Ⅰ 多糖類的提取方法
一、提取與純化動植物中存在的多糖或微生物胞內多糖,因其細胞或組織外大多有脂質包圍,要使多糖釋放出來,第一步就是去除表面脂質,常用醇或醚迴流脫脂。第二步將脫脂後的殘渣以水為主體的溶液提取取多糖 (即冷水,熱水,熱或冷的0.1-1.0mol/L NaOH,熱或冷的1%醋酸或1%苯酚等),這樣提取得到的多糖提取液含有許多雜質,主要是無機鹽,低分子量的有機物質及高分子量的蛋白質、木質素等。第三步則要除去這些雜質,對於無機鹽及低分子量的有機物質可用透析法、離子交換樹脂或凝膠過濾法除去;對於大分子雜質可用酶消化 (如蛋白酶.木質素酶) ,乙醇或丙酮等溶劑沉澱法或金屬絡合物法。多糖提取液中除去蛋白質是一個很重要的步驟,常用的方法有Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯乙酸法,後者較為劇烈,對於含呋喃糖殘基的多糖由於連接鍵不穩定,所以不宜使用。但該法效率較高,操作簡便,植物來源的多糖常採用該法。上述三種方法均不適合於糖肽,因為糖肽也會像蛋白質那樣沉澱出來。除去蛋白質後,應再透析一次,選用不同規格的超濾膜和透析袋進行超濾和透析,可以將不同分子大小的多糖進行分離和純化,該法在除去小分子物質十分實用,同時能滿足大生產的需要。具有廣闊的應用前景。至此,得到的提取液基本上是沒有蛋白質與小分子雜質的多糖混合物。一般來講,通過上述方法所得到的是多糖的混合物,如果要得到單一的多糖,還必須對該混合物進行純化。柱層析在多糖的純化較為常用,常分為兩類:一是只有分子篩作用的凝膠柱層析, 它根據多糖分子的大小和形狀不同而達到分離目的,常用的凝膠有葡聚糖凝膠及瓊脂糖凝膠,以及性能更佳的Sephacryl等。洗脫劑為各種濃度的鹽溶液及緩沖液,其離子強度不應低於0.02mol/L。二是離子交換層析,它不僅根據分子量的不同,同時也具有分子篩的作用,常用的交換劑有DEAE-纖維素、DEAE-葡聚糖和 DEAE-瓊脂糖等,此法適合於分離各種酸性,中性多糖和粘多糖。多糖的純化還可用其他方法,如制備性高效液相層析、制備性區帶電泳,親和層析等,這些方法有時對制備一些小量純品供分析用是很有用處的。
Ⅱ 三七是一種名貴中葯,其有效成分是三七皂苷,可用萃取法提取.(1)為了提高提取率,提取前應對三七材料
(1)人參皂苷易溶於有機溶劑,溶劑揮發後得到人參皂苷,因此可用萃取法提取.為了提高提取率,提取前應對田七材料進行預處理,即對棚迅盯其進行粉碎和乾燥.昌鋒由於有機溶劑易燃,直接鏈和明火加熱容易燃燒,因此採用萃取法提取某有效成分時加熱一般不用酒精燈直接加熱而用水浴加熱.
(2)工業化大量而快速生產三七以提取相關成分,可利用植物組織培養技術,植物組織培養過程中利用生長素和細胞分裂素等植物激素來促進根芽的分化,並且對形成的愈傷組織應當測定其三七皂苷的含量.
故答案為:
(1)粉碎、乾燥 萃取劑易燃易爆
(2)植物組織培養技術 生長素和細胞分裂素 三七皂苷
Ⅲ 植物多糖的最佳提取方法是什麼
植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO<2>超臨界萃取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.
舉例: 蒽酮比色法,具體步驟
一、儀器、試劑和材料
1.儀器:電子天平,超聲波清洗器,電熱恆溫水浴鍋,抽濾設備,分光光度計,容量瓶,刻度吸管等
2.試劑:
(1)葡萄糖標准液:l00 µg/mL
(2)濃硫酸
(3)蒽酮試劑:0.2 g蒽酮溶於100 mL濃 H2SO4中。當日配製使用。
3.材料:甜高粱,甘草
二.操作步驟
1.葡萄糖標准曲線的製作
取7支大試管,按下表數據配製一系列不同濃度的葡萄糖溶液:
管號
1
2
3
4
5
6
7
葡萄糖標准液(mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8
蒸餾水(mL)
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2
葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80
在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0mL,迅速浸於冰水浴中冷卻,各管加完後一起浸於沸水浴中,管口加蓋,以防蒸發。自水浴沸騰起計時,准確煮沸l0 min,取出,用冰浴冷卻至室溫,在620 nm波長下以第一管為空白,迅速測其餘各管吸光值。以標准葡萄糖含量(µg)為橫坐標,以吸光值為縱坐標,繪出標准曲線。
2.植物樣品中可溶性糖的提取:將樣品粉碎,105 ºC烘乾至恆重,精確稱取1~5 g,置於50mL三角瓶中,加沸水25mL,加蓋,超聲提取10 min,冷卻後過濾(抽濾),殘渣用沸蒸餾水反復洗滌並過濾(抽濾),濾液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。
3.稀釋:吸取提取液2mL,置於另一50mL容量瓶中,以蒸餾水定容,搖勻。
4.測定:吸取1 mL已稀釋的提取液於試管中,加入4.0 mL蒽酮試劑,平行三份;空白管以等量蒸餾水替代提取液。以下操作同標准曲線製作。根據A620平均值在標准曲線上查出葡萄糖的含量(µg)。
三、結果處理:
C × V總 × D
樣品含糖量(%)= ————————————— × 100%
W × V測 × 106
其中:C——在標准曲線上查出的糖含量(µg),
V總——提取液總體積(mL),
V測——測定時取用體積(mL),
D——稀釋倍數,
W——樣品重量(g),
106——樣品重量單位由g換算成µg的倍數
Ⅳ 多糖提取中的酸法提取
蛋白質會影響此方法的測定結果,故需要除去。
三氯乙酸是一種有機酸,使多糖提取液中的蛋白質與有機酸作用而變性沉澱。 該法是 在多糖水提液中滴加 5 %~10 %與多糖水提取液等體積的三氯乙酸,混勻靜置過夜,離心除 去膠狀沉澱,重復以上的操作直至溶液不再繼續混濁為止,得無蛋白質的多糖。 三氯乙酸濃度越大,除蛋白質效果越好,但對多糖的影響也越大,可能是三氯乙酸對多糖結構具有破壞作用,使多糖降解,而且這種破壞作用隨著三氯乙酸濃度增大而增強。 植物多糖常採用三氯乙酸法除蛋白質,也可先用蛋白水解酶,使樣品中的蛋白質部分降解後再用 Sevag 法效果更好;微生物多糖去除蛋白常採用 Sevag 法、三氟三氯乙烷法;也可用鹽析法、有機溶劑萃取等方法除蛋白。
Ⅳ 三七的成分是什麼,請問做其主要有效成分最適合的的方法。。如果用HPLC可以用什麼方法
三七含量測定
取本品粉末(過三號篩)0.5克,精密稱定,置索氏提取器中,加乙醚適量,加熱迴流1小時,棄去乙醚液,葯渣橡瞎揮去乙醚,置於索氏提取器中,加甲醇適量,加熱提取至甲醇無色,取甲醇提取液,揮干,殘渣加甲醇使溶解,定量轉移至20毫升量瓶中,加甲醇到刻度,搖勻,作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb1及人參皂苷Rg1對照品適量精密稱定,加甲醇製成每1毫升各含0.5毫克的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗,精密吸取供試品溶液2微升,梁前空對照品溶液2微升與4微升,分別交叉點於同一硅膠G薄層板上,以氯仿—甲醇—水(13:7:2)10攝氏度以下放置12小時的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾乾,噴以10%硫酸乙醇溶液,在110攝氏度加熱至斑點顯色清晰,取出,在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板,周圍用膠布固定,照薄層色譜法進行掃描,測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值,計算,即得。
本品含人參皂苷Rb1(C54H92023)和人參皂苷Rg1(C42H72O14)的總量不得小於3.8%。
三七 Radix Notoginseng
(英)Sanchi
別名 人參三七、田七、盤龍七、金不換。
來源 為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen的根。
植物形態 多年生草本,高達60cm。根莖短,莖直立,光滑無毛。掌狀復葉,具長柄,3~4片輪生於莖頂;小葉3~7,橢圓形或長圓狀倒卵形,邊緣有細鋸齒。傘形花序頂生,花序梗從莖頂中央抽出,長20~30cm。花小,黃綠色;花萼5裂;花瓣、雄蕊皆為5。核果漿果狀,近腎形,熟時紅色。種子1~3,扁球形。花期6~8月,果期8~10月。
生於山坡叢林下。現多栽培於海拔800~1000m的山腳斜坡或土丘緩坡上。主產雲南、廣西、四川。
採制 種後第3年冬季及夏末初秋採挖。去須根,曝曬至半干,用於搓揉,再曝曬,重復數次,置麻袋中加蠟打光。
性狀 根圓錐形、紡錘形或不規則塊狀,長1.5~5cm,直徑1.2~2cm。表麵灰黃色或棕黑色,具蠟樣光澤,有不規則細紋及少數橫長皮孔;上部有數瘤狀隆起的支根斷痕,頂端殘留根莖基。質堅實,擊碎後皮部與木部常分離;橫切麵灰白色或黃棕色,皮部有棕色小點(樹脂道),味苦、微甜。
化學成分 含皂甙,主要為人參皂甙Rb1、Rg1 、Rg2和少量人參皂甙Ra、Rb2、Rb和Re。此外,尚含黃酮甙、澱粉、蛋白質、油脂等。
性味 性溫,味甘、微苦。
功能主治 散瘀止血,消腫定痛。用於各種內、外出血,胸腹刺痛,跌撲腫痛。
三七種植過程和種植要求
三七是一種十分嬌嫩的植物,需要在人工搭建的蔭棚下生長,對光的需求僅為自然光強的10~20%,對水分的要求也很苛刻,不能過多,也不能過少。因此,在長達3年的生長過程中,更需要人們的精心管理和細心呵護。稍不留神就會全軍覆沒,顆粒無收。為此,文山州專門成立了文山州三七研究所來對其進行專門的研究,了解它們的脾氣,研究保護它們順利成長的方法。在三七栽培過程中,人們需要經過選地、整地、播種、定植、施肥、防治各種病蟲害等一系列的管理,才能獲得豐收的喜悅。三七種植過的土地要經過10年以上的輪作才能再進行種植。 [採收]經過3年漫長的悔則時間,三七終於可以收獲了。三七最佳的收獲時間每年的9~11月,也就是中秋節前後。這段時間採收的三七產量高,質量好。根據文山州三七研究所專家們的研究結果,9~11月三七中的總皂苷、三七素、黃酮和多糖等活性成分均上一年中含量最高的。 三七採收後必須立刻進行初加工。加工方法是在潔凈的地方,摘除地上莖,洗凈泥土,剪去根莖、支根和須根。然後進行晾曬或50~55℃衡溫烘烤,然後進行手工揉搓,修剪、分級、檢測、包裝。
Ⅵ 粗多糖提純的方法有哪些
西安市天園生物制劑廠
大豆粗多糖:是從大豆籽粒中提取出的可溶性寡糖的總稱,大豆中的寡糖屬於а-半乳糖苷類,包括棉籽糖、水蘇糖和Vabascose.
(1)、促進雙歧桿菌的增殖:人體雖然不能直接利用粗多糖,但是粗多糖可被腸內細菌利用,並且能促進雙歧桿菌的增殖。雙歧桿菌是一種厭氧革蘭氏陽性細菌,是維護和保持腸道菌群平衡的一個極為重要的因素,也是判斷腸內外環境是否正常的一個可靠依據。
(2)、抑制病原菌:大豆粗多糖能促進雙歧桿菌的增殖,從而抑制有害細菌如產生梭狀芽孢桿菌的生長。雙歧桿菌能發酵粗多糖產生短鏈脂肪酸和一些抗菌素物質,從而可抑制外源致病菌和腸內固有腐敗細菌的生長繁殖。
(3)、防止便秘、腹脹,促進消化,調節胃腸功能:腸道內的雙歧桿菌發酵粗多糖產生大量的短鏈脂肪酸(主要是醋酸和乳酸),能刺激腸道蠕動,從而促進消化,防止便秘的產生。
(4)、增強免疫功能:如果人較長期的食用無細菌食物,腸道就會因為缺少刺激而使其產生抗體的能力下降,從而容易誘發疾病。食用粗多糖,促進雙歧桿菌的增殖,將對腸道免疫細胞產生刺激,提高其產生抗體的能力從而起到防治疾病的效果。
Ⅶ 多糖提取方法有哪些
溶劑提取法
溶劑提取法是從植物中提取多糖的常用方法,溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑,一般應遵循相似相溶的原則,即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑,極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物,應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中,水是典型的強極性溶劑,對植物組織的穿透力
強,提取效率高,在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖,被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時,可以用熱水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法,該法所得多糖提液可直接或離心除去肢高不溶物;或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質,用高濃度乙醇沉澱提純多糖;但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同,它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離;還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離;其中,以乙醇沉澱最為普遍。劉青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,熱水提取控制條件為:溫度為20~100℃,水與紫
菜的液固質量比為50:1,提取時間30~180min,經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素:浸提溫度為煮沸(102℃),ph為3.0,
浸提時間為3h,液固質量比為40:1。李戰對三種紫球
藻的提取工藝研究表明,三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%,乙醇用量為3倍體積,醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1,樣液與sevag試劑的比例1:2,作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%,乙醇用量為2倍體積,醇沉時間為1h,氯仿與正
丁醇的比例3:1,樣液與sevag試劑的比例1:2,作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積,醇沉時間為0.5h,氯歷陵尺仿與
正丁醇的比例4:1,樣液與sevag試劑的比例2:1,作用
時間為45min。
酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性,因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢,而
且即使有優勢,在操作上還應嚴格控制酸鹼度。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時,可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外,稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析,濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇等對海篙
子多糖的提取方法研究發現,從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為:100g海
篙子乾粉,加入1000ml 0.1mo1/l hcl溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾,重復操作三遍,合並濾液;濾液減壓濃
縮至總體積的1/5,再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%,沉澱,離心除去沉澱中的褐藻酸,繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全,離心,沉澱乾燥得海篙子粗多糖,多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提,以稀酸提取茜草多糖,產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%hcl浸泡、離心、取上
清液加入etoh並調節至濃度為7%,靜置,2500rpm
離心,收集棕色沉澱物,95%etoh洗滌3次,用45%
hcl溶解。加1%活性炭脫色,真空抽濾,濾液4℃過
夜,棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內,逆水
法透析3d,冷凍乾燥,得白色粉末狀多糖約10g。
hayashi katsuhiko發明了一種從綠色藻類中提取酸汪耐
性多糖的方法,而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為:將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液,熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離,取粘稠的固狀物,加入鹼水,在ph≥10的條件下
再進行攪拌提取,鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節ph值為3.0~4.0,靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術,在多糖的提取過程中,使用酶可降低提取
條件,在比較溫和的條件中分解植物組織,加速多糖的
釋放或提取。此外,使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物,常用的酶有蛋白酶,纖維素酶,果
膠酶等。孟江研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響,根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取,後
木瓜蛋白酶提取),接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(ph=7.0)、胃蛋白酶(ph=2.0)。復合酶2作用條件溫
和,多糖得率及含量較高,且蛋白含量較低,實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝:先用胰蛋白酶3%,40倍體積在ph=7.0,65℃溫
浸1.5h後,再加木瓜蛋白酶2.5%,在ph=7.0,50℃水
溫浸1h,過濾殘渣加40倍體積水,迅速升溫至80℃,
然後溫浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法還有超濾法,超聲波強
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新,但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時,應當根據目標多糖的特點、物理化學性質,綜合比
Ⅷ 多糖的提取方法
問題一:實驗室多糖的提取方法請問有幾種和具體步驟 提取率要看你具體的提取條件了,即使都是用水提法,不同的條件、不同的原料,得到的提取率也不一樣,找篇文章給你參考吧。
枸杞多糖水提工藝的優選
植飛 鄭衛平 陳平 何梅仙
(1.武漢工業學院制葯教研室,武漢430023;2.中國葯科大學,南京210000)
摘要:目的:確定枸杞多糖最佳提取條件。方法:分別以多糖得率及多糖含量為考察指標,以正交實驗法確定枸杞多糖的最佳提取工藝。結果:枸杞多糖的最佳提取工藝為:取枸杞葯材,第一次加水l0倍,以後每次加水8倍掘瞎量,共冷浸3次;每次冷浸1 h;每小時攪拌10 min。結論:本法為枸杞多糖水腔散磨提工藝的伍斗確定提供實驗依據。
問題二:多糖提取中水提法的具體步驟 10分 將原料浸沒在水中,加熱至50-100℃,保溫20分鍾-2小時,具體參數要看原料的性質,多糖會大部分溶解在水中,將多糖水溶液減壓濃縮,噴霧乾燥可以得到多糖的乾粉。
Ⅸ 三七多糖的提取原料來源於
總皂苷的葯渣。三七多糖的提取原料來源於總皂苷的葯渣,三七多糖是戚坦三七粉中的一種成份,有止血作用。以提取過三七總皂苷的高型桐葯渣為原料,經過水提醇沉、sevage法除蛋白、活性炭除色素、陰離子交換纖維素柱層析純化等租啟步驟,得到三七多糖。
Ⅹ 多糖的提取有哪些方法
植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波虛肆、超聲波,膜處理雀棗和CO超臨界萃頃譽拆取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.