① 絲蟲病的檢查
分為病原學診斷和血清學診斷。前者包括從外周血液、乳糜尿、抽出液中查微絲蚴和成蟲;後者為檢測血清中的絲蟲抗體和抗原。
1.病原學檢查
血檢微絲蚴,由於有夜現周期性,取血時間以晚上九時至次日凌晨二時為宜。
(1)夜間采血檢查微絲蚴陽性
(2)成蟲檢查法在尿、鞘膜積液、淋巴液、腹水、乳糜尿查見微絲蚴,在淋巴管、淋巴結內查見成蟲,或在病理組織切片中查見絲蟲斷面。
(3)特異的DNA探針
2.血清學檢查
快速免疫色譜試驗檢測班氏絲蟲抗原陽性或酶聯免疫檢測絲蟲特異性抗體IgG陽性。
② 馬來絲蟲病的診斷檢查
實驗室檢查:絲蟲病早期有過敏反應的病人,白細胞總數常為10—20×109/L,以嗜酸性粒細胞增加為主,伴有細菌感染者中性粒細胞顯著增高。
(一)病原學檢查 血液體體液中檢出微絲蚴是診斷早期絲蟲病惟一可靠方法。
1、血液微絲蚴檢查 晚10恩時至次晨2時檢出率最高。
方法有:
(1)厚血片法:耳垂血三大滴在玻片上製成厚薄均勻的厚血片,干後溶血,染色鏡檢;
(2)鮮血法:耳垂後一大滴在玻片上加水溶血稀釋,加蓋玻片後地倍鏡下找微絲蚴,微絲蚴自由擺動,前後捲曲,較易識別。方法簡單,但陽性檢出率低;
(3)濃集法:取抗凝靜脈血2ml,加整流10ml溶血,搖勻,離心沉澱,取沉渣鏡檢,此法陽性率高;
(4)白天誘出:口服乙胺嗪100mg後,15、30、60分鍾分別采外周血找微絲蚴,檢出率低;
(5)薄膜過濾法:抗凝靜脈血2ml經孔徑3um的核孔薄膜過濾後取下薄膜,用熱的蘇木素染色5分鍾後鏡檢。此法檢出率和微絲蚴檢出數斤高於厚血片法和濃集法。
2、各種體液微絲蚴檢查 可在鞘膜積液、淋巴液、乳糜尿、乳糜腹水、乳糜胸腔積液、心包積液及骨髓等標本中檢查微絲蚴。
(二)免疫學檢查
1、批內試驗 注射犬惡絲蟲抗原0.05ml於受試者前臂,15分鍾後丘疹直徑>0.9cm者為陽性。此試驗敏感性和特異高,與血中微絲蚴檢出符合率為86.2%—94.1%。
2、間接熒光抗體試驗 國內以牛絲蟲成蟲為抗原,間接熒光抗體法查患者血清中抗體,陽性率85%—99.2%。該法具高度特異性和敏感性,適用於流行病學調查,又可反映防治成效。
3、酶聯免疫吸附試驗 以該法查血清中抗體,靈敏度高、特異性強、操作簡便,為本病較理想的輔助診斷方法。
4、檢測循環抗原 對微絲蚴陽性病人有較高的敏感性,為一種特異診斷方法,但對微絲蚴陰性病人則敏感性較差。用單克隆抗體查循環抗原可作為抗絲蟲病葯物療效評價的檢測方法。
(三)分子生物學檢查
DNA雜交試驗和PCR可用於微絲蚴血症檢查,血中微絲蚴量少和需行蟲種鑒定者尤為適用。診斷 依據流行區旅居史,有反復發作的淋巴結炎、性淋巴管炎、乳糜尿、精索炎、象皮腫等臨床,即應考慮絲蟲病可能。外周血、體液中找到微絲蚴,診斷即可確立。疑為絲蟲病而未檢出微絲蚴者可以大劑量乙胺嗪(海群生)作治療性診斷,如出現發熱、淋巴系統反應和淋巴結節,診斷即可成立。急性期的淋巴管炎、淋巴結炎應與細菌性相區別。晚期腹股溝淋巴腫大形成之腫注意與腹股溝疝區別。精索炎和附睾炎應與附睾結核鑒別。入迷尿雖多見於絲蟲病,但也偶見於結核、腫瘤、包蟲病以及其他因素所致腹膜後淋巴系統廣泛破壞而引起的淋巴通路受阻。
③ 犬心絲蟲病怎麼防治
犬心絲蟲病又叫犬血絲蟲病或犬惡絲蟲病,是由犬惡絲蟲寄生於犬的右心室和肺動脈而引起的。臨床上主要表現為循環障礙、呼吸困難以及貧血等症狀。本病流行較廣,南方比北方多發。
犬惡絲蟲為黃白色粉絲狀蟲體,常數條糾纏成團。雄蟲長12~18厘米,尾部數回盤旋。雌蟲長25~30厘米,尾部較直。雌蟲胎生,直接產出的幼蟲叫微絲蚴。微絲蚴在犬的血液內作蛇樣運動。犬心絲蟲病需中間宿主蚊傳播。因此,本病的發生有明顯的地區性和季節性,多見於蚊蟲繁殖的地區和蚊蟲最為活躍的6~10月。
感染初期症狀不明顯,以後可見咳嗽,易疲勞,食慾減退,被毛粗亂,消瘦,貧血,有的出現瘙癢、脫毛及結節性皮膚病。隨著病情發展,病犬心悸亢進,脈細弱並有間隙,心內有雜音,肝腫大有觸痛,胸、腹腔積水,全身浮腫,呼吸困難,嚴重者可導致死亡。
診斷本病可根據發病季節、臨床症狀而初診,或采血作微絲蚴檢查而確診。其方法是取末梢血液一滴,置載玻片上,加少量生理鹽水稀釋後加蓋片作低倍鏡檢查,如有微絲蚴存在,即可見其在血液中活潑游動。也可取血液1毫升加7%醋酸溶液或1%鹽酸溶液5毫升,離心2~3分鍾,傾去上清,取沉澱鏡檢。檢查微絲蚴時通常春、夏季檢出率高,夜晚比白天檢出率高。此外,也可用血清學方法進行特異性診斷。病犬死亡後可在右心和肺動脈中檢出大量絲蟲。
本病除採用對症治療外,還可用下列葯物治療:海群生(乙胺嗪)10~20毫克/千克,口服,每天1次,連服1周,對絲蟲成蟲和微絲蚴均有殺滅作用。酒石酸銻鉀2~4毫克/千克,溶於生理鹽水中靜脈注射,每天1次,連用3次有效。對成蟲有效的葯物還有硫酸醯胺鈉、伊維菌素、鹽酸二氯苯胂和菲拉松等,對微絲蚴有殺滅作用的有波芬和二硫噻啉。
應用上述葯物治療時,由於死亡蟲體堵塞肺動脈可導致患犬衰竭甚至死亡,因此應謹慎從事。近年來國外多採用外科手術法取出肺動脈和右心室內的蟲體。
搞好環境衛生,消滅蚊蟲孳生地。流行季節(5~10月),連日或隔日給予海群生(5毫克/千克)或左旋咪唑(2.5毫克/千克),有一定預防效果。
④ 淋巴絲蟲病的檢查
1.白細胞計數與分類
早期有過敏反應的患者白細胞總數與嗜酸性粒細胞增加,前者大多在(10~20)×10/L之間,後者在20%以上。如有細菌繼發感染除白細胞總數增加外中性粒細胞亦顯著增加。
2.血液微絲蚴的發現
絲蟲病的確診有賴於微絲蚴的發現,通常採用外周血液的檢查,大多自夜10時至次晨2時微絲蚴最易找到,如夜間血中超出150條/60μl,白晝亦可找到。
(1)鮮血法用血紅蛋白計吸管吸取耳垂血20μl,在低倍顯微鏡下找微絲蚴。陽性者可見微絲蚴自由擺動,前後捲曲,頗為活躍。
(2)塗片法耳垂取血三大滴(約等於60μl)置於玻片中心,塗成厚薄均勻邊緣整齊的長方形或橢圓形厚血片約2cm×3cm大小自20世紀80年代起,又統一規定為120μl即六大滴雙片法。染色可用品藍或硼砂亞甲藍染色法如鑒別蟲種有困難時可用吉姆薩或蘇木精染色。採用熒光色素吖啶橙染色法,亦可提高微絲蚴檢出率。
(3)濃集法微絲蚴的濃集法很多都是將血液內的紅細胞溶解後,離心沉澱吸取沉渣尋找被集中在沉渣內的微絲蚴。常用的溶血劑為蒸餾水。
(4)微孔膜過濾法用含有5%枸櫞酸鈉0.1ml的10ml注射器抽血1m1混勻,再吸10%teepol液9ml(或2%吐溫80液或0.1%碳酸氫鈉液)混勻溶血,將注射器接25mm直徑的5μm孔徑微孔膜過濾器,溶血液通過薄膜濾下,微絲蚴留於薄膜上,取下薄膜用0.1%蘇木精或0.1%亞甲藍染色後鏡檢。
(5)微絲蚴白天誘出法在白天口服乙胺嗪100mg後1小時內微絲蚴可以在外周血液內查到。本法不宜作普查絲蟲病的方法。在門診檢查,可作參考。
3.各種體液微絲蚴檢查
鞘膜積液、乳糜尿、淋巴或乳糜腹水、心包積液、眼前房水等液體中檢查微絲蚴,可用直接塗片、染色鏡檢或離心濃集法檢查
4.免疫學診斷
目前國內外常用的免疫學診斷方法有:
(1)皮內試驗注射犬惡絲蟲抗原0.05ml於受試者前臂皮內,15min後丘疹超過0.9cm者為陽性。此試驗與絲蟲病患者體征符合率為73.6%~96.6%,與血中帶微絲蚴陽性符合率為86.2%~94.1%,但與血吸蟲病可產生輕度交叉反應本法只具過篩及輔助診斷價值,在防治後期也不宜用於監測。
(2)間接免疫熒光抗體試驗以長爪沙鼠等動物模型收集的成蟲和微絲蚴作抗原,熒光抗體採用羊抗人IgG熒光抗體結合物,具有高度敏感性和特異性。以成蟲切片作抗原,其敏感性為92%~98%,特異性為95%;以微絲蚴切片作抗原,敏感性達92%~96%特異性為98%。本法可作為絲蟲病輔助診斷和血清流行病學調查與現場監測。缺點仍是不能用於療效考核,及區別患者屬於既往感染或活動感染。
(3)酶聯免疫吸附試驗(ELISA)採用馬來絲蟲、犬惡絲蟲、指狀腹腔絲蟲及微絲蚴等可溶性抗原,ELISA測定抗體,與絲蟲病患者的陽性符合率為85%~100%,假陽性反應為1.5%~8.2%。用微絲蚴或成蟲ES抗原對微絲蚴血症者陽性符合率為93%~95%,非流行區健康人及腸道線蟲感染者均為陰性反應。本法檢測人體絲蟲病抗體,具有較高特異性和敏感性,適用於現場調查同樣本法不能用於療效考核及區別患者是否為活動性感染
(4)檢測循環抗原WHO推薦應用免疫色譜技術(ICT)測試卡檢測班氏絲蟲抗原。據報告該法敏感性為90%~98%,特異性達99%~100%。
用單克隆抗體酶聯免疫吸附試驗(McAbELISA)和斑點酶聯法(Dot-ELISA)檢測絲蟲病患者血清中抗原,特異性分別為94%和96%,Dot-ELISA可檢出0.055μg/L抗原,而McAbELISA僅能檢出10μg/L抗原。兩者均能檢出活動性感染作為絲蟲病防治的後期監測、搜索殘存傳染源和評價防治效果。
5.分子雜交及DNA重組技術
目前基因克隆和DNA技術正應用於絲蟲病診斷,具有很高的敏感性和特異性。
6.乳糜尿與淋巴尿
乳糜尿與淋巴尿,前者呈乳白色,可用乙醚提取,以蘇丹Ⅲ染色,在顯微鏡下可見紅黃色油點淋巴尿的肉眼檢查與正常尿無異,其含量以蛋白質為主,也有少數紅細胞,但無管型。自鞘膜積液穿刺而得的乳糜液與淋巴液,與乳糜尿及淋巴尿大致相同,自其沉澱中可發現活動的微絲蚴。
7.活組織檢查
將疑似的病變組織,如下肢淺表淋巴結、附睾結節切取小塊,進行病理檢查,可找到成蟲及可見相關的病理變化。
8.其他輔助檢查
淋巴管造影:絲蟲病患者常顯示擴張的輸入淋巴管和狹小的輸出淋巴管,淋巴結實質顯影有缺損現象。