細菌接種檢驗常用的接種方法

A. 微生物學常用的接種技術有哪些各有何特點

細菌的接種方法有很多種，如劃線法、塗布法、傾注法、斜面接種法、液體培養基接種法、螺旋接種法等，其方法和應用各有不同。
一、劃線法：
此法主要用於菌種分純，獲得單菌落.

由接種環沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，並逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養後，可在平板表面得到單菌落。

優點：可以觀察菌落特徵，對混合菌進行分離。

缺點：不能用於菌落計數。

二、塗布法：

此法主要用於菌落總數計數.

先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中，然後用無菌吸管吸取0.1ml 菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L 型玻璃棒將菌液在平板上塗抹均勻，將塗抹好的平板平放於桌上20~30min，使菌液滲透入培養基內，然後將平板倒轉，保溫培養，至長出菌落後即可計數。

優點：可以計數，可以觀察菌落特徵。

缺點：接種前需梯度稀釋，吸收量較少，較麻煩，平板不幹燥效果不好，容易蔓延。

三、傾倒法：

此法主要用於菌落總數的計數.

吸取1ml 菌液加入平板中，倒入已融化並冷卻至45~50℃的細菌培養基，輕輕轉動平板，使菌液與培養基混合均勻，冷疑後倒置，適溫培養。至長出菌落後即可計數。
優點：可以計數，較方便。

缺點：接種前需梯度稀釋，不能觀察菌落特徵，不適用於嚴格好氧菌和熱敏感菌。

四、斜面接種法：

此法主要用於保存菌種，或觀察細菌的某些生化特性和動力.

用接種環或接種針伸入菌種管內，挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養管內，先從斜面底部到頂端拖一條接種線，再自下而上蜿蜒劃線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。接種完成之後，用火焰滅菌培養管口，並塞上棉塞，置於37℃培養。

五、液體培養基接種法：
此法主要用於菌液比濁實驗

用滅菌接種環挑取菌落或標本，在試管內壁與液面交界處輕輕研磨，使細菌均勻得散落在液體培養基中。

六、螺旋接種法：
此法主要用於菌落總數計數
可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細菌接種。對數減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉式培養基表面。培養基上每一點的容量可以被知曉和校準。菌液的濃度可以通過培養皿上一定區域的菌落數量除以同區域樣品分注量來計算。

優點：螺旋接種法菌液無需稀釋（其他接種方法均需經過梯度稀釋才能計菌落數），自動化接種，效率高，可節省3/4 的耗材和時間。

缺點：產品成本高，適用於樣品量比較大的實驗。

B. 微生物檢驗細菌的接種方法

微生物檢驗細菌的接種方法

常用的細菌接種方法有平板劃線分離法、斜面接種法、穿刺接種法、液體和半固體接種法、塗布接種法等。下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗細菌的接種方法的知識，歡迎閱讀。

一、平板劃線分離法

平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養後生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。有時這種單菌落並非都由單個細胞繁殖而來的，故必須反復分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的的。

為方便劃線，一般培養基不宜太薄，每皿約傾倒20ml培養基，培養基應厚薄均勻，平板表面光滑。劃線分離主要有分區劃線法和連續劃線法兩種(如圖1， A、B)。

分區劃線法是將平板分四區，故又稱四分區劃線法。劃線時每次將平板轉動60~70°劃線，每換一次角度，應將接種環上的菌燒死後，再通過上次劃線處劃線;

另一種連續劃線法是從平板邊緣一點開始，連續作波浪式劃線直到平板的另一端為止，當中不需灼燒接種環上的菌。

1)連續劃線法

將瓊脂平皿半開蓋倒置於培養箱內至無冷凝水，接種環於酒精燈外焰燒至紅透，接種棒也要充分灼燒，最後再集中燒接種環至紅。

輕輕搖勻待接種試管，左手手心托待接種試管底側部，右手執接種環，右手小指拔下試管塞，於酒精燈附近將接種環伸進試管，稍候，再插入待接接種液中，蘸一下，取滿一環，抽出、燒塞、蓋蓋、放回試管架。或將接種環通過稍打開皿蓋的縫隙伸入平板，在平板邊緣空白處接觸一下使接種環冷卻，然後以無菌操作接種環直接取平板上待分離純化的菌落。

於靠近酒精燈處打開平皿蓋約30°，右手將環伸進平皿，將菌種點種在平板邊緣一處，輕輕塗布於瓊脂培養基邊緣(如圖2)，抽出接種環，蓋上平皿蓋，然後將接種環上多餘的培養液在火焰中灼燒，打開平皿蓋約30°伸入接種環，待接種環冷卻後，再與接種液處輕輕接觸，開始在平板表面輕巧滑動劃線，接種環不要嵌入培養基內劃破培養基，線條要平行密集，充分利用平板表面積，注意勿使前後兩條線重疊，劃線完畢，關上皿蓋。灼燒接種環，待冷卻後放置接種架上。培養皿倒置於適溫的恆溫箱內培養(以免培養過程皿蓋冷凝水滴下，沖散已分離的菌落)。培養後在劃線平板上觀察沿劃線處長出的菌落形態，鏡檢後再接種斜面。

2)分區劃線法

取菌、接種、培養方法與“連續劃線法”相似。

分區劃線法分離時平板分四個區，故又稱四分區劃線法。其中第4區是單菌落的主要分布區，故其劃線面積應最大。為防止第4區內劃線與1、2、3區線條相接觸，應使4區線條與1區線條相平行，這樣區與區間線條夾角最好保持120°左右。

先將接種環沾取少量菌在平板1區劃3~5條平行線，取出接種環，左手關上皿蓋，將平板轉動60~70°，右手把接種環上多餘菌體燒死，將燒紅的接種環在平板邊緣冷卻，再按以上方法以1區劃線的菌體為菌源，由1區向2區作第2次平行劃線。第2次劃線完畢，同時再把平皿轉動約60~70°，同樣依次在3、4區劃線。劃線完畢，灼燒接種環，關上皿蓋，同上法培養，在劃線區觀察單菌落。

二、斜面接種法

該法主要用於單個菌落的純培養、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

(1)左手平托兩支試管，拇指按住試管的底部。外側一支試管是斜面上長有菌苔的'菌種試管，內側一支是待接的空白斜面，兩支試管的斜面同時向上。用右手將試管塞旋松，以便在接種時容易拔出。

(2)右手拿接種環(如握毛筆一樣)，在火焰上先將環端燒紅滅菌，然後將有可能伸入試管的其餘部位也過火滅菌.

(3)將兩支試管的上端並齊，靠近火焰，用右手小指和掌心將兩支試管的試管塞一並夾住拔出，試管塞仍夾在手中，然後讓試管口緩緩過火焰。注意不得將試管塞隨意丟於桌上受到沾污，試管口切勿燒得過燙以免炸裂。

(4)將已灼燒的接種環伸入外側的菌種試管內。先把接種環的先端觸及無菌苔的培養基上使其冷卻(如果操作迅速，此時接種環尚未完全冷卻)。再根據需要用接種環沾取一定量的菌苔，注意勿刮破培養基。將沾有菌苔的接種環迅速抽出試管，注意勿使接種環碰到管壁或管口上。

(5)迅速將沾有菌種的接種環伸入另一支待接斜面試管的底部，輕輕向上劃線(直線或曲線，根據需要確定)，勿劃破培養基表面。

(6)接好種的斜面試管口再次過火焰，試管塞底部過火焰後立即塞入試管內。

(7)將沾有菌苔的接種環在火焰上燒紅滅菌。先在內焰中燒灼，使其乾燥後，再在外焰中燒紅，以免菌苔驟熱，會使菌體爆濺，造成污染。

(8)放下環後，再將試管塞旋緊，在試管外面上方距試管口2～3cm處貼上標簽。

(9)28℃～37℃恆溫培養。

斜面接種方法及無菌操作過程如下具體操作過程見圖3。

三、穿刺接種法

用接種針經火焰滅菌，沾取少量菌種，垂直地穿入試管固體培養基中心至底部，然後將挑起菌落的接種針平行於管壁插入瓊脂斜面底部、沿著原接種線將針拔出、燒試管塞和試管口、塞上試管塞，再將接種針上殘留的菌體在火焰上燒掉。要做到手穩、動作輕巧快速。見下圖4。(a:垂直接種法，b：水平接種法)

四、液體和半固體接種法

1)液體接種法

包括從外面菌種接人培養液，或從液體菌種接入液體培養液，兩種情況都可以用接種環接種。但在培養量比較大的情況下，液體接種宜採用移液管接種，要求無菌操作。

左手持試管，右手將燒灼過的接種環伸入菌種管，待冷卻後，取菌液一環，立即移入培養基管中，在接近液面的管壁上輕輕研磨，然後將試管稍傾斜，並沾取少許液體調和，使菌液混合於培養基中

2)半固體培養基接種法

將燒灼過的接種針插入菌種管冷卻後，沾取菌液少許，立即垂直插入半固體培養基的中心至接近於管底處，但不可直刺至管底，然後循原路退出(圖5，B)。管口通過火焰，塞上棉塞，接種針燒灼滅菌後放下。

將上述已接種好的培養物， 37℃度恆溫箱內培養，24小時後取出觀察結果。

五、塗布接種法

將瓊脂平皿半開蓋倒置於培養箱內至無冷凝水，用無菌移液管吸取菌懸液0.1mL，滴加於培養基平板上，右手持無菌玻璃塗棒，左手拿培養皿，並用拇指將皿蓋打開一縫，在火焰旁右手持玻璃塗棒與培養皿平板表面將菌液自平板中央均勻向四周塗布擴散，切忌用力過猛將菌液直接推向平板邊緣或將培養基劃破。接種後，將平板倒置於恆溫箱中，培養觀察。

C. 接種細菌的三種方法各有什麼用途

接種細菌的方法各有什麼用途：

1、平面接種法：此方法主要用於鑒定或保存菌種，或觀察細菌的某些生化特性和動力。

2、菌落分純法：此方法主要用於分離瓊脂平板上的混合菌。

3、液體培養基接種法：此方法可用於比濁試驗中。

4、平板劃線接種法（又稱分離培養法）：平板劃線接種法為最常用的分離培養細菌的方法，通過平板劃線後，可使細菌分散生長，形成單個菌落，有利於從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法比較多，其中以分區劃線發育曲線劃線法較為重用。其目的都要時細菌呈現單個菌落生長，便於同雜菌菌落鑒別。

5、純培養細菌接種法：用於培養保存菌種及其實驗用。

6、半固體培養基穿刺培養法：用於保存菌種及間接觀察細菌之動力（無動力之細菌僅沿穿刺線生長，清晰可見；有動力的細菌使培養基呈現渾濁樣，穿刺線甚至難以看出。）

接種注意事項：

1、在超凈工作台上操作，工作台在使用前要紫外消毒，酒精消毒等。

2、應在酒精燈火焰前操作。

3、取菌種前灼燒接種針或接種環（要燒紅）。

4、燒紅的接種針（環）少使冷卻在取菌種，以免燒死菌種。

5、接種後應盡快塞上面塞。

D. 高中微生物常用的接種方法有哪些

微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作，主要用於微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環或接種針等專用工具，從一個培養皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉接到另一個培養基中進行培養，從而實現所需微生物的純化鑒定，獲得沒有雜菌污染的單純菌落等。
接種的方法有很多，按培養基種類可分為利用固體培養基和利用液體培養基，以及居中的半固體培養基。
固體培養分離，有塗布平板法，倒平板法，平板劃線法，稀釋搖管法等。大部分細菌和真菌用固體培養法即可以得到較滿意的分離結果了。
液體培養基常用稀釋法，比較繁瑣，一般需要重復進行幾次。

E. 如何選擇細菌接種方法

細菌的接種方法有很多種，如劃線法、塗布法、傾注法、斜面接種法、液體培養基接種法、螺旋接種法等，其方法和應用各有不同，下面進行解釋以幫助實驗人員選擇操作。

劃線法：此法主要用於菌種分純，獲得單菌落

由接種環沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，並逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養後，可在平板表面得到單菌落。

優點：可以觀察菌落特徵，對混合菌進行分離。

缺點：不能用於菌落計數。

塗布法：此法主要用於菌落總數計數

先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中，然後用無菌吸管吸取0.1ml 菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L 型玻璃棒將菌液在平板上塗抹均勻，將塗抹好的平板平放於桌上20~30min，使菌液滲透入培養基內，然後將平板倒轉，保溫培養，至長出菌落後即可計數。

優點：可以計數，可以觀察菌落特徵。

缺點：接種前需梯度稀釋，吸收量較少，較麻煩，平板不幹燥效果不好，容易蔓延。

傾倒法：此法主要用於菌落總數的計數

吸取1ml 菌液加入平板中，倒入已融化並冷卻至45~50℃的細菌培養基，輕輕轉動平板，使菌液與培養基混合均勻，冷疑後倒置，適溫培養。至長出菌落後即可計數。

優點：可以計數，較方便。

缺點：接種前需梯度稀釋，不能觀察菌落特徵，不適用於嚴格好氧菌和熱敏感菌。

斜面接種法：此法主要用於保存菌種，或觀察細菌的某些生化特性和動力

用接種環或接種針伸入菌種管內，挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養管內，先從斜面底部到頂端拖一條接種線，再自下而上蜿蜒劃線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。接種完成之後，用火焰滅菌培養管口，並塞上棉塞，置於37℃培養。

液體培養基接種法：此法主要用於菌液比濁實驗

用滅菌接種環挑取菌落或標本，在試管內壁與液面交界處輕輕研磨，使細菌均勻得散落在液體培養基中。

螺旋接種法：此法主要用於菌落總數計數

Spiral plater 可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細菌接種。對數減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉式培養基表面。培養基上每一點的容量可以被知曉和校準。菌液的濃度可以通過培養皿上一定區域的菌落數量除以同區域樣品分注量來計算。

優點：螺旋接種法菌液無需稀釋（其他接種方法均需經過梯度稀釋才能計菌落數），自動化接種，效率高，可節省3/4 的耗材和時間

缺點：產品成本高，適用於樣品量比較大的實驗

F. 生物細菌培養中常用的接種方法有哪兩種

生物細菌培養中常用的接種方法有哪兩種
答：稀釋塗布平板法平板劃線法

G. 微生物接種方法有哪幾種

接種常見方法有：平板劃線接種法、斜面接種法、傾注培養法、穿刺接種法、液體接種法。

一、平板劃線分離法

平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養後生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。

二、斜面接種法

該法主要用於單個菌落的純培養、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

三、穿刺接種法

穿刺培養，是指將帶有欲培養微生物的接種針深插至半固體培養基（瓊脂含量0.2%〜1.0%）中接種，並進行微生物固體深層培養的一種方法，主要用於厭氧或兼性厭氧微生物的培養。

四、液體接種法

液體培養，是指將微生物直接接種於液體培養基中，並不斷振盪或攪拌，使微生物均勻地在液體培養基中生長繁殖的一種培養方法。液體培養適用於好氧微生物和植物組織培養，以迅速得到大量繁殖體為目的。

五、塗布接種法

微生物學實驗中的一種操作方法。由於將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且採用稀釋倒平台法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是塗布平板法。

(7)細菌接種檢驗常用的接種方法擴展閱讀：

接種注意事項

1、每次接種時間最長不得連續超過2小時。

2、操作時，接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具，種塊碰到外面物體則作廢。

3、一般用種量：每支試管母種可擴繁一級種100支左右；擴接原種6～8瓶。

H. 微生物接種技術有哪些

七、塗布接種

先倒好平板，讓其凝固，然後再將菌液倒入平板上面，迅速用塗布棒在表面作來回左右的塗布，讓菌液均勻分布，就可長出單個的微生物的菌落。