Ⅰ 組織學最常用的製片方法是
石蠟切片。石蠟切片操作要點。
切片前,把切片機上相關鎖桿或螺旋擰緊,否則可能出現跳片、切片厚薄不均現象。
刮凈包埋盒周邊的余蠟,否則樣品夾持可能松動,影響切片質量。
正確修塊,先粗修,厚度大約在15-30微米,質地較硬的組織或較小的組織應再薄一些。粗修至組織全部暴露後,再進行細修。
選擇蠟塊握雀冷凍方式,冰盒優於冷凍台。使用冰盒能加水潤濕蠟塊,冷凍速度快,體積小,使用成本低,無須外接電源。
切片時輕握手輪,用力均勻輕柔,搖速不宜過快或過慢。過快會導致切片厚薄不均,切片難以展開;過慢會使切片增厚。切片要求完整、薄、均勻。
正確固定
組織離體後,必須在1小時內固定。固定液須是組織體積的4-10倍,濃度准確,過稀或過濃都會影響組織中扮形態和固定效果。如發現固定液變質,如甲醛液體產生白色沉澱,應立即更段培早換。
固定溫度宜室溫或放於35-37℃的全封閉組織處理機內,溫度過高,會加快組織自溶和過度收縮,破壞細胞內的抗原和DNA。固定時間不超過40小時,根據室溫和標本不同而調整。