『壹』 細菌和病毒的培養方法
1繁殖方式:前者復制,後者二分裂;生活方式:前者寄生,離開宿主細胞無法生活,且對宿主有害,後者可寄生,腐生或自生,寄生時可能對寄主有益也可能有害;結構:前者無細胞結構,後者有;遺傳物質:前者是DNA或RNA,後者只有DNA;變異速度:前者特別是RNA病毒變異速度極快,後者較為緩慢,突變率低.2培養基製作過程較繁瑣,自己找相關資料.3病毒利用特異性的宿主,培養基中營養條件取決於宿主,細菌利用特異性的培養基,營養條件取決於自身.4.同2.5.寄主是否有相應的抗原;環境條件是否適宜;是否有一定的群體使大量細胞死亡,從而使器官失去相應功能.6外毒素:由細菌所分泌、能在局部及全身產生毒性效應的蛋白質成分.
內毒素:只在細菌被破壞時才被釋放的細菌毒素.
類毒素:由於變性或化學修飾而失去毒性的毒素,但仍保留其抗原性.
7.特異性的培養基分別篩選,不同菌種有不同的鑒定方法
『貳』 常見病毒的培養方法 及其具體的過程!
我見過的有雞胚胎法。
病毒研究的發展常常與病毒培養和檢測方法的進步有密切的關系,特別在脊椎動物病毒方面,小鼠和雞胚接種、組織培養、超速離心、凝膠電泳、電子顯微鏡和免疫測定等技術,對病毒學的發展具有深刻的影響。
噬菌體的培養和檢測方法最為簡單。將噬菌體接種到易感細菌的肉湯培養物中,經18~24小時後,混濁的培養物重新透明,此時細菌被裂解,大量噬菌體被釋放到肉湯中,再經除菌過濾,即為粗製噬菌體。為了測定其中噬菌體的數量,將粗製噬菌體稀釋到每一接種量含100個左右,與過量的細菌混合,然後鋪種於瓊脂平皿上,在溫箱中培養過夜,細菌繁殖成乳白色襯底,被噬菌體裂解的區域則在此襯底上表現為圓形的透明斑,稱為噬斑。噬斑數代表該接種量中有活力的噬菌體數量。如果挑出單個噬斑來培養,就能獲得由單個噬菌體所繁殖的後代,達到分離純化的目的。
動物病毒(見脊椎動物病毒)的培養可在自然宿主、實驗動物、雞胚或細胞培養中進行,以死亡、發病或病變等作為病毒繁殖的直接指標,或以血細胞凝集、抗原測定等作為間接指標。收獲發病動物的組織磨成懸液或有病變的細胞培養液,即為粗製病毒。測定活病毒數量可採用空斑法,其原理與噬斑法相同,但以易感的動物單層細胞代替細菌,在接種適當稀釋的病毒後,用含有培養液和中性紅的瓊脂覆蓋,使病毒感染局限在小面積內形成病變區,襯底的健康細胞被中性紅染成紅色,病變區不染色而顯示為空斑。
至今植物病毒的培養和檢測大都是在整株植物上進行的。從搗碎的病葉汁中制備病毒,常用枯斑法檢測。用手指蘸上混有金剛砂的稀釋病毒在植物葉片上軒輕磨擦,經一定時間後出現單個分開的圓形壞死或退綠斑點,稱為枯斑。
除了利用病毒的致病性定量檢測病毒外,還可應用物理方法,如在電子顯微鏡下計數病毒顆粒,或用紫外分光光度計測定提純病毒的蛋白和核酸量,這些方法所測得的數據包括了有感染性和無感染性的病毒粒。
應用電子顯微鏡不但能看清病毒粒的大小、形態,還可以分辨其表面的蛋白亞單位和內部的核殼等超微結構。
『叄』 防治病毒病的方法有哪些
防治病毒病的主要方法主要靠早發現、早隔離、早燒毀,以防止病毒的傳播和蔓延。採用經脫除病毒的優質組織培養無性繁殖種苗,是防止大面積病毒病發生的有效措施。要及時殺滅害蟲,做好修剪器具的消毒,防止交互感染。
『肆』 有什麼方法殺病毒
干擾素就是特異的殺死病毒的手法,可以抑制病毒核酸逆轉錄酶的活性,不會逆轉錄的病毒基本上也就不存在了(沒法繁殖)。
實驗中分離出的病毒是不用特地殺死的,病毒必須在活細胞里寄生,離開活體組織在短時間內就會因為環境條件(高溫低溫,低濕度,射線等等)解體,可以說,病毒離體幾乎不能生存。這也是為什麼培養病毒時我們經常用活雞胚進行培養,離體的病毒十分脆弱,無法培養。
人體內的病毒說實話很難通過直接方法殺死,免疫系統還是殺死病毒的重要一環。
體內的一種T細胞能夠識別被病毒核酸鑲嵌的體細胞,並把它當做「異己」,分泌信息物質啟動細胞程序性死亡,講解感染細胞的遺傳物質,從而將病毒的DNA等講解。
『伍』 病毒常用的培養方法有哪些
適齡雞胎接種,傳代培養,組織細胞培養,易感動物接種。
『陸』 病毒鑒定常用方法有哪些
寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學交叉反應,目前主要採用病毒核酸檢測。
開展蚊媒寨卡病毒檢測時,對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測。
開展寨卡病毒實驗室檢測時,應同時考慮登革病毒和基孔肯亞病毒感染可能。登革病毒和基孔肯亞病毒實驗室檢測應按照相應的技術指南開展。
(一)臨床標本檢測。
1.病原學檢測
病原學檢測主要適用於急性期血液標本,一般認為發病7天內檢測陽性率高。
(1)核酸檢測:採用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。
(2)病毒分離:將標本接種於蚊源細胞(C6/36)或哺乳動物細胞(BHK21、Vero)進行分離培養,出現病變以後,用檢測核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內接種進行病毒分離。
2.血清學檢測
(1)血清特異性IgM抗體:發病3天後可檢出病毒特異性IgM抗體,但發病7天後檢出率高。可採用ELISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性,提示患者可能新近感染寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應,易於產生假陽性。
(2)中和抗體:採用空斑減少中和試驗方法檢測。患者恢復期血清中和抗體陽轉或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染,可以確診。
(二)媒介標本檢測。
1.標本處理
將分類後的伊蚊成蚊或幼蟲,按照採集地點,每10~20隻為一份進行研磨處理。
2.病毒核酸檢測
用RT-PCR的方法進行寨卡病毒核酸檢測
3.病毒分離
病毒核酸陽性的標本進行病毒分離。
『柒』 目前病毒分離培養的主要方法是哪一種
1.動物接種
這是最原始的病毒培養方法。常用的動物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接種的途徑有鼻內、皮下、皮內、腦內、腹腔內、靜脈等。根據病毒種類不同,選擇敏感動物及適宜接種部位。
2.雞胚接種雞胚對多種病毒敏感。根據病毒種類不同,可將標本接種於雞胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊或絨毛尿囊膜上。
3.組織培養
將離體活組織塊或分散的活細胞加以培養,統稱為組織培養。組織培養法有三種基本類型:器官培養、移植培養和細胞培養。細胞培養最常用於培養病毒,根據細胞的來源,染色體特性及傳代次數又可分為下列類型:原代和次代細胞培養,二倍體細胞株和傳代細胞系。
『捌』 病毒的培養方法有哪些為什麼不能用一般培養基來培養病毒
適齡雞胎接種,傳代培養,組織細胞培養,易感動物接種。不可以。病毒是寄生在活體上的生物,而培養基是沒有生命的有機物或無機物,病毒在上面不能生存。
病毒的結構是有一個DNA,和蛋白質外殼,和其它功能性的附屬結構。
病毒不能自己生產蛋白質,它只有在寄生在活體上之後,把自己的DNA,注入到寄主細胞內,和寄主DNA結合,然後表達,利用寄主的蛋白質、DNA的和成功能,和成自己的蛋白質外殼,DNA,然後這些DNA和外殼在及主細胞破裂之後溢出,重新組合成好多病毒,感染其它細胞或寄主。 可以看出,這個細胞必須有生命(新陳代謝,能合成蛋白質DNA等),培養基是不行的。
『玖』 培養流感病毒的方法有哪幾種
雞胚傳代培養、MDCK細胞培養、本動物回歸培養。