細菌常用人工培養方法

Ⅰ 細菌培養的方法有哪些

根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法三種。

1、一般培養法：將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18－24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長。少數生長緩慢的細菌，需培養3－7天直至一個月才能生長。

為使培養箱內保持一定濕度，可在其內放置一杯水。培養時間較長的培養基，接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固，以防培養基乾裂。

2、二氧化碳培養法：某些細菌，如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10％二氧化碳的空氣中才能生長，尤其是初代分離培養要求更為嚴格。將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法，

3、厭氧培養法：常用的厭氧培養方法有厭氧罐法、氣袋法及厭氧箱三種。

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培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基，制定培養條件（溫度、pH值、時間，對氧的需求與否等）。

一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。

一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。

通過日常管理、檢測、檢查，了解光合細菌的生長情況，就可以結合當時環境條件的變化進行分析，找出影響光合細菌生長繁殖的原因，採取相應的措施。影響光合細菌生長的原因很多，內因是菌種是否優良，外因是光照、溫度、營養、敵害和厭氣程度等。

溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長，而且溫度、光照和pH值之間是互相制約的，溫度與光照的強弱是對立統一的，所以光合細菌生長的最適條件應是互應的，即溫度高，光照應弱；溫度低，光照應強。

如果是溫度高，光照強，pH值就會迅速升高，培養基產生沉澱，抑制光台細菌的生長；如果溫度低，光照弱，光合細菌得不到最佳能源，生長速度也慢。經試驗得出光合細菌生長的最適條件是：

①溫度15～20℃時，光照30000～50000lx，培養基pH值為7.0；

②溫度25～30℃時，光照為3000～5000lx，培養基的pH值為7.0。

Ⅱ 微生物培養方法

微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同，並聯系生產和實驗上的具體要求，可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法，常用：①搖床培養法，即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後，放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪，使空氣不斷進入培養液中，促其良好生長;②淺盤培養法，又稱表面培養法，在盤內放一淺層培養基，使微生物能夠充分接觸空氣，而有利於生長繁殖，但此法所需空間大，並且容易污染雜菌;③深層培養法，適用於好氣微生物的大規模發酵培養，在大容積的液體培養基中，通入無菌空氣，並不斷攪拌，可使微生物充分接觸空氣，迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法，實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧，也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。

Ⅲ 怎麼做細菌培養

細菌培養是一種用人工方法使細菌生長繁殖的技術。大多數細菌可用人工方法培養，即將其接種於培養基上，使其生長繁殖。培養出來的細菌用於研究、鑒定和應用。
具體培養步驟：
以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養基的制備，接種和培養管理四個步驟。
（一）容器、工具的消毒參考、此處從略。
（二）培養基的制備
1．培養用水
如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水，生產培養可用消毒的自來水（或井水）配製。如果培養的光合細菌是海水種，則用天然海水配製培養基，注意在海水中加入磷元素時，不能用磷酸氫二鉀，應用磷酸二氫鉀，不然會產生大量沉澱。
2．滅菌和消毒菌種培養用的培養基應連同培養容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產性培養可把配好的培養液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產性培養則把經沉澱砂濾後的水用漂白粉（或漂白液）消毒後使用。
3．培養基配製根據所培養種類的營養需要選擇合適的培養基配方。按培養基配方把所需物質稱量，逐一溶解，混合，配成培養基。也可先配成母液，使用時按比例加入一定的量即可。
（三）接種培養基配好後，應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高，一般為20%～50%，即菌種母液量和新配培養液雖之比為1∶4～1∶1，不應低於20%，尤其是微氣培養，接種量更應高些，否則光合細菌在培養液中很難占絕對優勢，影響培養的最終產量和質量。
（四）培養管理光合細菌的培養過程中，管理工作包括日常管理操作和測試，生長情況的觀察、檢查以及出現問題的分析處理等三個方面。
日常管理和測試：
（1）攪拌和充氣：光合細菌培養過程中必須充氣或攪拌，作用是幫助沉澱的光合細菌上浮獲得光照，保持菌細胞的良好生長。小型厭氣培養常用人工搖動培養容器的方法使菌細胞上浮，每天至少搖動三次，定時進行。大型厭氣培養則用機械攪拌器或使用小水泵使水緩慢循環運轉，保持菌體懸浮。微氣培養是通過充氣幫助菌體上浮，因為培養液中溶解氧含量增加，光合細菌繁殖受到抑制，產量下降，所以必須嚴格控制充氣量。一般採用定時斷續充氣，充氣量控制在1～1.5升/（升·h）之間，溶解氧量保持在1×10-6以下。
（2）調節光照度：培養光合細菌需要連續進行照明。在日常管理工作中，應根據需要經常調整光照度。白天可利用太陽光培養，晚上則需要人工光源照明，或完全利用人工光源培養。人工光源一般使用碘鎢燈或白熾燈泡。不同的培養方式所要求的光照強度有所不同。一般培養光照強度應控制在2000～5000lx之間。如果光合細菌生長繁殖快，細胞密度高，則光照強度應提高到5000～10000lx。光照強度可通過調整培養容器與光源的距離或使用可控電源箱調節。
（3）調節溫度：光合細菌對溫度的適應范圍很廣，一船在23～39℃的范圍內均能正常生長繁殖，可不必調整溫度。在常溫下培養也可通過調整，將溫度控制在光合細菌生長繁殖最適宜的范圍內，使光合細菌更好地生長。
（4）酸鹼度的測定和調整：在培養光合細菌的過程中，必須注意酸鹼度的變化。由於光合細菌的大量繁殖，菌液的pH值上升，這意味著光合細菌正處於指數生長期。但當pH值超過最適范圍甚至生長的適應范圍時，光合細菌的生長達到頂點，隨後生長下降。如果能及時調整菌液的酸鹼度，使pH值保持在最適范圍，則光合細菌能繼續生長繁殖。為了延長光合細菌的指數生長期，提高培養基的利用率和單位水體的產量，測定和調整PH值是非常重要的。一船採用加酸的辦法來降低菌液的酸鹼度，醋酸、乳酸和鹽酸部可使用，最常用的是醋酸。在日常的管理工作中，必須每天或隔天測定菌液的pH值，當pH值上升超出最適范圍，即加酸調整。如果在培養過程中不測定、調整酸鹼度，當光合細菌的生長達到一定密度後pH值也上升到9以上，細菌生長受阻，此時應採收或再擴大培養。在培養過程中不調整PH值，獲得的最終產量低。

Ⅳ 怎麼做細菌培養

根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法,二氧化碳培養法和厭氧培養法三種.
1. 一般培養法 將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18-24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長.少數生長緩慢的細菌,需培養3-7天直至一個月才能生長.為使培養箱內保持一定濕度,可在其內放置一杯水.培養時間較長的培養基,接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固,以防培養基乾裂.
2. 二氧化碳培養法 某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格.將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,常用方法有以下幾種:
（1） 二氧化碳培養箱 可將已接種的培養基直接放入箱內孵育,即可獲得二氧化碳環境.
（2） 燭缸法 將已接種的培養基,置於容量為2 000ml的磨口標本缸或乾燥器內.缸蓋或缸口處均需塗以凡士林,然後點燃蠟燭直立置入缸中,密封缸蓋.待燃自行熄滅時,容器內約含5-10%的CO2 容器置37℃培養.
（3） 重碳酸鈉-鹽酸法 每升容積的容器內,重碳酸鈉與鹽酸按0.4g與3.5ml的比例,分別將兩種葯各置一器皿內（如平皿內）,連同器皿置於標本缸或乾燥器內,蓋嚴後使容器傾斜,兩種葯品接觸後即可產生二氧化碳.
3. 厭氧培養法 目前常用的厭氧培養方法有厭氧罐法,氣袋法及厭氧箱三種.
（1） 厭氧罐法 是目前應用較廣泛的一種方法,共分為以下幾種.
抽氣換氣法:該法適用於一般實驗室,其特點是較經濟並可迅速建立厭氧環境.標本接種後,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至-79.98KPa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指針回0位,連續反復3次,最後在罐內-79.98KPa的情況下,充入70%的N2 ,20%H2 ,10%CO2 （有人改用20%CO2 及80%H2 ,亦可獲得好結果）.罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘余的O2 和H2 化合成水.同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色.臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色.
氣體發生袋法:氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種葯片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的葯片,另一種是含有硼氫化鈉的葯片.前者遇水放出二氧化碳,後者可釋放氫.使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml蒸餾水,立即放入含有鈀粒,指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子經2-3分鍾後,可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現.密封後1小時左右罐中的O2 的含量可低於<1%.
（2） 氣袋法 此種方法不需要特殊設備,操作簡單,使用方便,不但實驗室中可用,而且外出采樣,現場接種也可用.原理與氣體發生袋完全相同,只是採用塑料袋代替了厭氧罐,氣袋為一透明而密閉的塑料袋,內裝有氣體發生安瓿,指示劑安瓿,含有催化劑的帶孔塑料管各一支.其操作方法為首先將接種的平板培養基放入袋中,用彈簧夾夾緊袋口,然後用手指壓碎氣體安瓿,20分鍾後再壓碎指示劑安瓿,如果指示劑不變藍色,說明袋內達到厭氧狀態,即可放入37℃進行培養.
（3） 厭氧培養箱 使用之前須仔細檢查厭氧裝備有無漏氣等問題,以及催化劑,指示劑質量等.使用時嚴格遵守操作規程,保證箱內氣體比例合理.

Ⅳ 微生物培養方法有哪些

常用的微生物實驗室接種方法有以下幾種：

1、液體接種：從固體培養基中將菌洗下，倒入液體培養基中，或者從液體培養物中，用移液管將菌液接至液體培養基中，或從液體培養物中將菌液移至固體培養基中，都可稱為液體接種。

2、穿刺接種：在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常採用此法。做穿刺接種時，用的接種工具是接種針。用的培養基一般是半固體培養基。它的做法是：用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺，如某細菌具有鞭毛而能運動，則在穿刺線周圍能夠生長。

3、活體接種：活體接種是專門用於培養病毒或其它病原微生物的一種方法，因為病毒必須接種於活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物；也可以是某個離體活組織，例如猴腎等；也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射，也可以是拌料喂養。

4、澆混接種：該法是將待接的微生物先放入培養皿中，然後再倒入冷卻至45°C左右的固體培養基，迅速輕輕搖勻，這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之後，置合適溫度下培養，就可長出單個的微生物菌落。

5、劃線接種：即在固體培養基表面作來回直線形的移動，就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環，接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。

6、塗布接種：與澆混接種略有不同，就是先倒好平板，讓其凝固，然後再將菌液倒入平板上面，迅速用塗布棒在表面作來回左右的塗布，讓菌液均勻分布，就可長出單個的微生物的菌落。

7、三點接種：在研究黴菌形態時常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上，成等邊三角形的三點，讓它各自獨立形成菌落後，來觀察、研究它們的形態。除三點外，也有一點或多點進行接種的。

8、注射接種：該法是用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內，如人或其它動物中，常見的疫苗預防接種，就是用注射接種，接入人體，來預防某些疾病。

Ⅵ 請你寫出培養細菌、真菌的一般方法．

細菌、真菌培養的一般方法：首先要配製含有營養物質的培養基，可以用牛肉汁加瓊脂熬制，然後把培養基和所有用具進行高溫滅菌，以防雜菌對實驗的干擾，為防止高溫殺死細菌、真菌，要等冷卻後，在進行接種，接種後放在溫暖的地方進行恆溫培養．注意：定期觀察並詳細記錄實驗現象．故細菌、真菌培養的一般方法：配置培養基一高溫滅菌一接種一培養．
故答案為：配置培養基一高溫滅菌一接種一培養．