活菌常用的計數方法

⑴ 微生物計數方法有哪些

測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種： 1.血細胞計數法 將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數. ①此法的缺點是不能區分死菌和活菌. ②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數. ③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化 2.稀釋塗布平板法 原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌. ①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目 ②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示. ③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等. ④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞. 3.濾膜法 濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數. 此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目. 此法也是統計樣品中活菌的數目. 4.比濁法 原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確. 5.顯微鏡直接計數法 在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況. 另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.

⑵ 什麼是活菌計數法

活菌計數法，其原理是每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。

具體操作
將待測樣品經一系列 10 倍稀釋，然後選擇三個稀釋度的菌液，分別取 0.2ml 放入無菌平皿，再倒入適量的已熔化並冷至 45 ℃ 左右的培養基，與菌液混勻，冷卻、待凝固後，放入適宜溫度的培養箱或溫室培養，長出菌落後，計數，按下面公式計算出原菌液的含菌數：
每毫升原菌液活菌數=同一稀釋度三個以上重復平皿
菌落平均數×稀釋倍數× 5
此法還可以將稀釋的菌液取 0.2ml 加到已制備好的平板上，然後用無菌塗棒將菌液塗布整個平板表面，放入適宜溫度下培養，計算菌落數，再按上公式計算出每毫升原菌液的所含活菌總數。

⑶ 微生物計數方法有哪些

測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種：
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化
2.稀釋塗布平板法
原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.
④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數.
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.
此法也是統計樣品中活菌的數目.
4.比濁法
原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確.
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況.
另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.

⑷ 下面哪一種方法常用單細胞活菌的計數

活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法，是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然後將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數，可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數的方法，也是目前國際上許多國家所採用的方法。使用該法應注意：①一般選取菌落數在30～300之間的平板進行計數，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、葯品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數法。

⑸ 統計活菌數量的方法都有哪些

統計菌落數目的方法有直接計數法和間接計數法兩種。
1. 直接計數法
直接計數法是將稀釋的樣品滴在計數板上，蓋上蓋玻片，然後在顯微鏡下計數4〜5個中格的細菌數，並求出每個小格所含細菌的平均數，再按公式求出每 毫升樣品中所含的細菌數。計算公式 為:每毫升原液所含細菌數=每小格平 均細菌數X400X1 000X稀釋倍數。這種方法的優點是所需設備比較簡單，能迅速得到結果，而且在計數的同時還可以觀察到所研究的微生物的形態特徵； 缺點是不能區分死菌與活菌。
2. 間接計數法
在應用稀釋塗布平板法計數時，首先要將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液，盡量使微生物細胞分散開，再把稀釋液接種到平板上，進行培養觀察。但值得注意的是，統計的菌落數往往比活菌 的實際數目低，而且統計的結果一般用 菌落數而不用活菌數來表示。計算公式為:每克樣品中的菌落數= (C+V)X M，其中，C表示某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V表示塗布平板時所 用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。

⑹ 活菌計數法的其他方法

除上述兩種常用的計數方法外，還有膜過濾法、比濁法。膜過濾法是當樣品中菌數很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器。然後將濾膜乾燥、染色，並經處理使膜透明，再在顯微鏡下計算膜上 ( 或一定面積中 ) 的細菌數；比濁法原理是在一定范圍內，菌的懸液中細胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌越多，光密度越大。因此可以藉助於分光光度計，在一定波長下，測定菌懸液的光密度，以光密度 (O ． D ． ) 表示菌量。實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內，否則不準確。微生物計數法，發展迅速，現有多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法。

⑺ 微生物計數方法有哪些

微生物計數方法有：血細胞計數法、稀釋塗布平板法、濾膜法、比濁法、顯微鏡直接計數法等等。
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上，在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數，並求出每個小格所含細菌的平均數，再以此為依據，估算總菌數。
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌。
②對壓在小方格界線上的細菌，應當取平均值計數。
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化。
2.稀釋塗布平板法
原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。培養基表面生長的一個菌落，來源於樣品稀釋液中的一個活菌。
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，原因是當兩個活多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示。
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定。但不適於測定樣品中絲狀體微生物，例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等。
④此法若不培養成菌落，可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上，經固定染色後在顯微鏡下計數，這樣又稱塗片計數法。染色可用台盼藍，台盼藍能使死細胞染成藍色，可分別計數死細胞和活細胞。

⑻ 若要測定培養液中微生物的菌體數,若要測定其活菌數量,用什麼方法

（1）微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、氮源、無機鹽四類，培養基配製時，基本過程為計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板五個步驟．
（2）若要測定培養液中微生物B的菌體數，可在顯微鏡下用血細胞計數板直接計數；若要測定其活菌數量，可選用稀釋塗布平板法進行計數．
（3）採用稀釋塗布平板法檢測水樣中的細菌含量，在塗布接種前，隨機取若干滅菌後的空平板先行培養一段時間，這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格．
（4）三塊平板有兩塊平板長有菌落，說明含有菌株並可在培養基上生長；而其中一塊未見菌落，說明菌株死亡．因此，應在接種過程中接種環灼燒後未冷卻或未足夠冷卻，使菌株因溫度過高被殺死．
（5）纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少含有三種組分，即C ₁ 酶、C _x 酶、葡萄糖苷酶，其中葡萄糖糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖；剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解後，紅色復合物無法形成，出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌．
故答案為：
（1）氮源和無機鹽先調PH，後滅菌
（2）血細胞計數板稀釋塗布平板
（3）檢測培養基平板滅菌是否合格
（4）接種環溫度過高，菌被殺死
（5）纖維二糖紅透明圈