㈠ 空氣培養皿的放置方法及時間是什麼
空氣培養皿的放置方法技巧:主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用於植物材料、微生物培養和動物細胞的貼壁培養也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作,可以用於植物材料的培養。
空氣培養皿的放置時間:一般放48小時。
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使用小技巧:
1、浸泡:新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗,然後用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質和油脂,乾涸後不易刷洗掉,故用後應立即浸入清水中備刷洗。
2、刷洗:將浸泡後的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復刷洗。不要留死角,並防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾乾,備浸酸。
3、浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過酸液的強氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質。浸酸不應少於六小時,一般過夜或更長。放取器皿要小心。
4、沖洗:刷洗和浸酸後的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸後器皿沖洗干凈,直接影響到細胞培養的成敗。手工洗滌浸酸後的器皿,每件器皿至少要反復「注水-倒空」15次以上,最後用重蒸水浸洗2-3次,晾乾或烘乾後包裝備用。
㈡ 空氣培養的操作過程是什麼
空氣細菌培養的采樣方法檢測空氣細菌總數的細菌培養法平板暴露法,目前大部分醫療單位採用,在消毒處理後,操作前進行,室內面積≤30m2對角線內、中、外處設3點,內外點布位距牆壁1m處,室內面積>30m2設4角及中央5點,4角的布點部位距牆壁1m處。
基本原理是:空氣中細菌等微生物可隨塵粒一起下降。
培養方法:
1、厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的乾燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來。
2、厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。
放入已接種好的平板後,盡量擠出袋內空氣,然後密封袋口。先折斷氣體發生管,後折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
以上內容參考:網路-厭氧菌培養
㈢ 細菌培養的方法有哪些
根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法三種。
1、一般培養法:將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18-24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長。少數生長緩慢的細菌,需培養3-7天直至一個月才能生長。
為使培養箱內保持一定濕度,可在其內放置一杯水。培養時間較長的培養基,接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固,以防培養基乾裂。
2、二氧化碳培養法:某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格。將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,
3、厭氧培養法:常用的厭氧培養方法有厭氧罐法、氣袋法及厭氧箱三種。
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培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基,制定培養條件(溫度、pH值、時間,對氧的需求與否等)。
一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上,做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。
一般細菌可在有氧條件下,37℃中放18~24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2~3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。
通過日常管理、檢測、檢查,了解光合細菌的生長情況,就可以結合當時環境條件的變化進行分析,找出影響光合細菌生長繁殖的原因,採取相應的措施。影響光合細菌生長的原因很多,內因是菌種是否優良,外因是光照、溫度、營養、敵害和厭氣程度等。
溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長,而且溫度、光照和pH值之間是互相制約的,溫度與光照的強弱是對立統一的,所以光合細菌生長的最適條件應是互應的,即溫度高,光照應弱;溫度低,光照應強。
如果是溫度高,光照強,pH值就會迅速升高,培養基產生沉澱,抑制光台細菌的生長;如果溫度低,光照弱,光合細菌得不到最佳能源,生長速度也慢。經試驗得出光合細菌生長的最適條件是:
①溫度15~20℃時,光照30000~50000lx,培養基pH值為7.0;
②溫度25~30℃時,光照為3000~5000lx,培養基的pH值為7.0。
㈣ 如何做空氣培養
在做空氣培養前1小時,關閉室內門窗,打開層流,減少室內人員走動,使空氣靜止。從檢驗科取培養皿,途中應用包布包裹,做培養者戴好口罩帽子,將培養皿放於需做培養的房間內,打開5分鍾。
在采樣時禁止有人走動,采樣結束後,蓋好玻璃培養皿,填寫培養單,貼好標記,即用包布包裹後送細菌室培養。培養結果報告,由專人保存,除霉雨季節每月做二次空氣培養,其餘時間每月做一次。
布點方法
室內面積≤30m2設一條對角線,取3點即中心一點,兩端各距牆1m處取一點,室內面積30m2,設東、西、南、北、 中5點,其中東、西、南、北點均距牆1m。
采樣方法,用9cm直徑普通培養瓊脂平板放在采樣點暴露5分鍾後送檢培養用手指平提皿蓋將蓋邊緣斜擱培養皿邊緣上。
細菌菌落數標准,層流手術室≤5cfu/cm2。