白色背景前反射光線下觀察。冬季氣溫低，油脂容易凝固，可取油250克左右，加熱至35—40℃，使之呈液態，並冷卻至20℃左右，按上述方法進行鑒別。
4、透明度
品質正常的油脂應該是完全透明的，如果油脂中含有鹼脂、類脂、蠟質和含水量較大時，就會出現渾濁，使透明度降低，一般用插油管將油吸出，用肉眼即可判斷透明度，分出清晰透明。微濁、混濁、極濁、有無懸浮物、懸浮物多少等。
5、沉澱物
油脂在加工過程中混入的機械雜質（泥砂、料坯粉末、纖維等）和鹼脂、蛋白質、脂肪酸粘液、樹脂、固醇等非油脂的物質，在一定條件下沉入油脂的下層，稱為沉澱物。品質優良的油脂，就沒有沉澱物，一般用玻璃扦油管插入底部把油吸出，即可看出有無沉澱或沉澱物多少。
6、植物油脂水分和雜質的感官鑒別
油脂是一種疏水性物質，一般情況下不易和水混合，但油脂中常含有少量的鹼脂、固醇和其他雜質等能吸收水分，並可形成膠體物質懸浮於油脂中，所以油脂中仍有少量的水分，這部分水份一般是在制油過程中混入的。同時，還混入些雜質，油脂中的水分和雜質含量過多時，不僅降低其品質，還會加快油脂水解和酸敗，影響油品貯存的穩定性。植物油脂水分和雜質和鑒別是按照油脂的透明、混濁程度，懸浮物和沉澱物的多少，以及改變條件後所出現的各種現象等，憑人的感覺器官來分析判斷的。鑒別方法如下：
（1）取樣判定法。取乾燥潔凈的扦油管一支，用大拇指將玻璃管上口按住，斜插入裝油容器內至底部，然後放開大姆指，微微搖動，稍停後再用大拇指按住管口，提取觀察油柱情況。在常溫下，油脂清晰透明，水分雜質含量在0.3%以下；若出現混濁，水分雜質含量在0.4%以上；若油脂出現明顯的混濁並有懸浮物，則水分雜質含量在0.5%以上。把扦油管的油放回原容器，觀察扦油管模糊不清，則油品水分在0.3%-0.4%之間。
（2）燒紙驗水法。取乾燥、潔凈的扦油管，用食指按住油管上口，插入靜止的油容器里，直至底部，放開上口，扦取底部沉澱物少許，塗在易燃燒的紙片上點燃，聽其發出的聲音，觀察其燃燒現象。燃燒時紙面出現氣泡，並以出「吱吱」響聲，水分約在0.2%—0.25%之間；如果燃燒時發生油星四濺現象，並發出「叭叭」的爆炸聲，水分約在0.4%以上；如果紙片燃燒正常，水分約在0.2%以內。這種方法主要用於檢查明水（如裝油的容器口封閉不嚴，漏進雨水或容器原來帶水所引起）。
（3、）鋼筋勺加熱法。用普通的鋼精勺一個，取有代表性的油樣約250克，在爐火或酒精燈上加熱到150—160℃，看其泡沫，聽其聲音和觀察其沉澱情況（霉壞、凍傷的油料榨得的油例外）如出現大量泡沫，又發出「吱吱」響聲，說明水分較大，約在0.5%以上；如有泡沫，但很穩定，也不發出任何聲音，表示水分較少，一般在0.25%左右。加熱後，撇去油沫，觀察油的顏色，若油色沒有變化，也沒有沉澱，說明雜質一般在0.2%左右；如油色變深，雜質約在0.49左右；如勺底有沉澱，說明雜質多，約在1%以上。用這種方法，加熱溫度不能超過160℃。
7、摻入食鹽的識別
方法一：從油桶底部取少許油樣，用嘴嘗，如有鹹味則說明該油中摻有食鹽。
方法二：從油桶底部取少許油樣放入干凈的試管（需用蒸餾水沖洗）中，加入5毫升蒸餾水，加熱至沸，繼續加熱1—2分鍾，稍冷卻，趁熱過濾，或靜置冷卻，待分層後用滴管吸取下層液體，在濾液（或下層液體）中加入1—2滴1.7%硝酸銀溶液（稱取1.7硝酸銀溶於100毫升蒸餾水中）。若有白色沉澱產生，則可確認被測油中摻有食鹽。
8、摻入麵粉的識別
從油桶底部取少許油樣放入干凈的試管（需用蒸餾水沖洗）中，加熱融化後加入2滴碘溶液，若變為藍色，則表示油樣中含有澱粉。

㈡ 製作動物標本的方法

製作動物標本的方法：

1、浸製法

所用的保存葯劑，以酒精及甲醛液最為普遍。採到的動物標本，可直接浸存於70%的酒精或5～10%甲醛液或二者各半的混合液中。

活的標本，要首先在純凈甲醛液或95%酒精的固定液中浸泡，然後再移置於保存液中。大形動物標本要在殺死後，將標本復面剖一小縫，使保存液易於滲透內部，或用注射器向體腔注射保存液。

浸制動物標本，要在標本未固定變硬時，將附肢及其他體部伸直，成為適當姿勢，並在附肢或其他位置拴上標簽，用黑墨水註明該標本名稱、採集期與採集地。

標本浸入保存液後，葯液如變為污濁，應隨時更換。裝標本用的瓶，應在瓶塞處用石蠟密封，以防保存液蒸發。

2、剝製法

是指脊椎動物而言，也就是說脊椎動物的大部分種類都可以製成剝制標本，但在實際應用中，主要適用於哺乳類和鳥類，以及一些不宜採用浸制方法的其它各綱的大型種類，如鯨、鯊魚、海龜等。

動物的種類繁多，外部形態、軀體大小，皮膚情況等等都很不一樣，在製作過程中就必須根據不同情況，採取不同方法進行製作。

(2)濕液動物標記常用的方法是擴展閱讀：

製作動物標本的工具材料

1.解剖工具：如解剖刀、鑷子、剪刀、骨剪等，可根據經濟條件准備。

2.木工、金工工具：如鋼絲鉗、台鉗、鎯頭、電鑽、鋸等可根據條件准備。

3.石膏粉（或滑石粉）：有吸水功能，主要用於吸收鳥類羽毛清洗後的水分，在剝制過程中撒在肌肉和皮膚之間，防止粘連，並防止血液、脂肪等污染羽毛。

4.鉛絲：用於動物標本支架。可根據動物的大小選用粗細不同的型號。

5.填充物：主要用於填入標本體內，可選用棉花、竹絲、麻刀、棕等。

6.玻璃義眼：可用來代替動物的眼睛。

7.針線：縫合標本剖口用。

8.標本台、樹枝等：固定動物標本用。

9.標簽、記錄動物標本的名稱、性別、採集地點等。

㈢ 動物學實驗的實驗動物常見的處理方法

一、編號
實驗動物常需要標記以示區別。編號的方法很多，根據動物的種類數量和觀察時間長短等因素來選擇合適的標記方法。
(一)掛牌法：將號碼烙壓在圓形或方形金屬牌上(最好用鋁或不銹鋼的,它可長期使用不生銹),或將號碼按實驗分組編號烙在栓動物頸部的皮帶上，將此頸圈固定在動物頸部。該法適用於狗等大型動物。
(二)打號法：用刺數鉗(又稱耳號鉗)將號碼打在動物耳朵上。打號前用蘸有酒精的棉球擦凈耳朵，用耳號鉗刺上號碼，然後在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。該法適用於耳朵比較大的兔、狗等動物。
(三)針刺法：用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水，在耳部、前後肢以及尾部等處刺入皮下，在受刺部位留有一黑色標記。該法適用於大小鼠、豚鼠等。在實驗動物數量少的情況下，也可用於兔、狗等動物。
(四)化學葯品塗染動物被毛法：經常應用的塗染化學葯品有
塗染紅色：0.5%中性紅或品紅溶液
塗染黃色：3-5%苦味酸溶液
塗染黑色：煤焦油的酒精溶液
根據實驗分組編號的需要，可用一種化學葯品塗染實驗動物動物背部被毛就可以。如果實驗動物數量較多，則可以選擇兩種染料。該方法對於實驗周期短的實驗動物較合適，時間長了染料易退掉；對於哺乳期的子畜也不適合，因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(五)剪毛法：該法適用於大、中型動物，如狗、兔等。方法是用剪毛刀在動物一側或背部剪出號碼，此法編號清楚可靠，但只適於短期觀察。
(六)打孔或剪缺口法：可用打孔機在兔耳一定位置打一小孔來表示一定的號碼。如用剪子剪缺口,應在剪後用滑石粉捻一下,以免癒合後看不出來。該法可以編至1～ 9999號，此種方法常在飼養大量動物時作為終身號採用。
二、分組
(一)分組的原則：進行動物實驗時，經常需要將選擇好的實驗動物按研究的需要分成若干組。動物分組應按隨機分配的原則，使每隻動物都有同等機會被分配到各個實驗組與對照組中去，以避免各組之間的差別,影響實驗結果，特別是進行准確的統計檢驗,必須在隨機分組的基礎上進行。
每組動物數量應按實驗周期長短、實驗類型及統計學要求而定。如果是慢性實驗或需要定期處死動物進行檢驗的實驗，就要求選較多的動物，以補足動物自然死亡和認為處死所喪失的數量，確保實驗結束時有合乎統計學要求的動物數量存在。
(二)建立對照組：分組時應建立對照組。1.自身對照組：是指實驗數據而言。實驗動物本身在實驗處理前、後兩個階段的各項相關數據就分別是對照組和實驗組的實驗結果，此法可排除生物間的個體差異。2.平行對照組：有正對照組和負對照組兩種。給實驗組動物某種處理，而給正對照組用同樣方法進行處理，但並不採用實驗所要求的葯物或手段，負對照組則不給任何處理。3.具體分組時，應避免人為因素, 隨機把所有的動物進行編號，然後令其雙數為A組(實驗組),單數為B組(對照組)即可或反之。如果要分若干個組時，應該用隨機數字表示進行完全隨機分組。 一、實驗動物的除毛
在動物實驗中，被毛有時會影響實驗操作與觀察，因此必須除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脫毛等。
(一)剪毛法：剪毛法是將動物固定後，先用蘸有水的紗布把被毛浸濕，再用剪毛剪刀緊貼皮膚剪去被毛。不可用手提起被毛，以免剪破皮膚。剪下的毛應集中放在一容器內，防止到處飛揚。給狗、羊等動物采血或新生乳牛放血制備血清常用此法。
(二)拔毛法：拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳緣靜脈注射或尾靜脈注射時常用此法。
(三)剃毛法：剃毛法是用剃毛刀剃去動物被毛的方法。如動物被毛較長，先要用剪刀將其剪短，再用刷子蘸溫肥皂水將剃毛部位浸透，然後再用剃毛刀除毛。本法適用於暴露外科手術區。
(四)脫毛法：脫毛法是用化學葯品脫去動物被毛的方法。首先將被毛剪短，然後用棉球蘸取脫毛劑，在所需部位塗一薄層，2～3分鍾後用溫水洗去脫落的被毛，用紗布擦乾，再塗一層油脂即可。
適用於狗等大動物的脫毛劑配方為：硫化鈉10g，生石灰15g，溶於100ml水中。
適用於兔、鼠等動物的脫毛劑的配方為：1. 硫化鈉3g,肥皂粉1g,澱粉7g,加適量水調成糊狀；2. 硫化鈉8g,澱粉7g，糖4g，甘油5g，硼砂1g,加水75ml；3. 硫化鈉8g溶於100ml水中。
二、實驗動物的給葯
在動物實驗中，為了觀察葯物對機體功能、代謝及形態引起的變化，常需要將葯物注入動物體內。給葯的途徑和方法多種多樣，可根據實驗目的、實驗動物種類和葯物劑型、劑量等情況確定。
(一)注射給葯法
1. 皮下注射注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入,固定後即可進行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或側下腹部；豚鼠在後大腿內側、背部等脂肪少的部位；兔在背部或耳根部注射；蛙可在脊背部淋巴囊注射；狗多在大腿外側注射，拔針時，輕按針孔片刻，防葯液逸出。
2. 皮內注射此法用於觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內反應。 如將一定量的放射性同位素溶液、顏料或致炎物質、葯物等注入皮內，觀察其消失速度和局部血液循環變化，作為皮膚血管通透性觀察指標之一。方法是：將動物注射部位的毛剪去，消毒後，用皮試針頭緊貼皮膚皮層刺入皮內，然後使針頭向上挑起並再稍刺入，即可注射葯液。注射後可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射當給動物注射不溶於水而混懸於油或其他溶劑中的葯物時,常採用肌肉注射。肌肉注射一般選用肌肉發達、無大血管經過的部位，多選臀部。注射時針頭要垂直快速刺入肌肉，如無回血現象即可注射。給大、小鼠作肌肉注射時，選大腿外側肌肉進行注射。
4. 腹腔注射先將動物固定,腹部用酒精棉球擦試消毒，然後在左或右側腹部將針頭刺入皮下，沿皮下向前推進約0.5厘米，再使針頭與皮膚呈45 度角方向穿過腹肌刺入腹腔，此時有落空感，回抽無腸液、尿液後，緩緩推入葯液。此法大小鼠用的較多。
5. 靜脈注射是將葯液直接注射於靜脈管內，使其隨著血液分布全身,迅速奏效。但排泄較快，作用時間較短。
6. 淋巴囊注射蛙類常採用此法,其皮下有數個淋巴囊，注入葯物甚易吸收。腹部淋巴囊和頭部淋巴囊常作為蛙類給葯途徑。一般多選用腹部淋巴囊給葯。注射時將針頭從蛙大腿上端刺入，經大腿肌層入腹壁肌層，再進入腹壁皮下，即進入淋巴囊，然後注入葯液。
(二)經口給葯法
1. 口服法：把葯物放入飼料或溶於飲水中讓動物自動攝取。此法優點在於簡單方便，缺點是不能保證劑量准確。一般適用於對動物疾病的防治或某些葯物的毒性實驗，製造某些與食物有關的人類疾病動物模型。
2. 灌胃法：在急性實驗中,多採用灌胃法。此法劑量准確。灌胃法是用灌胃器將所應投給動物的葯灌到動物胃內。灌胃器由注射器和特殊的灌胃針構成。小鼠的灌胃針長約4～5cm，直徑為1mm，大鼠的灌胃針長約6～8cm，直徑約1.2mm。灌胃針的尖端焊有一小圓金屬球，金屬球為中空的。焊金屬球的目的是防止針頭刺入氣管或損傷消化道。針頭金屬球端彎曲成20°左右的角度，以適應口腔、食道的生理彎曲度走向。
(三)其它途徑給葯方法
1. 呼吸道給葯：呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態的葯物或毒氣,均需要通過動物呼吸道給葯。如實驗時給動物乙醚作吸入麻醉、用鋸末煙霧製作慢性氣管炎動物模型等，特別在毒理學實驗中應用更為廣泛。
2. 皮膚給葯：為了鑒定葯物或毒物經皮膚的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等，均需採用經皮膚給葯方法。如兔和豚鼠常採用背部一定面積的皮膚脫毛後，將一定的葯液塗在皮膚上，葯液經皮膚吸收。
3. 脊髓腔內給葯：此法主要用於錐管麻醉或抽取腦脊液。
4. 腦內給葯：此法常用於微生物學動物實驗,將病原體等接種於被檢動物腦內，然後觀察接種後的各種變化。
5. 直腸內給葯：此種方法常用於動物麻醉。兔直腸內給葯時,常採用灌腸的膠皮管或用14號導尿管代替。
6. 關節腔內給葯：此法常用於關節炎的動物模型復制。