常用溶劑的脫氣方法

① 什麼是脫氣

流動相使用前為什麼要脫氣
流動相使用前必須進行脫氣處理 ，以除去其中溶解的氣體（如O2），以防止在洗脫過程中當流動相由色譜柱流至檢測器時，因壓力降低而產生氣泡。氣泡會增加基線的噪音，造成靈敏度下降，甚至無法分析。溶解的氧氣還會導致樣品中某些組份被氧化，柱中固定相發生降解而改變柱的分離性能。若用FLD，可能會造成熒光猝滅。

常用的脫氣方法比較：

氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續吹氦脫氣，效果較好，但成本高。

加熱迴流法：效果較好，但操作復雜，且有毒性揮發污染。

抽真空脫氣法：易抽走有機相。

超聲脫氣法：流動相放在超聲波容器中，用超聲波振盪10-15min，此法效果最差。

在線真空脫氣法：Agilent1100LC真空離線利用膜滲透技術， 在線脫氣，智能控制，無需額外操作，成本低，脫氣效果明顯優於以上幾種方法，並適用於多元溶劑體系。

② 高效液相色譜法使用流動相前為什麼要脫氣方法有哪些

HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。

雜訊增大，基線不穩，突然跳動。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑pH的變化，對分離或分析結果帶來誤差。

常用的脫氣方法有：加熱煮沸、抽真空、超聲、吹氦等。

高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。

(2)常用溶劑的脫氣方法擴展閱讀：

液相色譜和質譜連接，可以增加額外的分析能力，能夠准確鑒定和定量像細胞和組織裂解液，血液，血漿，尿液和口腔液等復雜樣品基質中的微量化合物

流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質在兩相間進行分配。達到平衡時，服從於高效液相色譜計算公式。

式中，cs—溶質在固定相中濃度；cm—溶質在流動相中的濃度； Vs—固定相的體積；Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決於K，K大的組分保留值大；但也有不同之處，GPC中，流動相對K影響不大，LLPC流動相對K影響較大。

③ 液相色譜儀的流動相為什麼要脫氣常用的脫氣方法有哪幾種

氣泡會影響柱的分離效果，影響檢測器的靈敏度、基線的穩定，甚至無法工作

1.如果不排氣，容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作

2.溶解氣體會引起溶劑pH的變化，給分析或分離帶來誤差

3.溶解在流動相的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。

4.溶解氧能與某些溶劑（如甲醇、四氫呋喃）形成有紫外吸收的配合物，會提高背景吸收，並導致檢測靈敏度的輕微降低。

5.在梯度洗脫時會造成基線漂移或形成鬼峰（假峰）

6.在熒光檢測中，溶解氧在一定條件下還會引起猝滅現象，特別是對芳香烴、脂肪醛、酮等

常用的脫氣方法有超聲波震動脫氣、抽真空脫氣、加熱迴流脫氣、吹氦氣脫氣以及在線真空脫氣。

最簡單的脫氣方法是超聲震動脫氣，脫氣效果最佳的是在線真空脫氣。