㈠ 培養基滅菌的方法
1、高壓蒸汽滅菌納空陪:高壓蒸汽滅菌適用於耐高溫培養基、接種器具和蒸餾水的滅菌。培養基在配製過程中混入各種雜菌，分裝後應立即滅菌，滅菌工作至少應在24小時內完成。一般可虧模在0.105MPa壓力、121℃溫度下滅菌15 ~ 30分鍾。消毒時間不能太長，也不能超過規定的壓力范圍，否則有機物，特別是維生素，在高溫下會分解，失去營養功能，使培養基變質、變色，甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水放入三角瓶中，含水量一般不超過瓶子的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包好密封，然後放入高壓鍋中滅菌，得到無菌水。滅菌後的培養基可以在培養室中預培養3天。如果沒有污染，證明滅菌完成，可以使用。暫時不用的培養基最好保存在10℃下。含IAA或GA3的培養基應在一周內用完，其他培養基最多不超過一個月。2、過濾滅菌:一些植物生長調節劑和有機物質，如IAA、GA3、ZT、CM等。，加熱時易分解，不能用培養基高溫滅菌，所以要用細菌過濾器把洞蠢雜菌過濾掉。細菌過濾器和濾膜(孔徑0.45微米)在使用前應高壓滅菌。過濾後的溶液應立即加入培養基中。如果是液體培養基，可以在培養基冷卻到30℃時添加。如果是固體培養基，必須在培養基凝固前(50-60℃)加入，溶液必須搖勻，與其他成分混合均勻。
㈡ 新配製的培養基如何滅菌如何檢測效果
用高壓蒸汽滅菌法滅菌，將滅菌後的培養基運改放入恆溫培養箱中培養，觀察是否漏悄鉛有菌落產生，若沒有，則證明培養基消毒返好完全
㈢ 如何檢驗滅菌後的培養基是否合格
把滅菌後的培養基按滅菌鍋內的不同位置，每處抽取弊源數管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養一周左右進行檢查。如果培養基沒有什麼變化，說明哪卜隱滅菌效果良好；如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現雜李廳菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應提高壓力或延長滅菌時間。經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌後，以後按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌後,以後按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
㈣ 培養基滅菌方法
1.灼燒滅菌
將微生物的接種工具，如接種環、接種針或其他金屬虛御用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌。此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰灼燒來滅菌。
2.乾熱滅菌
將滅菌物品放入乾熱滅菌箱內，在160～170℃加熱1～2h可達到滅菌的目的。能耐高溫的、需要保持乾燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養皿）和金屬用具等，可以採用這種方法滅菌。差襪岩
3.高壓蒸汽滅菌
將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內。把鍋內的水加熱煮沸，將其中原好汪有的冷空氣徹底排除後，將鍋密閉，繼續加熱使鍋內的氣壓逐步上升，溫度也隨之升到100℃以上。為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15~30
min。
㈤ 培養基滅菌方法
培養基的滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌：
高壓蒸汽滅菌適合於耐高溫培養基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝後應立即滅菌，至少應在24h內完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時，滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長，也不能超過規定的壓力范圍，否則有機物質特別是維生素類物質就會在高溫下分解，失去營養作用，也會使培養基變質、變色，甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中，裝水量一般不超過瓶的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包紮封口，然後放入高壓鍋中滅菌後即為無菌水。 滅菌後的培養基可放到培養室中預培養3d，若無污染現象，則證明滅菌是徹底的，可以使用。暫時不用的培養基最好置於10℃下保存。含IAA或GA3的培養基應在1周內用完，其他培養基最多也不要超過1個月。
2、過濾滅菌：
一些植物生長調節劑及有機物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇熱容易分解，不能與培養基一起進行高溫滅菌，而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌。細菌過濾器與濾膜（孔徑0.45微米）使用之前要先進行高壓滅菌。過濾後的溶液要立即加入培養基中，若為液體培養基，可在培養基冷卻至30℃時加入；若為固體培養基，必須在培養基凝固之前（50-60℃）加入，振盪使溶液與其他成分混合均勻。
㈥ 微生物檢測中常用滅菌和消毒方法匯總......
消毒和滅菌兩個詞在實際使用中常被混用，其實它們的含義是有所不同的。消毒是指應用消毒劑等方法殺滅物體表面和內部的病原菌營養體的方法，而滅菌是指用物理和化學方法殺死物體表面和內部的所有微生物，使之呈無菌狀態。
利用溫度進行滅菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高溫可使微生物細胞內的蛋白質和酶類發生變性而失活，從而起滅菌作用，低溫通常起抑菌作用。
a.灼燒滅菌法：
利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠，滅菌迅速，但易焚毀物品，所以使用范圍有限，只適合於接種針、環、試管口及不能用的污染物品或實驗動物的屍體等的滅菌。
b.乾熱空氣滅菌法：
這是實驗室中常用的一種方法，即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中，升溫至160℃，恆溫1小時即可。此法適用於玻璃皿、金屬用具等的滅菌。
在同樣的溫度下，濕熱滅菌的效果比乾熱滅菌好，這是因為一方面細胞內蛋白質含水量高，容易變性。另一方面高溫水蒸汽對蛋白質有高度的穿透力，從而，加速蛋白質變性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：
有些食物會因高溫破壞營養成分或影響質量，如，牛奶、醬油、啤酒等，所以只能用較低的溫度來殺死其中的病原微生物，這樣既保持食物的營養和風味，又進行了消毒，保證了食品衛生。該法一般在62℃，30分鍾即可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創，故名為巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：
直接將要消毒的物品放入清水中，煮沸15分鍾，即可殺死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸，則效果更好。此法適用於注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.間歇滅菌法：
上述兩種方法在常壓下，只能起到消毒作用，而很難做到完全無菌。若採用間歇滅菌的方法，就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是：將待滅菌的物品加熱至100℃，15～30分鍾，殺死其中的營養體。然後冷卻，放入37℃恆溫箱中過夜，讓殘留的芽孢萌發成營養體。第2天再重復上述步驟，三次左右，就可達到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋，適於推廣，但操作麻煩，所需時間長。
d.加壓蒸汽滅菌法：
這是發酵工業、醫療保健、食品檢測和微生物學實驗室中最常用的一種滅菌方法。它適用於各種耐熱、體積大的培養基的滅菌，也適用於玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。
加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的，以大量蒸汽使其中壓力升高。由於蒸汽壓的上升，水的沸點也隨之提高。在蒸汽壓達到1.055公斤/厘米2時，加壓蒸汽滅菌鍋內的溫度可達到121℃。在這種情況下，微生物（包括：芽孢）在15～20分鍾便會被殺死，而達到滅菌目的，如，滅菌的對象是砂土、石蠟油等面積大、含菌多、傳熱差的物品，則應適當延長滅菌時間。
在加壓蒸汽滅菌中，要引起注意的一個問題是，在恆壓之前，一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣，否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對應關系，這樣會大大降低滅菌效果。
a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數微生物的營養體和病毒在50～65℃，10分鍾就會被殺死；但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱，其中抗熱性最強的是嗜熱脂肪芽孢桿菌，要在121℃，12分鍾才被殺死。對同種微生物來講，幼齡菌比老齡菌對熱更敏感。
b.微生物的數量多少顯然會影響滅菌的效果，數量越多，熱死時間越長。
c.培養基的成分與組成也會影響滅菌效果。一般地講，蛋白質、糖或脂肪存在，則提高抗熱性，pH在7附近，抗熱性最強，偏向兩極，則抗熱能力下降，而不同的鹽類可能對滅菌產生不同的影響；固體培養基要比液體培養基滅菌時間長。
a.pH值普遍下降。
b.產生混濁或沉澱，這主要是由於一些離子發生化學反應而產生混濁或沉澱。
例如，Ca2+與PO4-3化合，就會產生磷酸鈣沉澱。
c.不少培養基顏色加深。
d.體積和濃度有所變化。
e.營養成分有時受到破壞。
輻射
利用輻射進行滅菌消毒，可以避免高溫滅菌或化學葯劑消毒的缺點，所以應用越來越廣，目前主要應用在以下幾個方面：
1）接種室、手術室、食品、葯物包裝室常應用紫外線殺菌。
2）應用β射線作食品表面殺菌，γ射線用於食品內部殺菌。經輻射後的食品，因大量微生物被殺滅，再用冷凍保藏，可使保存期延長。
過濾
採用機械方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器。通過過濾，只讓液體培養基從篩子中流下，而把各種微生物菌體留在篩子上面，從而達到除菌的目的。這種滅菌方法適用於一些對熱不穩定的體積小的液體培養基的滅菌以及氣體的滅菌。它的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。但是比細菌還小的病毒仍然能留在液體培養基內，有時會給實驗帶來一定的麻煩。
一般化學葯劑無法殺死所有的微生物，而只能殺死其中的病原微生物，所以，是起消毒劑的作用，而不是滅菌劑。
能迅速殺滅病原微生物的葯物，稱為消毒劑。能抑制或阻止微生物生長繁殖的葯物，稱為防腐劑。但是一種化學葯物是殺菌還是抑菌，常不易嚴格區分。消毒劑在低濃度時也能殺菌（如，1：1000硫柳汞）。由於消毒防腐劑沒有選擇性，因此，對一切活細胞都有毒性，不僅能殺死或抑制病原微生物，而且對人體組織細胞也有損傷作用，所以只能用於體表、器械、排泄物和周圍環境的消毒。常用的化學消毒劑有：石碳酸、來蘇水（甲醛溶液）、氯化汞、碘酒、酒精等。
㈦ 培養基滅菌是用什麼滅菌紫外線
輻照滅菌。
微波，紫外線，X射線，γ射線都可以進行滅菌。γ射線具有很強的穿透力，滅菌效果良好，在食品中得到了廣泛的應用、葯品行業的產品滅菌，亦多用於微生物培養基中、實驗器材的滅菌。紫外線殺菌作用弱，很少有穿透力，一般只適用於實驗室內空氣或者物體表面的殺菌。
滅菌效果：γ射線具有良好的滅菌和穿透力，能殺滅一切微生物，芽孢體也不例外。
注意事項等：
1。並非所有培養基都可以採用γ射線輻照滅菌方式，一些染料或不穩定成分經輻照後會發生變化；
2.γ射線對瓊脂有一定的損傷，所以在固體培養基滅菌的過程中，輻照劑量及瓊脂的加入量均需適當調整；
3。玻璃製品、金屬製品一般不可採用此方法滅菌。