中葯化學常用檢出試劑配製方法

Ⅰ 《中國葯典》純化水2010年版二部用試劑怎麼配製。

酸鹼度：取本品10ml,加甲基紅指示液2滴，不得顯紅色滾慧擾；另取10ml,加溴麝香草酚藍指示液5滴，不碧歷得顯藍色（指示劑配，甲基紅指示液取甲基紅0. lg，加0.05mol/L氫氧化鈉溶液7. 4ml使溶解，再加水稀釋至200ml，即得。變色范圍 pH4. 2〜6. 3(紅—黃）。溴廨香草酚藍指示液取溴麝香草酚藍O.lg ，加0. 05mol/L氫氧化鈉溶液3.2ml使溶解，再加水稀釋至200ml,即得。變色范圍 pH6. 0〜7. 6(黃—藍）。 ）
硝酸鹽：取本品5ml置試管中，於冰浴中冷卻，加10%氯化鉀溶液（1g氯化鉀融入10ML水中）0.4ml與0. 1%二苯胺硫酸溶液（0.01g二苯胺融入10ML硫酸中）0. lml,搖勻，緩緩滴加硫酸5ml,搖勻，將試管於50°C水浴中放置15分鍾，溶液產生的藍色與標准硝酸鹽溶液〔取硝酸鉀0. 163g,加水溶解並稀釋至100ml,搖勻，精密量取lml,加水稀釋成100ml,再精密量取10ml,加水稀釋成100ml,搖勻，即得（每lml相當於l微克 N03)}0. 3ml,加無硝酸鹽的水4.7ml,用同一方法處理後的顏色比較，不得更深（0. 000 006%)。
亞硝酸鹽：取本品10ml,置納氏管中，加對氨基苯磺醯胺的稀鹽酸溶液（1 — 100) lml與鹽酸萘乙二胺溶液（0. 1 —100)lml,產生的粉紅色，與標准亞硝酸鹽溶液〔取亞硝酸鈉0. 750g(按乾燥品計算），加水溶解，稀釋至100ml，搖勻，精密量取lml,加水稀釋成100ml,搖勻，再精密量取lml,加水稀釋成50ml,搖勻，即得（每lml相當於1微克NO2)}0.2ml,加無亞硝酸鹽的水9. 8ml,用同一方法處理後的顏色比較，不得更深(0. 000 002%)。
氨：取本品50ml,加鹼性碘化汞鉀試液2ml，放置15分鍾；如顯色，與氯化銨溶液（取氯化銨31. 5mg,加無氨水適量使溶解並稀釋成1000ml)l. 5ml,加無氨水48ml與鹼性碘化汞鉀試液2ml製成的對照液比較，不得更深(0. 000 03%)。{鹼性碘化汞鉀試液：取碘化鉀10g，加水10ml溶解後，緩
緩加入二氯化汞的飽和水溶液，隨加隨攪拌，至生成的紅色沉澱不再溶解，加氫氧化鉀30g，溶解後，再加二氯化汞的飽和水溶液lml或lml以上，並用適量的水稀釋使成200ml,靜置，使沉澱，即得。用時傾取上層的澄明液應用。〔檢査〕取本液2ml,加人含氨0. 05mg的水50ml中，應 即時顯黃棕色。}
電導率：應符合規定（附錄)。
總有機碳：不得過0.50mg/L(附錄)。
易氧化物取本品100ml,加稀硫酸10ml,煮沸後，加高錳酸鉀滴定液（0. 02mol/L)0. 10ml,再煮沸10分鍾，粉紅色不得完全消失。
以上總有機碳和易氧化物兩項可選做一項。
不揮發物：取本品100ml,置105°C恆重的蒸發皿中，在水浴上蒸干，並在105°C乾燥至恆重，遺留殘渣不得過lmg。
重金屬：取本品100ml,加水19ml,蒸發至20ml，放冷，加大旦醋酸鹽緩沖液（pH3. 5)2ml與水適量使成25ml，加硫代乙醯胺試液2ml，搖勻，放置2分鍾，與標准鉛溶液1. 0 ml加水19ml用同一方法處理後的顏色比較，不得更深(0. 000 01%)。
微生物限度：取本品，採用薄膜過濾法處理後，依法檢查(附錄XI J)，細菌、黴菌和酵母菌總數每lml不得過100個。
其實有些試劑可以在葯典後面的附錄裡面找到的，都很簡單，記得採納啊

Ⅱ 中葯化學成分沉澱分離法的基本原理及具體方法

指於中葯提取液中加入某些試劑或溶劑，使某些成分溶解度降低而沉澱，使所要成分與雜質分離的方法。依據加入試劑或溶劑不同，分為下述五種方法。
1
水醇沉澱法：
水提醇沉法：於水提濃縮液中加入乙醇使含醇量達60%以上，可使多糖、蛋白質沉澱。
醇提水沉法：於醇提取濃縮液中加入10倍量以上水，可沉澱親脂性成分。
2
鉛鹽沉澱法：
利用中性醋酸鉛或鹼式醋酸鉛在水或稀醇溶液中能與許多物質生成難溶的鉛鹽或絡鹽沉澱而分離的方法。中性醋酸鉛可沉澱具有鄰二酚羥基和羧基的成分；鹼式醋酸鉛的沉澱范圍較廣，可沉澱含酚羥基和羧基及中性皂苷等。
3
酸鹼沉澱法：
酸提取鹼沉澱：用於生物鹼的提取分離。
鹼提取酸沉澱：用於酚、酸類成分和內酯類成分的提取、分離。
4
專屬試劑沉澱法
某些試劑能選擇性地沉澱某類成分，稱為專屬試劑沉澱法。如雷氏銨鹽能與水溶性生物鹼類生成沉澱，可用於分離水溶性生物鹼與其它生物鹼；膽甾醇能和甾體皂苷沉澱，可使其與三萜皂苷分離；明膠能沉澱鞣質，可用於分離或除去鞣質等。
5
鹽析法
於中葯水提取液中加入某些無機鹽至一定濃度或達到飽和狀態，可使某些成分由於溶解度降低而沉澱析出。常用的無機鹽有NaCl、Na2SO4等。

Ⅲ 常用化學實驗試劑的配製與應用有哪些

樓主你好：
一、通用試劑
1、碘試劑
檢查一般有機化合物。
（1）碘蒸氣 預先將盛有碘結晶的小杯置於密閉的玻璃容器內，使容器空間被碘蒸氣飽和，將薄層置於容器內數分鍾即顯棕色斑點。有時，於容器中加放一小杯水，增加容器內的濕度，可提高顯色的靈敏度。
（2）0.5％碘的氯仿溶液 噴灑試劑，置空氣中待過量的碘揮發後，噴1％澱粉溶液，斑點由棕色轉為藍色。
2、硫酸試劑
查一般有機化合物。
5％硫酸乙醇溶液作為色譜顯色劑用。噴灑後，置空氣中乾燥15min，100℃烤至斑點呈色（不同化合物呈不同顏色）。
3、重鉻酸鉀—硫酸試劑
檢查一般有機化合物。
5g重鉻酸鉀溶於l00ml40％硫酸中。噴該試劑後，150℃加熱至斑點出現(不同化合物呈不同顏色)。
4、磷鉬酸試劑
檢查還原性成分。
5％磷鉬酸乙醇溶液。噴灑後，120℃加熱至呈藍色斑點。
5、磷鎢酸試劑
檢查還原性成分
20％磷鎢酸乙醇溶液。噴灑後，120℃烘烤，還原性物質呈藍色斑點。
6、硝酸銀—氫氧化銨試劑
檢查還原性成分。
溶液I：0.1mol／L硝酸銀溶液。溶液Ⅱ：10％氫氧化銨溶液。臨用前溶液I和Ⅱ以
1︰5混合。噴灑後105℃加熱5~l0min，至深黑色斑點出現。
7、中性高錳酸鉀試劑
檢查易還原性成分。
0.05％高錳酸鉀溶液。噴灑後粉紅色背景上顯黃色斑點。
8、鹼性高錳酸鉀試劑
檢查還原性成分。
溶液I：1％高錳酸鉀溶液。溶液Ⅱ：5％碳酸鈉溶液。溶液I和Ⅱ等量混合使用，噴灑後，粉紅背景上顯黃色斑點。
9、四唑藍試劑
檢查還原性成分。
溶液I：0．5％四唑藍甲醇溶液。溶液Ⅱ：25％氫氧化鈉溶液。臨用前兩液等量混合。噴灑後，微熱或室溫放置顯紫色斑點。
10、熒光素—溴試劑
檢查不飽和化合物。
溶液I：0.1g熒光素溶於l00ml乙醇中。溶液Ⅱ：5g溴溶於l00ml四氯化碳中。先噴灑溶液I，然後將薄層板放入盛有溶液Ⅱ的缸內，黃色斑點出現後，於紫外光燈下檢視，紅色底板上顯黃色熒光斑點。更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考中檢所標准品對照品 www.rmhot.com
11．熒光顯色試劑
檢查一般有機化合物。
（1）0.2％2，7--'氯熒光素乙醇溶液。
（2）0.01％熒光素乙醇溶液。
（3）0.1％桑色素乙醇溶液。
（4）0.05％羅丹明B乙醇溶液。
噴灑任一溶液，不同的化合物在熒光背景上可顯黑色或其它熒光斑點。
二、苷類鑒定試劑
1、糖鑒定試劑
（1） －萘酚－硫酸試劑
檢查還原糖。
①溶液I：10％ —萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ：硫酸。取lml樣品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2～3滴，混勻，沿試管壁緩緩加入少量溶液Ⅱ，二液面交界處產生紫紅色環為陽性反應。
②15％ —萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混勻後使用。噴灑於薄層板上，100℃烤3～6min，多數糖顯藍色，鼠李糖顯橙色，所顯顏色於室溫可穩定2天～3天。
（2）斐林試劑
檢查還原糖。 『
溶液I：6.93g結晶硫酸銅溶於l00ml水中。溶液Ⅱ：34.6g酒石酸鉀鈉、10g氫氧化鈉溶於l00ml水中。取lml樣品熱水提取液，加入4～5滴用時配製的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液，在沸水浴中加熱數分鍾，產生磚紅色沉澱為陽性反應。如檢查多糖和甙，取lml樣品水提液，加入lmll0％鹽酸溶液，在沸水浴上加熱l0min，過濾，再用10％氫氧化鈉溶液調至中性，按上述方法檢查還原糖。
（3）氨性硝酸銀試劑
檢查還原糖。
硝酸銀1g，加水20ml溶解，小心滴加適量氨水，邊加邊攪拌，至開始產生的沉澱將近全部溶解為止，過濾。取lml樣品的水溶液，加入lml試劑，混勻後，40℃微熱數分鍾，管壁析出銀鏡或產生黑色沉澱為陽性反應。本試劑也可作為色譜顯色劑，噴灑後於110℃加熱數分鍾，顯棕黑色斑點為陽性反應。還原性物質如醛類、鄰二酚類等有干擾。
（4）茴香醛－硫酸試劑
檢查糖類化合物。
硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中，需臨用前配製。噴灑於薄層板上，105℃加熱至顯示色斑，不同糖顯不同顏色。
（5）苯胺－鄰苯二甲酸試劑
檢查糖類化合物。
苯胺0.93g和鄰苯二甲酸1.66g溶於100ml水飽和的正丁醇中。作色譜顯色劑用。噴後105℃烤5min，顯紅棕色斑點。
（6）l,3－二'羥基萘酚－磷酸試劑
檢查酮糖、醛糖。
0.2％1，3--'二羥基萘酚乙醇溶液50ml與85％磷酸50ml混合均勻後使用。噴後105℃烤5min～10min，酮糖呈紅色，醛糖顯淡藍色。
（7）苯胺－二苯胺－磷酸試劑
檢查糖類化合物。
苯胺4ml、二苯胺4g及85％磷酸20ml溶於丙酮200ml中。噴灑於薄層板上，85℃加熱10min，不同糖顯不同顏色。
（8）2，3，5－三苯基氯化四氮唑(T．T．C)試劑
檢查還原糖。
溶液Ⅰ：4％T．T．C甲醇溶液。溶液Ⅱ：4％氫氧化鈉溶液。臨用時將溶液Ⅰ和Ⅱ等體積混合。噴灑後，100℃加熱5～10min，顯紅色斑點為陽性反應(醛類無干擾)。
（9）三氯化鐵－冰醋酸(K．K)試劑
檢查 －去氧糖，常用於強心甙。
溶液I：1％三氯化鐵溶液0.5ml，加冰醋酸至l00ml。溶液Ⅱ：硫酸。取樣品乙醇提取液lml，置試管中，水浴上蒸去乙醇，殘渣用0.5ml溶液I溶解，沿試管壁緩緩加入溶液Ⅱlml，靜置分層，上層漸顯藍色，下層顯紅色或棕色為陽性反應(其顏色隨苷元羥基和雙鍵的位置和個數不同而不同)。
（10）占噸氫醇試劑
檢查 －去氧糖(常用於強心甙)。
10mg占噸氫醇溶於100ml冰醋酸中，再加入lml硫酸混合。取lml樣品，加入試劑lml，置水浴上加熱30min，顯紅色為陽性反應。
（11）Gregg-Gisvold試劑
檢查2．6－去氧糖。
溶液I：10％三氯化鐵溶液。溶液Ⅱ：1％鹽酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2．8ml鹽酸)。0.5ml溶液I與100ml溶液Ⅱ混合。將樣品的乙醇溶液點於濾紙片上，晾乾後，噴灑上述混合試劑，110℃加熱5min，顯藍色為陽性反應。
（12）3，5－二氨基苯甲酸－磷酸試劑
檢查2－去氧糖。
3，5－二氨基苯甲酸二鹽酸鹽1g溶於80％磷酸25ml，加水稀釋至60ml。噴灑後，100℃加熱15min，2－去氧糖在日光下顯棕色，在紫外光下顯黃綠色熒光。
（13）對硝基苯胺－過碘酸試劑
檢查去氧糖。
溶液I：飽和偏高碘酸溶液1份加水2份混勻。溶液Ⅱ：1％對硝基苯胺乙醇溶液4份與鹽酸1份混合。先噴溶液I，放置10min，再噴溶液Ⅱ，去氧糖顯黃色，紫外光下顯強熒光，再噴5％氫氧化鈉甲醇溶液，顏色轉綠，乙二醇同樣顯色。

Ⅳ 配製試劑時，一般常用的方法有哪些

1．直接法
准確稱取基準物質，溶解後定容即成為准確濃度的標准溶液。例如，需配製500mL濃度為0.01000 mol·L-1 K2Cr2O7溶液時，應在分析天平上准確稱取基準物質K2Cr2O7 1.4709g，加少量水使之溶解，定量轉入500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。
較稀的標准溶液可由較濃的標准溶液稀釋而成。例如，光度分析中需用1.79×10-3mol·L-1標准鐵溶液。計算得知須准確稱取10mg純金屬鐵，但在一般分析天平上無法准確稱量，因其量太小、稱量誤差大。因此常常採用先配製儲備標准溶液，然後再稀釋至所要求的標准溶液濃度的方法。可在分析天平上准確稱取高純（99.99%）金屬鐵1.0000g，然後在小燒杯中加入約30mL濃鹽酸使之溶解，定量轉入一升容量瓶中，用1mol·L-1鹽酸稀釋至刻度。此標准溶液含鐵1.79×10-2mol·L-1。移取此標准溶液10.00mL於100mL容量瓶中，用1mol·L-1鹽酸稀釋至刻度，搖勻，此標准溶液含鐵1.79×10-3mol·L-1。由儲備液 配製成操作溶液時，原則上只稀釋一次，必要時可稀釋二次。稀釋次數太多累積誤差太大，影響分析結果的准確度。

2．標定法
不能直接配製成准確濃度的標准溶液，可先配製成溶液，然後選擇基準物質標定。做滴定劑用的酸鹼溶液，一般先配製成約0.1mol·L-1濃度。由原裝的固體酸鹼配製溶液時，一般只要求准確到1～2位有效數字，故可用量筒量取液體或在台秤上稱取固體試劑，加入的溶劑（如水）用量筒或量杯量取即可。但是在標定溶液的整個過程中，一切操作要求嚴格、准確。稱量基準物質要求使用分析天平，稱准至小數點後四位有效數字。所要標定溶液的體積，如要參加濃度計算的均要用容量瓶、移液管、滴定管准確操作，不能馬虎。

Ⅳ 化學試劑配製計算公式，要求全一點，及他們之間的換算，

1、溶液稀釋配製： cv = CV
2、固體稱桐宏量；m= cvM
3、液體配製：局御冊c = n/V = （w% px1000/拆棚M)/V

Ⅵ 固體試劑配製公式

以近似認為c(mol/L) =b(mol/kg) 計算

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常用緩沖液1、1M Tris-HCl；2、1.5 M Tris-HCl；3、10×TE Buffer；4、3 M 醋酸鈉；5、PBS Buffer；6、10 M醋酸銨 7、Tris- HCl平衡苯酚 8、苯酚/氯仿/異戊醇9、10％（W/V）SDS 10、2N NaOH11、2.5 N HCl 12、5 M NaCl 13、20％（W/V）Glucose14、Solution I15、Solution II 16、Solution III17、0.5M EDTA賀知 18、1 M DTT 19、10mM ATP

Ⅶ 中葯制劑常用的分離和純化方法有哪些

三種主流方法:煎煮提純法,精密提純法,溶劑提純法。

1. 皂苷的提取方法
（1）皂苷類通常用醇提取，提取液減壓濃縮後，加適量的水，必要時先用乙醚，石油醚等親脂性溶劑萃取，除去親脂性雜質，然後用水飽和正丁醇萃取，減壓蒸干，得粗製總皂苷，此法被認為是皂苷類成分的提取的通法.。
（2）甲醇或乙醇提取-丙酮或乙醚沉澱法 由於皂苷難溶於乙醚、丙酮等溶劑，可將粗製總皂苷溶於少量甲醇，然後滴加乙醚或丙酮，皂苷即析出.。 （3）鹼水提取法 酸性皂苷可先用鹼水提取，再加酸酸化使皂苷沉澱析出。
2. 皂苷元的提取方法
(1)皂苷元多數難溶於或不溶於水，易溶於有機溶劑，所以可採用兩相萃取法，用礦酸並加熱的條件先將粗皂苷水解，水解出來的皂苷元用弱極性的有機溶劑萃取，可以減少對皂苷元的破壞。
(2)還可以直接用酸水加熱水解中葯原料中的皂苷。
(3)含羰基的皂苷元可用Girard T或P試劑進行提取分離。
3. 皂苷的分離
（1）沉澱法
①丙酮或乙醚沉澱法：方法簡便，但難以分離完全。
②膽甾醇沉澱法：可用來精製甾體皂苷。
③鉛鹽沉澱法：此法可分離酸性皂苷與中性皂苷。醋酸鉛可使酸性皂苷完全沉澱；鹼式醋酸鉛則能使中性皂苷也沉澱下來。
（2）色譜法 純化皂苷多採用吸附色譜、分配色譜法、高效液相色譜法以及液滴逆流色譜法。

Ⅷ 碘試驗的配製

中葯化學成分的預試驗
系統預試法——應用一些簡單的定性試驗,對中葯中所含各類化學成分作全面檢查.
單項預試法——根據需要,有重點的檢查某類成分或某葯效成分.
方法：試管反應+薄層層析檢查
中草葯主要來源於植物.植物的化學成分較復雜,有些成分是植物所共有的,如纖維素、蛋白質、油脂、澱粉、糖類、色素等.有些成分僅是某些植物所特有的,如生物鹼類、甙類、揮發油、有機酸、鞣質等.
各類化學成分均具有一定的特性,一般可由葯材的外觀、色、嗅、味等作為初步檢查判斷的手段之一.如葯材樣品折斷後,斷面不油點或擠壓後有油跡者,多含油脂或揮發油；有粉層的多含澱粉、糖類；嗅之有特殊氣味者,大多含有揮發油、香豆精、內酯；有甜奈者多含糖類；味若者大多含生物鹼、甙類、苦味質；味酸者含有有機酸；味澀者多含有鞣質等等.
中草葯所含化學成分均為多類的混合物,分析時常常互相干擾,不易得到正確結果.因此需根據中草葯所含唯判顫各種化學成分的溶解度、酸鹼度、極性等理化性質,再用各類成分的鑒別反應加以鑒別.
一、 預試溶液的制備
1、 水提取液——糖、多糖、有機酸、皂苷、酚類、鞣質、氨基酸、多肽、蛋白質……
2、 乙醇提取液——酚類、鞣質、有機酸、香豆素、強心苷、黃酮、蒽醌、甾體……
3、 5%HCl-乙醇提取液——生物鹼
4、 石油醚提取液——甾體、萜類、脂肪油……
（一）鑒別注意事項
1．沖隱根據各灰成分不同性質,選用適宜的溶劑提取,以保證等成分能被提取出來.
2．檢品提取液的濃度應足以達到各該反應的靈敏度.
3．檢品提取液的酸鹼度（pH）值應不致影響鑒別反應中所需要的pH值.相差甚大時應事先調節.
4．提取液較深時,常易影響觀察鑒別反應的效果,此時可適當稀釋,或進一步提純.
5．鑒別反應時應注意防止多類成分的相互干擾,以免出現假陽性,或顏色不正等情況.最好在化學鑒別的同時,做空白試驗和對照試驗（用已知含某類成分的中草葯或純品做陽性對照）.
6．在鑒別試驗中,如果某一類成分的幾個鑒別反應結果不一致時（即有的呈陽性反應,有的呈陰性）則應進行全面分析.首先應注意呈陽性反應的試驗是否屬於該類成分的專一反應,否則應檢查其他類成分能否產生該反應,從多方面加以判斷.但也應注意,某些反應只能對某一類成分中的某個化學基團呈性反應,如檢查黃酮類的鹽酸――鎂粉試驗,它只對黃酮類中的羥基黃酮類（黃酮醇類）反應明顯,其餘類的黃酮類則不甚明顯,但也不能輕易否定不是黃酮類,為了避免孤立和片面的下結論,一定要全面考慮綜合分析.
中草葯化學成分一般鑒別試驗屯只是一個初步判斷,最後確證尚需進一步提純,以鑒定後才能予以肯定.
（二）鑒別方法
1、 氨基酸、多肽、蛋白質
（1）加熱沉澱試驗：加熱煮沸 →混濁或沉澱 （蛋白質）
+5%H2SO4（不加熱）→混濁或沉澱
（2）雙縮脲反應：+40%NaOH,1%CuSO4 →紫色、紅色或紫紅色（多肽、蛋白質）
（3）茚三酮反應：+0.2%茚三酮試液 →藍或藍紫色（氨基酸、多肽、蛋白質）
（4）吲哚醌反應：+吲哚醌試液 →各種顏色（氨基酸）
（5）Millon反應：+Hg,H2NO2 →紅色（蛋白質分子中有酪氨酸組成）
（6）Hopkins-Cole反應：+乙醛酸,濃硫酸 →各色（蛋白質分子中有色氨酸組成）
（7）氨基酸的薄層層析檢查：吸附劑——硅膠G
展開劑—— n-BuOH,n-BuOH：HAc：H2O
顯色劑——0.25%茚三酮試液 →紫紅色斑點
（1）加熱或礦酸試驗：取檢品的水溶液1ml於試管中,加熱至沸或加5％鹽酸,如發生混濁或有沉澱示含有水溶性蛋白質.
（2）縮二脲試驗：取檢品的水溶液1ml,加10％氧化鈉指敗溶液2滴,充分搖勻,逐漸加入硫酸銅試液,隨加搖勻,注意觀察,如呈現紫色或紫紅色示可能含有蛋白質和氨基酸.
凡蛋白質結構中含有兩個或兩個以上肽鍵（－CONH－）者均有此反應,能在鹼性溶液中與Cu2+生成仙絡合物,呈現一系列的顏色反應,二肽呈藍色,三肽呈紫色,加肽以上呈紅色,肽鍵越多顏色越紅.
（3）茚三酮試驗,取檢品的水溶液1ml,加入茚三酮試液2－3滴,加熱煮沸4－5分鍾,待其冷卻,呈現紅色棕色或藍紫色（蛋白質、腖類、肽類及氨基酸）.
氨基酸與茚三酮的水合作物作用,氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳,而茚三酮被還原成仲醇,與所後成的氨及另一分子茚三酮縮合生成有藍紫色的化合物.
【注】①茚三酮試劑主要是多肽和氨基酸的顯色劑,反應在1小時內穩定.試劑溶液pH值以5－7為宜,必要時可加吡啶數滴或醋酸鈉調整. ②此反應非常靈敏,但有個別氨基酸不能呈紫色,而呈黃色,如脯氨酸.
（4）氨基酸薄層層析檢出反應：
①吸附劑：硅膠G.
②展開劑：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5）
③顯色劑：0.5％茚三酮丙酮溶液,噴霧後於1100烘箱放置5分鍾,顯藍紫允或紫色.
2、 皂苷
（1）泡末試驗：振搖 →大量持續性泡末
+0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷）
+0.1M NaOH 鹼管高於酸管（甾體皂苷）
（2）溶血試驗：+2%紅血球懸浮液 →溶血
（3）Lieberman—Burchard反應：+醋酐-濃硫酸—— 紫紅色（三萜皂苷）
黃-紅-紫-污綠（甾體皂苷）
（1）泡沫試驗：取檢品的水溶液2ml於帶塞試管中,用力振搖3分鍾,即產生持久性蜂窩狀泡沫（維持10分鍾以上）,且泡沫量不少於液體體積的1／3.
【注】常用的增溶劑吐溫、司盤,振搖時均能產生持久性泡沫,要注意區別.
（2）溶血試驗：取試管4支,分別加入濾液0.25、0.5、0.75 ml,然後依次分別加入生理鹽水2.25、2.0、1.75、1.5 ml,使每一個試管中的溶液都成為2.5ml, 再將各試管加入2％的血細胞懸液2.5ml,振搖均勻後,同置於370水浴或25－270的室溫中注意觀察溶血情況,一般觀察3小時即可,或先滴紅細胞於顯微鏡下,然後滴加檢液看血細胞是否消失.如有溶血現象示正反應.
【注】①鞣質對血紅細胞有凝集作用,干擾溶血試驗的觀察,應事先除去（可用取勝醯胺粉吸附或用明膠沉澱）. ②檢液應為中性溶液.
（3）醋酐濃硫酸試驗（Liebrmann Burchard反應）取檢品的水溶液置蒸發皿中,於水浴上蒸干,殘渣加入少量冰醋酸使溶解,再加入醋酐濃硫酸（19：1）試液,呈現紅紫色並變成污色綠色（甾類、三萜類成分或皂甙）
（4）區別甾體皂甙和三萜皂甙：取帶塞試管兩支,各盛檢品的水溶解1 ml,1支加0.1N鹽酸溶液2ml,另一支加0.1N氫氧化鈉溶液2ml用力振搖1分鍾（需左右手交替振搖各半分鍾）,觀察兩管泡沫的多少,若兩管泡沫體積相同或酸管多,示含三萜式皂甙；若加鹼管泡沫多於加酸管示含甾示含甾體皂甙.
三萜皂甙為酸性皂甙在酸性水溶液中形成較穩定的泡沫；甾體皂甙為中性皂甙在鹼笥溶液中能形成較穩定的泡沫.
濃硫酸、高氯酸、高氯酸-香草醛、濃硫酸-香草醛等的顯色原理主要是使羧基脫水,增加雙鍵結構,再經雙鍵位移,雙分子縮合等反應生成共軛雙鍵系統,又在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色
3、 糖和苷
（1）斐林試劑：+硫酸銅、酒石酸鉀鈉 —— 磚紅色沉澱（還原糖）
（—）+1%HCl +NaOH 沉澱（苷元）
△30min 上清液（+）（多糖、苷）
（2）Molish反應：+α-萘酚-濃硫酸 →紫紅色環
（3）銀鏡反應：+0.1N硝酸銀、5N氨水 →銀褐色（還原糖）
（4）薄層層析檢查：：吸附劑——硅膠G或纖維素
展開劑—— n-BuOH：Pd：H2O；15%HAc
顯色劑—— 苯胺-鄰苯二甲酸
（1）鹼性酒石酸銅試液：取檢品的水溶液1－2ml（如為醇溶液須將醇蒸發除去）,加入鹼笥酒石酸銅試液1ml,於沸水浴上加熱5分鍾,產生棕紅色或磚紅色氧化亞銅沉澱,示有還原糖.
還原糖能使二價銅鹽（藍色）還原成氧化亞銅,醛糖的醛基氧化成羧基：
【注】①如檢液呈酸性,應先鹼化. ②此反應所產生的沉澱由於條件不同,其顏色也不同,質點上的呈黃色,質點大的呈紅色.有保持性膠體存在時,也常產生黃色沉澱. ③職樣品中含有其他醛、酮及還原較強的其他成分,或中劃葯制劑中附加的抗氧劑、；葡萄糖等均可顯陽性反應.
（2）α萘酚試驗（Molisch紫環反應）：取檢品的水溶液1ml,加5％萘酚試液數滴振搖後,沿管壁滴入5－6滴濃硫酸,使成兩液層,待2－3分鍾後,兩層液面出現紫紅色環（糖、多糖或甙類）.
多糖類遇濃硫酸被水解成單糖,單糖被濃硫酸脫水閉環,形成糠醛類化合物,在濃硫酸存在下與α萘酚發生酚醛縮合反應,生成紫紅色縮合物.
【注】①甙的分子結構中含有糖基,一般屬於單糖類,如葡萄糖,鼠李糖、半乳糖,但也有含二分子糖（雙糖）或多分子糖（多糖）.在上述反應條件下,甙被水解成單糖,因此甙萘酚試驗,系分子中糖部分的反應. ②由於此反應較為靈敏,如有微量濾紙纖維或中草葯粉末存在於溶液中,都能產生上述反應.故濾過時應加註意.
（3）多糖的確證試驗：取檢品的水溶液5ml於水蒸發至干,加入1ml蒸餾水,再加入乙醇5ml,如出現沉澱,濾過收集後用少量熱乙醇洗滌,再將沉澱物溶於3ml蒸餾水中,做下例試驗.
①碘試驗：取檢品的不溶液1ml,加碘試液1滴,觀察顏色變化,如呈藍黑色為地衣糖；紫黑色為糊精；藍色加熱消失,冷後藍色再現為澱粉.
②多糖水取檢品的水溶液1ml,加入稀鹽酸5滴,置沸水浴中加熱10－15分鍾,然後用10％氫氧化鈉液中和至中性,再加新配製的鹼性酒石酸銅試淮4滴,另取檢液1ml,不加酸水解直接加入上述試液4滴,兩管同置水浴上煮沸5－6分鍾.如果水解後生成棕紅色常常物的量比未經水解的多,則示有多糖.
多糖水解後產生單糖,利用單糖的還原性,使銅離子還原成氧化亞銅.
4、 酚類和鞣質
（1）FeCl3試劑：+1%FeCl3試液 →藍、暗綠或藍紫色
（2）三氯化鐵-鐵氰化鉀試劑：噴灑→藍色斑點
（3）香草醛-鹽酸試劑：噴灑 →紅色（間苯二酚、間苯三酚）
（4）重氮鹽試劑：+對硝基苯胺、亞硝酸鈉 →紅色
（5）薄層層析檢查：吸附劑——硅膠G或纖維素
展開劑—— n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc
顯色劑——1% FeCl3試液
1%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀試液 →藍、綠或黑色
鞣質與酚類的區別：+明膠 —— 沉澱
上清液 +1%FeCl3試液 →藍、暗綠或藍紫色
（1）三氯化鐵試驗：取檢品的水溶液1ml,加三氯化鐵試液1－2滴,呈現綠色、污綠色、藍黑色或暗紫色（可水解鞣質顯藍一藍黑色,縮合鞣顯綠色一污綠色）.
鞣質均是多羥基酚的衍生物,即多元酚,能和三價鐵離子發生顏色反應生成復雜的絡鹽.
【注】此反應如遇有礦酸或有機酸、醋酸鹽等存在,能阻礙顏色的生成.硝基酚類對三氯化鐵試劑無明顯反應.
（2）明膠試驗：取檢品的水溶液1ml,加氯化鈉明溶液2－3滴,即生成白色沉澱物.
鞣質有凝固蛋白的性能.
（3）溴試驗：取檢品的水溶液1ml,加溴試液1－2滴,生成白色或沉澱物,示可能含有酚或兒茶酚鞣質.
【注】過多的溴會阻礙鞣質的沉澱,因此溴水不宜多加.
（4）香草醛一酸試驗：取檢品的水溶液點於濾紙片上,干後,噴霧或滴加香草醛一鹽酸試液,呈現紅色斑點（多元酚類物質）.
（5）鞣質、酚類薄層層析檢出反應：
①吸附劑：聚醯胺；硅膠；硅膠；石膏：水（5：1：7）調成狀,塗成薄板,1050烘乾45分鍾.
②展開劑：乙醇：醋酸（100：2）；正丁醇：乙酸乙酯：水（5：4：1）；苯：甲醇（95：5）.
③顯色劑：10％三氯化鐵溶液；1％三氯化鐵乙醇溶液與1％鐵氰化鉀水溶液（1：1）顯藍一紫色斑點.
5．黃酮及其甙類
（1）鹽酸-鎂粉反應：+HCl-Mg →紅色
（2）三氯化鋁反應：+AlCl3 →黃色
（3）濃氨水反應：+NH3 →亮黃或橙色
（4）薄層層析檢查：吸附劑——聚醯胺或硅膠G
（1）鹽酸一鎂（或鋅）粉試驗：取檢品的乙醇溶液1ml,加放少量鎂粉（或鋅粉）,然後加濃鹽酸4－5滴,置沸水浴中加熱2－3分鍾,如出現紅色示有游離黃酮類或黃酮甙（以同法不加鎂或粉做一對照,如兩管都顯紅色則有花色素存在.如繼續加碳酸試液使成鹼笥即變成紫色雙轉變為藍色,即證明含花色素）.
黃酮類的乙醇溶液,在鹽酸存在的情況下,能被鎂粉還原,生成花色甙元而呈現紅色或紫色反應（個別為淡黃色、橙色、紫色或藍色）.這是由於酮類化合物分子中含有一個鹼性氧原子,致能溶於稀酸中被還原成帶四價的氧原子即鋅鹽.本法是鑒別黃酮類的一個反應.但花色素本身在酸性下（不需加鎂粉）呈紅色,應加以區別.
【注】①此反慶僅在化學結構中,第三位上帶羥基的酮醇類顯色較明顯,而其它黃酮烷酮類均不甚明顯.因此試驗呈陰性反慶是不能做出否定的結論,尚需結合其他實驗再做結論. ②試驗應在醇中進行,水分多會影響顏色的生成.此反慶較慢,有時需置水浴上加熱,以促使反應的進行.
（2）熒光試驗：
①三氯化鋁試驗：取檢品的乙醇溶液點於濾紙片上（干後再點1次,使其濃度庥中）,干後,噴霧1％三氯化鋁乙醇試液,在紫外光燈下觀察,呈現黃色、綠色、橙色等熒光為黃酮類；呈現天藍色或黃綠色；熒光,則為二氫黃酮類.這是區別二氫黃酮類化合物的一種鑒別反應.
②硼酸丙酮枸櫞酸丙酮試驗：取檢品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入飽和硼酸丙酮溶液及10％枸櫞酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮後,在紫外光燈下觀察,管內呈現強烈的綠色熒光（黃酮或其甙類）.
（3）鹼液試驗：取檢品的乙醇溶液點於濾紙片上（干後,再點一次,使其溶液集中）,干後,噴1％碳酸鈉溶液或在氨蒸氣中熏幾分鍾,呈現亮黃、綠或橙黃色.如將氨氣熏過的濾紙露置空氣中,顏色逐漸裉去而變為原有的顏色（黃酮或其甙類）.
5、 生物鹼
（1）沉澱反應——碘化汞鉀試劑 →白色或淺黃色沉澱
碘化鉍鉀試劑 →橘紅色沉澱
碘—碘化鉀試劑 →淺棕或暗棕色沉澱
硅鎢酸試劑 →淺黃或黃棕色沉澱
磷鎢酸試劑 →淺黃色沉澱
磷鉬酸試劑 →白色或淡黃色沉澱
苦味酸試劑 →黃色結晶或非結晶形沉澱
鞣酸試劑 →棕黃色沉澱
氯化金試劑 →黃色結晶
氯化鉑試劑 →白色結晶
雷氏銨鹽 →紅色無定形沉澱
（2）薄層層析檢查：吸附劑——鹼性氧化鋁（Ⅲ級,干法鋪板）
硅膠G（稀鹼濕法鋪板）
展開劑——氯仿：甲醇
顯色——UV；碘化鉍鉀
6、 有機酸
（1）PH試紙檢查
（2）溴酚蘭試液：噴灑→藍色背景黃色斑點
（3）薄層層析檢查：吸附劑——硅膠G或酸性氧化鋁
展開劑—— C6H6：EtOH
顯色劑——0.1%溴酚蘭試液→黃色
7、甾體
（1）Lieberman—Burchard反應：+醋酐-濃硫酸 →黃-紅-紫-污綠
（2）氯仿-濃硫酸反應：+氯仿-濃硫酸 氯仿層→紅或青色
硫酸層→綠色熒光
（3）五氯化銻或三氯化銻反應：+SbCl3或SbCl5 →紅色
（4）薄層層析檢查：吸附劑——中性氧化鋁或硅膠G
展開劑—— C6H6-MeOH；CHCl3-MeOH
顯色劑—— 10%磷鉬酸 →藍-藍紫色
5%三氯化銻試液 →紅、棕紅或綠色
9、香豆素、內酯
（1）開閉環反應：+1%NaOH→澄清 +2%HCl→混濁
（2）異羥污酸鐵反應：+7%鹽酸羥胺、10%KOH △ +稀HCl、1%FeCl3 →紅色
（3）重氮鹽試劑：+對硝基苯胺、亞硝酸鈉 →紅色
（4）薄層層析檢查：吸附劑——酸性硅膠G或硅膠G 或酸性氧化鋁
展開劑—— 甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：4：1）
顯色劑—— UV→藍色熒光
異羥污酸鐵試液 →紅色
10、強心苷
（1）Kedde試劑：+3,5-二硝基苯甲酸試液 →紫紅色
（2）Baljet試劑：+鹼性苦味酸試液 →橙或橙紅色
（3）Legal試劑：+亞硝醯鐵氰化鈉試液 →紫紅色
（4）K-K反應：+FeCl3/冰HAc、濃H2SO4→ 上層綠~藍色 （2-去氧糖）
界面紅棕色
（5）薄層層析檢查：吸附劑——硅膠G 或中性氧化鋁
展開劑—— n-BuOH：HAc：H2O（4：1：5）
顯色劑—— 鹼性3,5-二硝基苯甲酸試液→紫紅色
鹼性苦味酸試液 →橙紅色
11、蒽醌
（1）鹼液反應：+10%NaOH →紅色 +H2O2 →紅色不褪 +H+ →紅色褪去
（2）醋酸鎂反應：+1%MgAc2 →紅色
（3）薄層層析檢查：吸附劑——硅膠G
展開劑——Pet：EtOAc
顯色劑—— UV→黃色熒光
5%NaOH →紅色
12、揮發油、油脂
（1）油斑檢查：油斑揮發 →揮發油； 油斑不消失→油脂或類脂
（2）磷鉬酸反應：噴灑5%磷鉬酸試液 →藍色（油脂、三萜、甾醇）
最後重點提醒：以上各試劑的配製方法最好參照葯典來配製,原因一是上面寫得很詳細,二是葯典中有個規定,葯典上配製的溶液要是要用到乙醇的,如果沒有指定用無水乙醇,一般是要用95%的乙醇的.
另外附一個試劑的配法：
氯化鈉明膠試劑：（兩者都是固體,剛開始我還真不知道怎樣配,後來在葯典才發現配方）2g氯化鈉和1g明膠,再加上100g水,要求是現配的!

Ⅸ 中葯化學的檢識方法

熒光
香豆素母體本身無熒光，而羥基香豆素在紫外燈下大多能顯出藍色熒光，在鹼溶液中熒光大都增強，可以辨認。
香豆素類熒光的有無或強弱與分子中取代基的種類和位置有一定的關系，但熒光與結構之間的關系尚不太清楚
顯色反應
香豆素分子中某些基團所給出的顏色反應可為鑒別香豆素類提供一定的參考。
1.異羥肟酸鐵反應
這是由香豆素的內酯結構所發生的顯色反應，在鹼性條件下，內酯開環，與鹽酸羥胺中的羥基縮合生成異羥肟酸，然後在酸性條件下再與三價鐵鹽絡合而顯紅色。
2.酚羥基反應
具有酚羥基取代的香豆素類在水溶液中可與三氯化鐵試劑絡合而產生不同的顏色，可以判斷羥基的有無。
重氮化試劑也可用於酚羥基的檢查，若酚羥基的鄰對位無取代時，可與重氮化試劑生成紅色至紫紅色的偶氮染料。
3.Gibb's反應
Gibb's試劑為2，6-二氯（溴）苯醌氯亞胺，它在弱鹼性（pH9.4）條件下可與酚羥基對位的活潑氫縮合，生成藍色的化合物。
該反應可判斷香豆素分子中C6位是否有取代基存在。由於香豆素分子在鹼性條件下內酯環被水解後所生成的酚羥基，如果其對位（即C6位）無取代基存在，可與Gibb's試劑反應產生藍色。若C6位有取代，則Gibb's反應為負反應。
4.Emerson反應
與Gibb's反應一樣，Emerson反應也是用以判斷酚羥基對位有無取代的，在香豆素中用以判斷C6位有無取代基存在。
Emerson試劑由4-氨基安替比林和鐵氰化鉀所組成，與酚羥基對位的活潑氫反應生成紅色。
色譜檢識
1.紙色譜
由於香豆素分子中多含有酚羥基顯弱酸性，故其在進行紙色譜時，在鹼性溶劑系統中的Rf值相對較大，在中性溶劑系統中則易產生拖尾現象。
常用的溶劑系統為含水有機溶劑系統，色譜後的濾紙可先在紫外燈下觀察香豆素特有的熒光，再噴以10%氫氧化鉀醇溶液或20%SbCl3氯仿溶液顯色。
2.薄層色譜
香豆素化合物多具有酚羥基結構，在薄層色譜中多選硅膠作吸附劑，並用一定pH的緩沖溶液處理，可以得到較好的分離效果。酸性氧化鋁也可選作吸附劑用。展開後的斑點除在紫外燈下觀察熒光外，還可噴三氯化銻等顯色劑

Ⅹ 怎麼配製納氏試劑

1、稱取60g氫氧化鉀，溶於約250ml無氨水中，冷卻至室溫。

另外稱取20g碘化鉀溶於100ml無氨水中，邊攪拌邊逐步加入二氯化汞結晶粉末（約10克），至出現朱紅色沉澱不易溶解時，改為滴加飽和二氯化汞溶液，保持攪拌，到出現少量朱紅色沉澱不易溶解時，停止滴加飽和二氯化汞溶液。

然後把該溶液緩慢注入上述已冷卻的氫氧化鉀溶液中，邊注入邊充分攪拌，並用無氨水稀釋至400ml，然後靜置過夜。最後將該溶液的上清液轉移至聚乙烯塑料瓶中，常溫避光保存。

2、稱取16g氫氧化鈉，溶於50ml無氨水中，充分冷卻至室溫

另稱取10g碘化汞和7g碘化鉀溶於水，然後將該溶液在充分攪拌的條件下緩慢注入上述的氫氧化鈉溶液中，並用無氨水釋釋至100ml，貯於聚乙烯塑料瓶中，常溫避光保存。