血球計數板的使用方法

1. 血球計數板的使用說明

以計數酵母菌為例
(1)用血球計數板計數酵母菌懸液的酵母菌個數。
(2)樣品稀釋的目的是便於酵母菌懸液的計數,以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可。
(3)將血球計數板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數室上加蓋專用的厚玻片。
(4)將稀釋後的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置於蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多餘的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數室內。
(5)計數時,如果使用16格×25格規格的計數室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數.如果規格為25格×16格的計數板,除了取其4個對角方位外,還需再數中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數。
(6)當遇到位於大格線上的酵母菌，一般只計數大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數下方和左方線上的酵母細胞)。
(7)對每個樣品計數三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數。
3.計算公式
(1)16格×25格的血球計數板計算公式：
酵母細胞數/ml=100小格內酵母細胞個數/100×400×10四次方×稀釋倍數
(2)25格x16格的血球計數板計算公式：
酵母細胞數/ml=80小格內酵母細胞個數/80×400×10四次方×稀釋倍數
4.血球計數板的清潔
血球汁數板使用後，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗後自行晾乾或用吹風機吹乾，或用95%的乙醇,無水乙醇,丙酮等有機溶劑脫水使其乾燥。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉澱物。若不幹凈，則必須重復清洗直到干凈為止。

2. 血球計數板使用條件是什麼

血球計數板使用條件的話是在一定條件下，比如說空腹啊或者是其他的環境。

3. 血球計數板使用時的注意事項都有哪些

取樣要均勻，要將懸液搖勻。加樣時要注意用滴管從兩側溝槽內沿蓋破片的下緣滴入一小滴，不能從玻片上滴。計數時，注意不能重復計數，一般記上不記下、記左不記右。

4. 血球計數板是什麼樣的,怎麼用呢

在玻片上有規則的小格子，通過顯微鏡數每個小格子里有多少個細胞，以此計算溶液中細胞濃度

5. 血球計數板怎麼用啊

拿一個計數板，他中間不是有個計數的小方格么？在那上面蓋上蓋玻片，必須先蓋上，在方格旁邊的槽里滴加樣液，然後讓樣液自己流入方格中，你就可以在顯微鏡下計數了

6. 血球計數板怎麼洗

可以用洗滌劑，不過一般用蒸餾水沖洗，軟毛刷不算硬物，如果粘性較大，就用軟毛刷。

1、血球計數板常用於計算一些細菌、真菌、酵母等微生物的數量，是一種常見的生物學工具。

2、利用血球計數板在顯微鏡下能直接數出每個小方格中的微生物的個體數目，根據該小格所佔的體積，快速地推算出單位體積的溶液中含有的微生物總數。

(6)血球計數板的使用方法擴展閱讀：

血球計數板的注意事項：

1、鏡檢計數室。因前一次清洗不到位，或者保存過程中存在污染，更或者因操作不當導致的計數室存在劃痕，若不及時清洗或更換，則會對後期實驗計數產生極大影響。

2、搖勻後取液。在吸出培養液進行計數之前，需輕輕震盪試管，使菌體分布均勻，防止聚沉澱，從而提高計數的代表性和准確性 。

3、靜置片刻再計數。靜置5 min，待菌懸液不再漂浮流動，酵母菌全部沉降後再將血球計數板放到顯微鏡下進行計數。先在低倍鏡下找到需要觀察計數的大方格及中方格，將中方格移到視野中央，然後撥動轉換器移至高倍鏡進行計數 。

4、掌握計數原則。一般選擇觀察的菌液濃度控制在每個小方格內有4或5個菌體為宜，若其濃度太高，可適當稀釋；並採用「計上不計下，計左不計右」的計數原則 。

7. 血球計數板的使用方法

使用方法如下：

1.視待測菌懸液濃度，加無菌水適當稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數可數為度。

2．取潔凈的血球計數板一塊，在計數區上蓋上一塊蓋玻片。

3．將菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數板中間平台兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數區，勿使氣泡產生，並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上（不要使計數區兩邊平台沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片後，造成計數區深度的升高），然後加蓋蓋玻片（勿使產生氣泡）。

4．靜置片刻，使細胞沉降到計數板上，不再隨液體漂移。將血球計數板放置於顯微鏡的載物台上夾穩，先在低倍鏡下找到計數區後，再轉換高倍鏡觀察並計數。由於生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。

5．計數時若計數區是由16個中方格組成，按對角線方位，數左上、左下、右上、右下的4個中方格（即100小格）的菌數。如果是25個中方格組成的計數區，除數上述四個中方格外，還需數中央1個中方格的。

菌數（即80個小格）。為了保證計數的准確性，避免重復計數和漏記，在計數時，對沉降在格線上的細胞的統計應有統一的規定。如菌體位於大方格的雙線上，計數時則數上線不數下線，數左線不數右線，以減少誤差。即位於本格上線和左線上的細胞計入本格，本格的下線和右線上的細胞按規定計入相應的格中。見右圖：即本格中計數細胞為3個。

6．對於出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品重復計數2-3次（每次數值不應相差過大，否則應重新操作），按公式計算出每mL（g）菌懸液所含細胞數量。

7．測數完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗凈後自行晾乾或用吹風機吹乾，放入盒內保存。

(7)血球計數板的使用方法擴展閱讀:

計數公式

紅細胞數(RBCs)/L=N/5×25×10×106×200

N為：五個中方格的RBC總數

N/5為：5個中方格（粉紅色區域）的平均RBC數量（然後推及至中央大方格中每一個中方格RBC的數量）

N/5×25為：中央大方格RBC總數（即：0.1mm3（ul）的RBC總數）

N/5×25×10為：1mm3（ul）RBC總數

N/5×25×10×106為：1L的RBC總數

200為：血液的稀釋倍數

公式簡化後：紅細胞數/L=N×5×107×稀釋倍數

公式前面部分都是換算成每微升血多少該計數細胞；最後都是由微升換算到升，乘以10的6次方

(1)目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物鏡測微尺格數×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數

(2)以同樣方法,分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度.

(3)如此測定後的目鏡測微尺的尺度,僅適用於測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數.若更換物鏡,目鏡的放大倍數時,必須再進行校正標定.

參考資料:血球計數板-網路

8. 血球計數板的構造使用

血球計數板是由一塊比普通載玻片厚的特製玻片製成的。玻片中有四條下凹的槽,構成三個平台.中間的平台較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面，刻有一個方格網。方格網上刻有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數室,供微生物計數用。這一大方格的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.1mm3。
計數室通常有兩種規格。一種是大方格內分為16中格，每一中格又分為25小格；另一種是大方格內分為25中格，每一中格又分為16小格。但是不管計數室是哪一種構造；它們都有一個共同的特點，即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成，見圖。

9. 簡述血球計數板的結構和計數原理

用優質厚玻璃製成。每塊計數板由H形凹槽分為2個同樣的計數池。計數池兩側各有一支持柱，將特製的專用蓋玻片覆蓋其上，形成高0.10mm的計數池。在血球計數板上，刻有一些符號和數字，XB-K-25為計數板的型號和規格，表示此計數板分25個中格。

計數原理：在血球計數板上，刻有一些符號和數字，XB-K-25為計數板的型號和規格，表示此計數板分25個中格。

計數區邊長為1mm，則計數區的面積為1mm，每個小方格的面積為1/400mm。蓋上蓋玻片後，計數區的高度為0.1mm，所以每個計數區的體積為0.1mm，每個小方格的體積為1/4000mm。

(9)血球計數板的使用方法擴展閱讀

誤差控制：

血細胞計數的誤差分別來源於技術誤差和固有誤差。其中由於操作人員采血不順利，器材處理、使用不當，稀釋不準確，細胞識別錯誤等因素所造成的誤差屬技術誤差；而由於儀器（計數板、蓋片、吸管等）不夠准確與精密帶來的誤差稱儀器誤差，

由於細胞分布不均勻等因素帶來的細胞計數誤差屬於分布誤差或計數域誤差（filederror）。儀器誤差和分布誤差統稱為固有誤差或系統誤差。技術誤差和儀器誤差可通過規范操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正，但細胞分布誤差卻難於徹底消除。

10. 血球計數板的使用方法

（1）構造：血球計數板是一塊特製的載玻片，它的上表面有4條下凹的槽，構成3個平台，中間的平台又被一短橫槽隔為兩半，每半邊各有一個方格網，每個方格網上有9個大小相等的大方格，其中只有中間的一個大方格為計數室，供微生物計數用，這一大方格的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.1mm3。

（2）規格：

一種是大方格內分為25中方格，每一中格又分為16小方格；另一種是大方格內分為16中方格，每一中方格又分為25小方格。但是不管計數室是哪一種構造，它們都有一個共同的特點，即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成，見圖：

（3）使用方法

①取清潔乾燥的血球計數板，加蓋玻片蓋住網格和兩邊的槽。

②將待測菌液充分搖勻後，用無菌吸管吸少許，由蓋玻片邊緣或槽內加入計數板，使其自行滲入計數室內，計數室內不能有氣泡。靜置5-10分鍾。

③在低倍鏡下找到小方格網後更換高倍鏡觀察計數，上下調動細螺旋，以便看到小室內不同深度的菌體。位於分格線上的菌體，只數兩條邊上的，其餘兩邊不計數。即數上線就不數下線，數左邊線就不數右邊線。

④計數時，若使用刻度為25中方格×16小方格的計數板，計數四個角的4個中方格，及中央1個中方格的菌數（即80小方格）；若使用刻度為16中方格×25小方格的計數板，就數四個角的4個中方格（即100小方格）內的菌數。每小方格中菌數以5-10個為宜，如菌液過濃可適當稀釋。

⑤每個樣品重復計數2-3次，取其平均值，按下式計算樣品中的菌數。

刻度為25中方格×16小方格的計數板：

刻度為16中方格×25小方格的計數板：

⑥試驗結束後要清洗和整理試驗用具，特別注意血球計數板不能用試管刷蘸洗滌劑擦洗，正確的做法是浸泡和沖洗，洗後自行晾乾或用吹風機吹乾。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉澱物，若不幹凈，則必須重復清洗直到干凈為止。