常用沉澱蛋白的方法

❶ 蛋白質沉澱的方法有那些，各有什麼特點

沉澱蛋白質的方法主要有：鹽析、有機溶劑、生物鹼試劑、重金屬鹽、加熱凝固。
分析如下：
（1）鹽析破壞蛋白質的水化膜和電荷，採用不同濃度鹽可將不同的蛋白質分段析出，鹽析的蛋白質不變性，鹽析作用是可逆的。（2）有機溶劑可破壞蛋白質的水化膜，若調節pH=pI，則更易沉澱。低溫操作，快速分離溶劑不會使蛋白質變性，而常溫操作，蛋白質易變性。（3）沉澱生物鹼試劑：鎢酸、三氯乙酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質結合沉澱，會使蛋白質變性。（4）重金屬離子可與帶負電荷的蛋白質結合沉澱，會使蛋白質變性。（5）在等電點加熱蛋白質可形成凝塊沉澱，會使蛋白質變性。

❷ 請問使蛋白質沉澱的方法有幾種

使蛋白質沉澱的方法有3種。

1、鹽析法

在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出，這種方法稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等。例如用半飽和的硫酸銨來沉澱出血清中的球蛋白，飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉澱出來，鹽析沉澱的蛋白質，經透析除鹽，仍保證蛋白質的活性。

2、重金屬鹽沉澱蛋白質

蛋白質可以與重金屬離子如汞、鉛、銅、銀等結合成鹽沉澱。重金屬沉澱的蛋白質常是變性的，但若在低溫條件下，並控制重金屬離子濃度，也可用於分離制備不變性的蛋白質。如臨床上利用蛋白質能與重金屬鹽結合的這種性質，搶救誤服重金屬鹽中毒的病人，給病人口服大量蛋白質，然後用催吐劑將結合的重金屬鹽嘔吐出來解毒。

3、生物鹼試劑以及某些酸類沉澱蛋白質

蛋白質又可與生物鹼試劑（如苦味酸、鎢酸、鞣酸）以及某些酸（如三氯醋酸、過氯酸、硝酸）結合成不溶性的鹽沉澱。如臨床血液化學分析時常利用此原理除去血液中的蛋白質，此類沉澱反應也可用於檢驗尿中蛋白質。

(2)常用沉澱蛋白的方法擴展閱讀：

蛋白質的沉澱可分為兩類：

1、可逆的沉澱反應：蛋白質分子的結構尚未發生顯著變化，除去引起沉澱的因素後，蛋白質的沉澱仍能溶解於原來的溶劑中，並保持其天然性質而不變性。如大多數蛋白質的鹽析作用或低溫下用乙醇（或丙酮）短時間作用於蛋白質。

2、不可逆的沉澱反應：蛋白質分子內部結構發生重大改變，蛋白質常變性而沉澱，不再溶於原來溶劑中。如加熱引起的蛋白質沉澱與凝固，蛋白質與重金屬離子或某些有機酸的反應。

❸ 蛋白質沉澱有哪幾種方法哪些是可逆的沉澱反應

蛋白質沉澱 蛋白質在溶液中的穩定性是有條件的、相對的.如果條件發生改變,破壞了蛋白質溶液的穩定性,蛋白質分子則聚集成大的顆粒沉澱出來.
蛋白質溶液的穩定性與質點大小、電荷和水化作用有關,只要破壞這些條件,蛋白質自然會從溶液中沉澱出.
沉澱蛋白質有以下方法：
1、鹽析法
2、有機溶劑沉澱法
3、重金屬鹽沉澱法
4、生物鹼試劑和某些酸（三氯醋酸,磺基水楊酸,硝酸等）沉澱法
5、加熱變性沉澱法
蛋白質變性：蛋白質的天然構象遭到破壞導致其生物活性喪失的現象.蛋白質在受到光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時,次級鍵受到破壞,導致天然構象的破壞,使蛋白質的生物活性喪失.
蛋白質分子凝聚從溶液中析出的現象稱為蛋白質沉澱（precipitation）,變性蛋白質一般易於沉澱,但也可不變性而使蛋白質沉澱,在一定條件下,變性的蛋白質也可不發生沉澱.
蛋白質所形成的親水膠體顆粒具有兩種穩定因素,即顆粒表面的水化層和電荷.若無外加條件,不致互相凝集.然而除掉這兩個穩定因素（如調節溶液pH至等電點和加入脫水劑）蛋白質便容易凝集析出.
可以看出,如將蛋白質溶液pH調節到等電點,蛋白質分子呈等電狀態,雖然分子間同性電荷相互排斥作用消失了.但是還有水化膜起保護作用,一般不致於發生凝聚作用,如果這時再加入某種脫水劑,除去蛋白質分子的水化膜,則蛋白質分子就會互相凝聚而析出沉澱；反之,若先使蛋白質脫水,然後再調節pH到等電點,也同樣可使蛋白質沉澱析出.

❹ 蛋白質沉澱法原理

原理：蛋白質通過鹽析的辦法沉澱的原理是降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出。

蛋白質分子聚集而從溶液中析出的現象，稱為蛋白質的沉澱。由於水化層和雙電層的存在，蛋白質溶液是一種穩定的膠體溶液。如果向蛋白質溶液中加入某種電解質，以破壞其顆粒表面的雙電層或調節溶液的pH，使其達到等電點，蛋白質顆粒因失去電荷變得不穩定而將沉澱析出。

蛋白沉澱法是毒物分析過程中對生物樣品進行前處理的一種常用方式。對於富 含蛋白質的檢材，在進行分離、提取時要將 大量干擾測定的蛋白質沉澱除去，使待測毒 物仍留存於溶液中。

操作時一般要先將檢材組織磨碎，然後再加入蛋白沉澱劑進行蛋白質沉澱，組織中的蛋白質與沉澱劑形成疏鬆的絮狀沉澱物，而毒物則留在溶液中。

(4)常用沉澱蛋白的方法擴展閱讀：

有機溶劑易使蛋白質或酶變性，常採用降低溫度的方法進行有效控制， 而且有機溶劑使用量大，溶劑的使用及回收；儲存都比較困難或 麻煩。 鹽析法：鹽析法簡單方便，可用於蛋白質抗原的粗提、丙種 球蛋白的提取、蛋白質的濃縮等。

鹽析法提純的抗原濃度不高，只用於抗原的初步純化。 金屬離子沉澱法純度高,太耗電，沉澱效果很好，容易使生物分 子變性，復合物難分解。

選澤性變性沉澱法：溶解度下降、粘度 增加、紫外線吸收增加、側鏈反應增強、對酶的作用敏感，易被 水解 （這就是為何蛋白類食品在被加熱至變性後人體對其中氨基 酸的吸收。能力增強） 等電點沉澱法無機酸會引起較大的蛋白質不可逆變性的危險等電點裝置復雜,也比較純。

蛋白質變性指在某些物理和化學因素如熱、有機溶劑、重金屬離子、生物鹼試劑等作用下，蛋白質特定的空間構象被破壞，也即有序的空間結構變成無序的空間結構，從而導致其理化性質改變和生物活性的喪失。

❺ 加熱沉澱蛋白質

加熱沉澱蛋白質將接近於等電點附近的蛋白質溶液加熱，可使蛋白質發生凝固而沉澱。加熱首先是加熱使蛋白質變性，有規則的肽鏈結構被打開呈鬆散狀不規則的結構，分子的不對稱性增加，疏水基團暴露，進而凝聚成凝膠狀的蛋白塊。
蛋白質從溶液中析出的現象，稱為蛋白質的沉澱。蛋白質沉澱常用的方法有鹽析、等電點沉澱、有機溶劑沉澱、生物鹼試劑與某些酸沉澱等。
蛋白質的沉澱，沉澱是溶液中的溶質由液相變成固相析出的過程。蛋白質從溶液中析出的現象，稱為蛋白質的沉澱。蛋白質沉澱常用的方法有鹽析、等電點沉澱、有

❻ 有哪些方法可使蛋白質沉澱，沉澱的原理是什麼，有何實用意義

鹽析法可以使蛋白質沉澱。x0dx0a鹽析法的原理x0dx0a 蛋白質在水溶液中的溶解度取決於蛋白質分子表面離子周圍的水分子數目，亦即主要是由蛋白質分子外周親水基團與水形成水化膜的程度以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。蛋白質溶液中加入中性鹽後，由於中性鹽與水分子的親和力大於蛋白質，致使蛋白質分子周圍的水化層減弱乃至消失。同時，中性鹽加入蛋白質溶液後由於離子強度發生改變，蛋白質表面的電荷大量被中和，更加導致蛋白質溶解度降低，之蛋白質分子之間聚集而沉澱。由於各種蛋白質在不同鹽濃度中的溶解度不同，不同飽和度的鹽溶液沉澱的蛋白質不同，從而使之從其他蛋白中分離出來。簡單的說就是將硫酸銨、硫化鈉或氯化鈉等加入蛋白質溶液，使蛋白質表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導致蛋白質在水溶液中的穩定性因素去除而沉澱。x0dx0a---摘自網路

❼ 沉澱蛋白質的方法有哪些

（1）鹽析法，此方法並未破壞蛋白質天然狀態，沉澱出的蛋白質可不變性，所以鹽析法是分離制備蛋白質或蛋白類生物制劑的常用方法。
（2）有機溶劑沉澱法，通過破壞蛋白質的水化膜而使蛋白質沉澱，此方法在常溫下可使蛋白質變性，低溫下可使變性速度減慢。
（3）重金屬鹽沉澱法，可與蛋白質結合形成不溶於水的蛋白質鹽沉澱，引起蛋白質變性。臨床用於救重金屬鹽中毒。

❽ 沉澱蛋白質的方法有哪些，各有和特點

等電點沉澱法和鹽析

一、等電點沉澱法

等電點沉澱法是利用蛋白質在等電點時溶解度最低而各種蛋白質又具有不同等電點的特點進行分離的方法。

在等電點時，蛋白質分子以兩性離子形式存在，其分子凈電荷為零(即正負電荷相等)，此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉澱，所以蛋白質在等電點時，其溶解度最小，最易形成沉澱物。

等電點時的許多物理性質如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小，從而有利於懸浮液的過濾。

二、鹽析

鹽析是指在蛋白質水溶液中加入中性鹽，隨著鹽濃度增大而使蛋白質沉澱出來的現象。中性鹽是強電解質，溶解度又大，在蛋白質溶液中，一方面與蛋白質爭奪水分子，破壞蛋白質膠體顆粒表面的水膜；另一方面又大量中和蛋白質顆粒上的電荷，從而使水中蛋白質顆粒積聚而沉澱析出。

向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液後，可以降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析，是物理變化，可復原。向某些蛋白質溶液中加入某些重金屬鹽，可以使蛋白質性質發生改變而凝聚，進而從溶液中析出，這種作用叫作變性，性質改變，是化學反應，無法復原。

把動物脂肪或植物油與氫氧化鈉按一定比例放在皂化鍋內攪拌加熱，反應後形成的高級脂肪酸鈉、甘油、水形成混合物（膠體）。往鍋內加入食鹽顆粒，攪拌、靜置，使高級脂肪酸鈉與甘油、水分離，浮在液面。

(8)常用沉澱蛋白的方法擴展閱讀：

蛋白質的變性

1、物理因素包括：加熱、加壓、攪拌、振盪、紫外線照射、X射線、超聲波等

2、化學因素包括：強酸、強鹼、重金屬鹽、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。

3、在熱、酸、鹼、重金屬鹽、紫外線等作作用下，蛋白質會發生性質上的改變而凝結起來。這種凝結是不可逆的，不能再使它們恢復成原來的蛋白質．蛋白質的這種變化叫做變性。蛋白質變性之後，紫外吸收，化學活性以及粘度都會上升，變得容易水解，但溶解度會下降。

4、蛋白質變性後，就失去了原有的可溶性，也就失去了它們生理上的作用，因此蛋白質的變性凝固是個不可逆過程。

❾ 蛋白沉澱的方法和原理

蛋白質通過鹽析的辦法沉澱的原理是降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出。
蛋白質的沉澱是溶液中的溶質由液相變成固相析出的過程。蛋白質從溶液中析出的現象，稱為蛋白質的沉澱。蛋白質沉澱常用的方法有鹽析、等電點沉澱、有機溶劑沉澱、生物鹼試劑與某些酸（如三氯醋酸）沉澱等。