❶ 分離培養酵母菌的培養基什麼方法滅菌
(1)在酵母菌的分離與純化過程中,需將培養基的pH調至酸性.對培養基進行滅菌常採用高壓蒸汽滅菌法.
(2)在選擇培養並獲得酵母菌單菌落的過程中,可採用平板劃線或稀釋塗布平板法將含酵母菌的樣液接種於固體培養基表面,對獲得的菌種可採用甘油管藏的方法長期保存.
(3)在無氧條件下,酵母菌將丙酮酸分解成酒精和CO 2 ,在發酵結束前,接種在果汁中的酵母菌種群數量呈現S型增長.
(4)醋酸菌在O 2 充足條件下可將果酒中的乙醇變為乙醛,再變為醋酸.
故答案為:
(1)酸性 高壓蒸汽滅菌法
(2)平板劃線或稀釋塗布平板 甘油管藏
(3)酒精和CO 2 S型
(4)O 2 乙醛
❷ 分離純化微生物的方法有哪些各方法適用分離什麼菌種
主要有
1、稀釋倒平板法
首先把微生物懸液作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然後分別取不同稀釋液少許,與已熔化並冷卻至50℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻後,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固後製成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養一定時間即可出現菌落。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨後挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養。
2.、稀釋塗布平板法
將已熔化的培養基倒入無菌平皿,製成無菌平板,冷卻凝固後,將一定量的微生物懸液滴加在平板表面,再用無菌玻璃塗棒將菌液均勻分散至整個平板表面,經培養後挑取單個菌落。
3、平板劃線法
將微生物樣品在固體培養基表面多次作「由點到線」稀釋而達到分離。
4、稀釋搖管法
先將一系列盛無菌瓊脂培養基的試管加熱使瓊脂熔化後冷卻並保持在50℃左右,將待分離的材料用這些試管進行梯度稀釋,試管迅速搖動均勻,冷凝後,在瓊脂柱表面傾倒一層滅菌液體石蠟和固體石蠟的混合物,將培養基和空氣隔開。
❸ 破碎酵母細胞的方法
酵母細胞破碎方法很多。有化學、生化、超聲波、機械研磨,使用果汁勻漿機勻漿破碎,以及近幾年誕生的納米級微生物細胞破碎機的廣泛應用。1、化學法破碎酵母細胞
使用NaOH水解酵母細胞。細胞濃度10%,水90%,鹼解24h,50·C,pH值為鹼性,結果見表1。當酵母細胞濃度10%,水90%,溫度為50%,pH2(3、4)時見表2。
由表1、表2可以看出,鹼解、酸解酵母細胞在啤酒、醬油生產上影響物理化學指標,啤酒輔料可以增加,但口味變壞,雖說醬油發酵周期可縮短但氯化物含量超標。
2 生化法破碎酵母細胞,一是自溶,二是酶解 自溶法破碎酵母細胞,表面上看很經濟,但保濕操作需要保濕設備而且作用時間長,條件要求高。試驗結果見表3。
由於破碎率低總氮低,在啤酒、醬油生產上應用沒有好的效果,氯化完全、硫酸鹽不高,經濟效益不明顯,再加上自溶時間長,很難與生產同步
生產方法2 主要是使用酶制劑破碎酵母細胞。在水、酵母中加0.1%的A酶,0.1%的F酶,0.05%。A+0.05%。F分別做試驗。此時酵母濃度10%,水90%,pH7.0,溫度68·C,作用時間2h,結果見表4。
從表4可知,酶解時間較長,破液對啤酒、醬油質量沒有影響,需較高保濕條件,否則很難在生產中應用
3 珠磨機與超聲波破碎酵母細胞試驗
珠磨機破碎率較低,在12h~24h內研磨,破碎率最高可達80%,產量小很難工業化生產,超聲波破碎只能在試驗室內進行,不能用於生產,兩者均屬試驗室設備
4 高壓勻漿機與納米級微生物細胞破碎機破碎 高壓勻漿機結構如圖1所示
高壓液流夾帶酵母進到噴嘴3碰撞到勻漿閥1後折彎,碰撞到耐磨壁2上,酵母細胞發生破碎。在酵母破碎後,胞內粘和物符到閥1和耐磨壁,呈現較大緩沖作用,影響細胞破碎,這種機械需多次反復破碎才會有較好的效果,破碎率不會超過80%。
納米級微生物細胞破碎機結構如圖2。
1 對撞室,2 振盪片,3 左噴嘴,4 右噴嘴
圖2 納米級微生物細胞破碎機結構圖
當高壓液流夾帶酵母細胞進入左右噴嘴3和4,在對撞室1中相撞,之後碰撞到震盪片2上,使酵母細胞在對撞室和發出2x10 4HZ頻率的震盪片上實現兩級瞬時破碎,破碎率可達97.8%,對撞室和震盪片上不存在粘稠物,有利酵母細胞破碎
在勻漿機工作中,假設有一質點,附著閥1上,受到沖力
該質點質量,1g,即0.001kg
流體速度,
❹ 微生物的分離與純化的常用方法有哪些
分離:
稀釋倒平皿法
平板劃線法
單細胞挑取法
利用選擇培養基分離法
純化:
1、若是你不知道你所要純化的微生物的特徵,最簡單的不知道它的菌落特徵和形態大小,那現根據你要分離菌的特性,找適合的初篩培養基,找到你要純化的菌。如纖維素菌,你在培養基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源,這樣就可以篩選出分解纖維素的菌。然後再用下面的方法繼續純化。
2、若你知道目標菌的形態,可以直接挑混合菌劃平板,直到長出當個菌落,並且在鏡下沒有雜菌即可;或者挑菌稀釋塗布得到當個菌落也行。