Ⅰ 種子檢驗機構如何根據檢驗任務選擇適宜的檢驗方法並開展檢驗工作
室內檢驗方法:主要是播種品質的檢驗,包括:種子純度、凈度、發芽力、生活力、活力、種子水分、種子重量和種子健康度等內容。
1、扦樣
室內檢驗取樣藉助於一種專用的扦樣器進行扦樣,扦樣是種子檢驗的第一步,由於種子檢驗是破壞性檢驗,不可能將整批種子全部進行檢驗,只能從種子批中隨機抽取一小部分相當數量的有代表性的供檢驗用的樣品。扦樣是否正確,樣品是否有代表性,直接影響到種子檢驗結果的正確性。
(1)樣品的組成
扦取後的樣品按其組成不同,可分為初次樣品、混合樣品、送驗樣品和試驗樣品。
(2)扦樣方法
①樣品必須由檢驗人員親自扦取,扦取前必須調查了解種子批的基本情況,查看相關文件記錄,實地觀察種子批的貯藏環境和包裝狀況。
②根據被扦種子數量進行種子批劃分,再根據種子批的堆放方式和種子的種類決定扦樣的部位和扦樣的點數。樣點在種子批中的分布要隨機均勻。
A袋裝種子扦樣法:扦樣的袋數(扦樣點數)取決於總袋數。在調種數量多,時間緊迫時,可酌情減少扦樣袋數,但不能少於總袋數的5%。
種子袋堆垛時,各扦樣點應均勻地分布在上、中、下各層,種子袋不是堆垛而是平放時,可間隔一定袋數確定各取樣袋。
扦樣時,中小粒種子用單管扦樣器,從袋口的一角斜插向袋的對角。大粒種子可採用相適應的扦樣器或倒包,徒手扦樣等方法扦樣。徒手扦樣時應注意每次用手取種子的數量,以保證各個初次樣品的量大致相等。
B散裝種子扦樣法:隨即從種子的不同部位和深度扦取初次樣品,樣點既要有水平分布又要有垂直分布的原則,將樣點均勻地設在種子堆的不同部位,點數根據種子批的大小來確定。
扦樣時,先扦上層,次扦中層,後扦下層,避免先扦下層時使上層種子混入下層,影響扦樣的正確性。
適於袋裝種子扦樣的器械有單管扦樣器、羊角扦樣器和雙管扦樣器。適於散裝種子扦樣的是長柄短筒圓錐形扦樣器、圓筒形扦樣器和圓錐形扦樣器。
(3)樣品的配製
①混合樣品的配製 在各點扦取若干初次樣品時,注意觀察每次扦取的初次樣品在純度、凈度、顏色、氣味和水分等方面有無明顯差異,如無差異就可將一個檢驗單位的全部初次樣品均勻混合在一起,便組成了混合樣品,如發現初次樣品間的品質有差異,則應作為不同的檢驗單位處理,即分別將有差異的若干初次樣品組成不同的混合樣品。
②送驗樣品的配製 各種作物送驗樣品的規定量不同,並且往往小於混合樣品,這就要求從混合樣品中分出縮小的樣品來。從混合樣品中分出一定數量送檢驗室供各項檢驗分析用的種子,即送驗樣品。當混合樣品較少而與規定的送檢樣品數量相符時,就可把此樣品作為送驗樣品。
分取送驗樣品有機械分樣和徒手分樣兩類,機械分樣是使用分樣器分樣,包括鍾鼎式分樣器、橫格式分樣器和電動分樣器。徒手分樣採用四分法,是利用對分遞減的方法進行分樣。無論採用哪種分樣方法,目的是既分樣均勻有代表性,又達到規定的數量。
③送驗樣品的處理 每個混合樣品分取兩份送驗樣品,一份供檢驗凈度(包括純度、發芽力、生活力、活力、千粒重等)用,可裝入布裝或紙袋內;另一份供水分、病蟲害測定和保留樣品用,其重量可比凈度檢驗少一半,該份樣品應密封包裝,並置於防濕的容器內。容器應貼好標簽。送驗樣品連同扦樣證明書應由扦樣員盡快送到種子檢驗室進行驗收保存[2]。
同時,要特別注意包衣種子的扦樣。
2、種子凈度分析
種子凈度(seed cleanliness)是指種子清潔干凈的程度,即樣品中除去雜質和其它植物種子後,留下的本作物(種)凈種子重量占種子樣品總重量的百分率。
種子的凈度是種子播種品質的重要指標之一,是種子分級的依據。凈度分析的目的首先是要了解一批種子的真實重量,為計算種子用價(種子用價=凈度×發芽率)提供一項指標。其次是了解一批種子中其它植物種子及無生命雜質的種類和含量,以便採取適當的清理方法,提高種子批的播種品質。
凈度分析的方法主要有精確法和快速法。其中,快速法技術簡單,主觀影響小,分析省時,分析結果誤差小,對凈種子的區分界限明顯,標准易掌握,而能廣泛應用;精確法的結果更符合實際。
3、品種純度檢驗
品種純度檢驗對保證原種和良種的質量也是很重要的。因為在原種的繁殖過程中,雖然逐株進行了鑒定,保證了原種植株是高純度的,但隔離條件收獲、脫粒、貯藏等方面,都不易得到絕對的保證。良種雖然直接用於商品生產,不影響下一代,但如果在良種採收或採收後的一系列過程中,發生了生物學和機械混雜而未及時檢驗出來,同樣將會給生產造成不可估量的損失。
(1)形態鑒定
包括籽粒形態測定、種苗形態測定和植株形態測定。
籽粒形態測定雖然簡單快速,但僅適合籽粒較大、形態性狀豐富的作物,測定結果受主觀影響較大。種苗形態測定適於幼苗形態性狀豐富的作物,因苗期所依據的性狀有限,所以測定結果不太准確。植株形態測定依據的性狀較多,測定結果較准確,但植株形態測定需要時間較長,難以滿足在調種過程中快速測定的需要[1]。
(2)物理化學法鑒定
化學鑒定:主要依據化學反應所產生的顏色的差異區分不同品種。有苯酚染色法、碘化鉀染色法等。
物理鑒定:區別種類的種類較少,難以滿足品種純度准確測定的要求。包括熒光鑒定法、煮沸法等。
(3)生理生化法鑒定
利用生理生化反應和生理生化技術進行品種純度測定,以生理生化反應為基礎的有愈傷木酚染色法、光周期反應鑒定法、除草劑敏感性鑒定法等。這些方法鑒別品種的能力較低,因此結果不太准確。以生理生化技術為基礎的方法有電泳法鑒定、色譜法鑒定、免疫技術鑒定等。色譜法技術含量較高,免疫技術需要大量技術開發研究,目前兩者都難以在生產實際應用中廣泛應用。電泳法相對較為簡單,依據蛋白質或同工酶電泳,可以相對准確的測定品種純度,是目前品種純度測定中較為快速准確的方法。
(4)分子生物學方法鑒定
種類非常多,是在DNA和RNA等分子水平上鑒別不同品種。常用的有RAPD技術、SSR技術、AFLP技術、RFLP技術。因其技術復雜,成本高,目前難以廣泛應用。
4、種子發芽力檢驗
種子發芽力是指種子在適宜條件下發芽並長成正常植株的能力,通常用發芽勢(germinating enery)和發芽率(germinating percentage)表示。種子發芽勢高,表示種子活力強,發芽整齊,田間出苗一致。種子發芽率高,表示有活力的種子多,播種後出苗率可能高。
發芽試驗通常是在實驗室條件下進行的。因為在田間條件下試驗受環境影響大,其試驗結果重演性差。而在實驗室可控制適宜的標准化條件,使試驗結果准確可靠。
5、種子生活力檢驗
種子生活力是指種子發芽的潛在能力或種胚所具有的生命力。一般情況下,種子生活力可以通過發芽力表示。但是由於低溫潮濕條件下收獲的某些作物(如黃瓜、甜瓜等)往往未達生理成熟,還處於生理休眠狀態,某些作物種子的種被或稃殼不透氣(如禾本科)和種皮不透水(如小粒豆科種子、棉子等),使得在一般發芽條件下具有生命力的種子也不能及時發芽。因此通過一定的技術手段來測定種子的生活力,具有實踐意義。
種子生活力測定的方法較多,根據其測定原理可大致分為4類:
⑴生物化學方法。主要有四唑染色法、溴麝香草酚藍法、甲稀蘭法、中性紅法、二硝基苯法等。
⑵組織化學法。主要有靛藍染色法、紅墨水染色法和軟X-射線造影法等。
⑶熒光分析法
⑷離體胚測定法。
其中四唑染色法、離體胚測定法、染料染色法和軟X射線造影法應用較多。
6、種子活力檢驗
種子活力的概念是指種子批在發芽和出苗期間,其內在活性和表現性能潛在水平的所有特性總和。
種子活力是種子質量的一個綜合指標,由於各種類型種子其單粒重、種皮厚度、發芽速度差異較大,因此,測定方法也有所不同。目前,國內外主要有以下幾種:外部形態法(目測法)、逆境試驗法、熒光法、.軟X-射線造影法、乙烯含量法、電導法、呼吸強度法、ATP含量法、四唑測定法。
7、種子水分測定
種子水分(seed moisture content)又稱種子含水量,是指種子樣品中所含水分的重量占樣品重量的百分率。種子含水量與種子有效貯藏年限有直接的關系,超過安全含水量的種子在貯藏期間,會因呼吸旺盛消耗養分,造成發芽,同時因為發熱使微生物大量繁殖,導致種子霉變等。因此必須將種子含水量控制在安全范圍內。
種子水分的測定方法很多,目前常用烘乾減重法和電子儀器測定法。
8、種子健康測定
種子健康測定(seed health testing)的目的是了解種子樣品的健康狀況,並由此推知種子批的健康狀況,從而比較不同批的價值和有目的地控制危害性病蟲害的蔓延。
目前測定種子健康程度的主要方法有:肉眼檢驗、過篩檢驗、剖粒檢驗 、染色檢驗、比重檢驗、洗滌檢驗、濾紙培養檢驗、瓊脂培養檢驗、熒光反應檢驗、漏斗分離檢驗 。