❶ 常用的酵母菌轉化方法有哪些
幾種酵母轉化方法；酵母轉化原理：；像釀酒酵母,線性化的轉化DNA和Pichiapa；電轉化注意點：；一、制備感受態的菌液收集時間：；1、准確測定OD值：OD在1.2～1.5之間；1）為了准確測定OD值，建議將菌液稀釋不同濃度測；2）OD值是否測准也可以這樣估算：OD600為4；2、75ml的菌，經18h左右的培養，最後sor；1.5之間的500ml菌液，收集
幾種酵母轉化方法
酵母轉化原理：
像釀酒酵母,線性化的轉化DNA和Pichiapastoris基因組的同源區域發生同源重組,使得線性化DNA產生穩定的轉化子（Cregg
et al., 1985; Cregg
etal.,1989）.這樣的整合方式顯示極強的穩定性,即使多拷貝轉化子在沒有選擇壓力的情況下也很穩定.單交換事件（插入）比雙交換事件（置換）發生幾率更大.單插入事件中約發生1-10%概率的多插入事件.
電轉化注意點：
一、 制備感受態的菌液收集時間：
1、准確測定OD值：OD在1.2～1.5之間。
1） 為了准確測定OD值，建議將菌液稀釋不同濃度測定（1、2、4、8、16倍稀釋，看其OD值是否呈線性關系）。每個倍數做3－5個重復，應該可以大致推斷OD值是否准確！菌液看上去渾濁，但OD值不高，很可能OD稀釋倍數不夠！
2） OD值是否測准也可以這樣估算：OD600為40左右時，菌體濕重（6000rpm離心5min）約0.95g/10ml。高密度發酵時菌體濕重將相應下降。
2、75ml的菌，經18h左右的培養，最後sorbital洗滌完畢後，50ml離心管里所剩菌體特別濃，需要1mlsorbitol才可溶解為糊狀。正常培養的OD在1.2～
1.5之間的500ml菌液，收集的感受態也用1ml稀釋的，沒那麼粘稠。可以看看降低培養溫度（27攝氏度）或縮短培養時間（12h）。
3、甚至不用轉接,直接挑單克隆在50－100mlYPD中搖過夜，效果也很好