釋放活性抗菌蛋白常用的方法

『壹』 對於含有蛋白質或抗生素等物質的液體,需採用的除菌方法是

巴氏消毒法、添加抗生素，或其它可行的方法。

對於含有蛋白質的液體，如果要保持蛋白質的活性，則應當採用溫蘆脊培和的消毒方式，野指例如巴氏消毒法、加入抗生素、適度輻照等。如果不考慮蛋白質的活性，或者蛋白質本身就應該失活，那麼可採用高溫高壓消毒等。

對於含有抗生素的液體，應該加入其它類型的抑菌物質（例如液體中原本有喹諾酮類抗生素，可以再添加β-內醯胺類、大環內酯類抗生素等），可以讓抗菌譜更廣。當然也可以採用高溫高壓等方式。

在液體中加入苯酚、乙醇等方式陪唯消毒一般是不常用的，會極大地破壞液體本身的理化性質。

更多詳細內容可參考周德慶編著的《微生物學教程》。

『貳』 蛋白葯物生物學活性檢測方法有哪些

一、MTT比色法檢測細胞活性
（一）原理
活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷，其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。
（二）試劑准備
1、青鏈黴素溶液（100X）：青黴素100萬U，鏈黴素100萬U，溶於100mlddH2O中,抽濾除菌。
2、L15基礎培養基：1000mlL15培養基，加2g碳酸氫鈉，10ml 100X青鏈黴素，5mlHEPES。
3、MTT液：5mg/ml溶於L15基礎培養基。
4、SDS處理液：20gSDS，50μl二甲基甲醯胺，加雙蒸水50ml溶解。
5、L-多聚賴氨酸：50μg溶於1ml雙蒸水中。
6、L15基礎培養基溶解的不同濃度的蛋白液。
（三）操作步驟（以背根神經節細胞培養為例）
1、無菌條件下取新生一天的SD大鼠背根神經節（DRG）。
2、鏡下去除神經根和外膜，放入1ml 0.1%膠原酶中37℃消化30min，每5min搖勻一次。
3、洗去膠原酶，吹打分散後，接種於預先塗有L-多聚賴氨酸的96孔培養板中，每孔含100μl無血清L15培養基，細胞約800個。
4、實驗組分別加入純化的表達蛋白（分別以不同的蛋白濃度），陰性對照加入等體積表達蛋白的溶劑。
5、37℃ 5%CO2培養48hr後，每孔加入10μl MTT，37℃ 5%CO2孵育4hr。
6、加入100μl 20%的SDS處理液，37℃孵育20hr。
7、用EL×800微孔酶標儀測定OD570值，數據分析。

『叄』 科學家發現家蠅體內存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。(1)分離該抗

『肆』 如果要分離一個抗菌蛋白需要哪些步驟啊

蛋白質的提取
准備試劑：異丙醇含0.3M鹽酸胍的95%乙醇無水乙醇1%SDS。
操作步驟：
1.取沉澱DNA後剩餘的上清，用異丙醇沉澱蛋白質。每使用1ml
TRIzol加1.5ml異丙醇，室溫放置10分鍾，2～8℃12000×g離心10分鍾棄上陵敏清。
2.用含0.3M鹽酸胍的95%乙醇洗滌蛋白質沉澱。每使用1mlTRIzol加2ml洗滌液，室溫放置20分鍾，2～8℃7500×g離心5分鍾，棄上清，重復兩次。用2ml無水乙醇同樣方尺晌枝法再洗一次。
3.真空抽干蛋白質沉澱5～10分鍾，用1%SDS溶解蛋白質，反復吸打，50℃溫浴使其完全溶解，不溶物2～8℃10000×g離心10分鍾除去。分離得到的蛋白質樣品可用於Western
Blot或-5至-20℃保存備用。
注意事項：
1.蛋白質沉澱可保存在含0.3M鹽酸胍的95%乙醇或無水乙醇中2～8℃一個月以上或-5至-20℃一年謹差以上。
2.用0.1%
SDS在2～8℃透析三次，10000×g離心10分鍾取上清即可用於Western
Blot。
常見問題分析：
得率低：
A.樣品裂解或勻漿處理不徹底。
B.最後得到的蛋白質沉澱未完全溶解。
蛋白質降解：組織取出後沒有馬上處理或冷凍。
電泳時條帶變形：蛋白質沉澱洗滌不充分。

『伍』 科學家發現家蠅體內存在一種抗菌活性蛋白，這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視．（1）分離該

（1）抗菌活性蛋白是一種蛋白質，可利用電泳法分離蛋白質的原理進行分離，其原理是根據蛋白質分子的電荷（帶電情況）、大小胡羨及伍迅形狀不同，在電場中的遷移速度不同而實現分離的，分子量越大，其遷移速度越快．
（2）金黃色葡萄球菌屬於細菌，作為培養褲橘拍細菌的培養基，必須有碳源和氮源，牛肉膏和蛋白腖主要為細菌生長提供碳源和氮源．
（3）確定該蛋白質的抗菌效果，可以通過比較加入和未加入抗菌蛋白的培養基中菌落的數量來檢驗，若加入抗菌蛋白的培養基中菌落的數量少，說明該蛋白質的抗菌效果好．
（4）在微生物實驗室，細菌培養常用的接種方法有平板劃線法和稀釋塗布平板法．實驗結束後，對使用過的培養基應進行滅菌處理．
故答案：
（1）電荷（帶電情況） 遷移速度
（2）碳源 氮源
（3）數量
（4）平板劃線法 稀釋塗布平板法（稀釋混合平板法） 滅菌

『陸』 蛋白質活性的快速調節方法有哪些

雖然酶也是一種蛋白質，但是還是說酶的姿如改活性快速調節方法比較准確一些。一般可以通過調節pH和溫度來快速調節酶活性。酶活性在最適pH和最適溫度時處於最高，將pH和溫度在最適值調高或者調低，都可以快速降低酶活性。
調節酶的濃度
酶濃度的調節主要有兩種方式，一種是誘導或抑制劑的合成；一種是調節酶的降解。
調節酶的活性
激素通過與細胞膜或細胞內受體相結合而引起一系列生物學效應，以此來調節酶活性。
反饋抑制調節
許多小分子物質的合成是由一連串的反應組成的，催化此物質生成的第一步的酶，往往被它們的終端產物抑制。這種抑制叫反饋抑制(feedback inhibition)。例如由蘇氨酸生物合成為異亮氨酸，要經過5步，反應第一步有蘇氨酸脫氨酶(threonine deaminase)催化，當終產物異亮氨酸濃度達到足夠水平時，該酶就被抑制，異亮氨酸結合到酶的一個調節部位上，通過可逆的別夠作用對酶產生抑制。當異亮氨酸的濃度下降到一定程度，蘇氨酸脫氨酶又將重新表現活性，從而又重新合成異亮氨酸。
抑制劑可調節
酶受大分子抑制劑或小分子物質抑制，從而影響活性。例如：大分子物質胰蛋白酶抑制劑，可以抑制胰蛋白酶的活性。小分子的抑制劑如一些反應產物：像1，3-二磷酸甘油酸變位酶的活性受到它的產物跡判2，3-二磷酸甘油酸的抑制，從而可對這一反橡畝應進行調節。
此外某些無機離子可對一些酶產生抑制，對另外一些酶產生激活，從而對酶活性起調節作用。酶活性也可受到大分子物質的調節，例如抗血友病因子可增強絲氨酸蛋白酶的活性，因此它可明顯地促進血液凝固過程。
其他調節方式
通過別夠調控、酶原的激活、酶的可逆共價修飾和同工酶來調節酶活性。

『柒』 除蛋白都有哪些方法

啤酒和酒精濃度高的飲料中的泡沫，其苦味成分中能去除腦內積聚的蛋白質「Aβ」。啤酒泡沫本身的苦味成分「異α-酸」能激活腦內的免疫細胞——「小神經膠質細胞」， 有除去Aβ的作用。服食過異α-酸餌料的老鼠和普通的老鼠相比，Aβ約減少5成，認知功能也得到提高。

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引起尿蛋白的原因

腎小球性蛋白尿，無論是原發還是繼抓腎小球損害，是臨床上最常見的蛋白質。腎小球濾過膜有病變，基底膜增厚，孔隙增大，蛋白漏出增加，甚至分子量更大的球蛋白亦可漏出。

腎小管性蛋白尿 是指腎小球濾過正常，腎小管重吸收障礙，最常見各種原因引起的間質性腎炎，腎靜脈血栓形成，腎動脈栓塞，重金屬鹽類中毒等。此類尿蛋白量較腎小球性蛋白量少。

腎組織性蛋白尿又稱分泌性蛋白尿。腎小球濾過功能和腎小管重吸收功能均正常，由於尿液形成過程中，腎小管代謝產生的蛋白質滲入尿液中所致，如腎小管拌和遠曲腎小管產生的Tamm-Horsfall蛋白以蛋白(一種大分子糖蛋白)，此種蛋白易形成管型和結石核心。

參考資料：人民網-啤酒苦味能有效預防老年痴呆症 可去除多餘蛋白質