在培養基純化細菌最常用的方法

① 細菌培養的方法有哪些

根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法三種。

1、一般培養法：將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18－24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長。少數生長緩慢的細菌，需培養3－7天直至一個月才能生長。

為使培養箱內保持一定濕度，可在其內放置一杯水。培養時間較長的培養基，接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固，以防培養基乾裂。

2、二氧化碳培養法：某些細菌，如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10％二氧化碳的空氣中才能生長，尤其是初代分離培養要求更為嚴格。將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法，

3、厭氧培養法：常用的厭氧培養方法有厭氧罐法、氣袋法及厭氧箱三種。

(1)在培養基純化細菌最常用的方法擴展閱讀：

培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基，制定培養條件（溫度、pH值、時間，對氧的需求與否等）。

一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。

一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。

通過日常管理、檢測、檢查，了解光合細菌的生長情況，就可以結合當時環境條件的變化進行分析，找出影響光合細菌生長繁殖的原因，採取相應的措施。影響光合細菌生長的原因很多，內因是菌種是否優良，外因是光照、溫度、營養、敵害和厭氣程度等。

溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長，而且溫度、光照和pH值之間是互相制約的，溫度與光照的強弱是對立統一的，所以光合細菌生長的最適條件應是互應的，即溫度高，光照應弱；溫度低，光照應強。

如果是溫度高，光照強，pH值就會迅速升高，培養基產生沉澱，抑制光台細菌的生長；如果溫度低，光照弱，光合細菌得不到最佳能源，生長速度也慢。經試驗得出光合細菌生長的最適條件是：

①溫度15～20℃時，光照30000～50000lx，培養基pH值為7.0；

②溫度25～30℃時，光照為3000～5000lx，培養基的pH值為7.0。

② 純化菌種的方法 簡單介紹一下

1、首先，精種的分離是整個工作的第一個關鍵步驟， 分離培養基的確定，分離培養條件的選擇，如培養溫度、濕度、好氧或厭機培養等，在分離的最初階段一般不給予嚴密的培養條件，盡可能分離到盡可能多的純菌種。

2、在這種情況下，在菌種的分離階段可以選用廣泛的分離培養基，各種分離培養基中還應針對性地加人目的酶產生菌的作用底物。分離對象可包括細菌、真菌、酵母菌及放線菌等。

3、分離條件也應做到多樣化，比如吸取的土樣稀釋液量的控制、不同的培養溫度選擇等。分離到的單菌落應立即轉移到分離成分一致的新鮮斜面上，等獲得純培養之後就可著手進行初篩。

4、菌種的初篩有兩種方法，用簡單的定性反應進行初篩，在最初分離階段就給予特殊的培養基或培養條件，進而讓目的菌株得以繁殖，盡可能地把只成為目的菌的菌株或只將其最適菌株的一株純化分離。總之，初篩的目的就是要用最簡單和最快捷的方法來對大量的待篩菌進行測試。

5、目的酶產生菌高產突變體的獲得，高產突變菌種有著十分重要的意義。首先，高產突變株常常能夠比親株產生高出很多倍數量的酶。在另外一些情況下，突變株能夠產生比較少的不需要的酶或其他代謝產物，因而有利於酶的回收和提純。

6、最後，獲得高產突變株的方法，採用物理和化學因子來處理微生物，並使其發生變異。常用的化學誘變劑有氮介子氣、亞硝酸、硫酸二乙酯、環氧乙燒、乙烯亞胺等。物理因子有: 紫外線、X射線、7 射線等。另外，還有其他的一些方法。

③ 如果菌種污染了,可以用怎樣的方法純化它

④ 微生物的分離與純化的常用方法有哪些

分離：

稀釋倒平皿法

平板劃線法

單細胞挑取法

利用選擇培養基分離法

純化：

1、若是你不知道你所要純化的微生物的特徵，最簡單的不知道它的菌落特徵和形態大小，那現根據你要分離菌的特性，找適合的初篩培養基，找到你要純化的菌。如纖維素菌，你在培養基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源，這樣就可以篩選出分解纖維素的菌。然後再用下面的方法繼續純化。

2、若你知道目標菌的形態，可以直接挑混合菌劃平板，直到長出當個菌落，並且在鏡下沒有雜菌即可；或者挑菌稀釋塗布得到當個菌落也行。

⑤ 如何純化菌種

菌種在分離、保藏和生產過程中，極易遭致雜菌污染，因此必須對染有雜菌的菌種進行提純，方能用於生產。根據污染的類型和程度，需採用不同的純化措施。
（1）排除細菌或酵母菌污染
在菌種培養中，用肉眼仔細觀察培養基表面，不難發現被細菌或酵母菌污染的分離物常出現黏稠狀的菌落。取被純化物接種在無冷凝水、硬度較高（瓊脂用量2.3%～2.5%）的斜面上，再降低培養溫度至15～20℃，利用某些大型真菌在較低的溫度下，菌絲生長速度比細菌蔓延速度快的特點，用尖細的接種針切割菌絲的前端，轉接到新的試管斜面培養基中培養，連續2～3次就能獲得所要的純菌絲。也可打破試管，挑取內部長有基內菌絲的瓊脂塊，移入無冷凝水的培養基上，該法適於被好氣性細菌污染的母種。
（2）排除黴菌污染
黴菌和細菌不同，它和食用菌菌絲很相似，也有氣生菌絲和基內菌絲。分離的方法主要是抑制雜菌生長，拉大食用菌菌絲生長和雜菌菌絲生長的范圍差，從食用菌菌落前端切割，移植入新培養基。雜菌發現越早，分離的成功率越大。嚴格地說，在斜面培養基上的非接種部位發現的白色菌絲，應認為是雜菌菌落，應馬上提純。若有色孢子已出現，一方面易使分生孢子飄散，另一方面其基內菌絲早已蔓延，可能和食用菌菌絲混生一起。如黴菌剛出現孢子且尚未成熟、變色，則可採用前端菌絲切割法提純。轉管時先將菌絲接種在斜面尖端，當長滿斜面後，及時將原接種點連同培養基一起挖掉；如黴菌菌落顏色已深，說明孢子已成熟，稍一振動孢子就會飄滿培養基，若再行上法意義不大。如菌絲蔓延范圍較大，可將0.2%升汞溶液或1%多菌靈處理過的濕濾紙塊覆蓋在黴菌的菌落上，可抑制黴菌生長，防止孢子擴散，後用滅菌接種鏟將表層鏟掉，隨之用接種針鉤取基內菌絲移入新的培養基，如此2～3次。
（3）限制培養
取直徑7～10毫米、高4～6毫米的玻璃環或不銹鋼環，經酒精燈火焰灼燒後趁熱放到斜面培養基中央，將環的一半嵌入培養基內，然後將染有細菌的接種塊放入環內進行培養。細菌生長會被限制在環內，而食用菌菌絲則可越過環而長到環外的培養基上，轉管後即可得到純化。
（4）覆蓋培養
在污染了細菌的食用菌菌絲斜面上傾注一層厚約2毫米的培養基，培養一段時間，當食用菌菌絲透過培養基形成新的菌落時，即可切割轉管。最好進行二次覆蓋。
（5）基質菌絲純化培養
對棉塞長有黴菌的試管斜面，可將試管打碎，取出培養基，用0.1%升汞浸泡2分鍾，用無菌水淋洗，再用無菌濾紙吸干。取一段2厘米的培養基從中部切開，在斷面上用無菌刀片切成米粒大小的塊，移入新的斜面上進行培養。
（6）葯物處理
菌種提純時，可向培養基中注入選擇性強的抗菌制劑，如加入 5～10毫克/升的多菌靈（MBC）、涕必靈（TBZ）或托布津等，可有效地防止菌霉混生；在每毫升培養基中加入30～40毫克鏈黴素、20～30毫克四環素、金黴素，或50毫克高錳酸鉀，可以有效地防止細菌混生；加入灰黃黴素（20單位/毫升），可抑制真菌生長。
（7）破碎菌絲
從試管中取出已污染的培養基，放在0.1%升汞水中處理2分鍾，用無菌水沖洗，無菌紙吸干，再放入有玻璃珠的無菌水內，經組織破碎，稀釋後注入平板培養，取其單個菌落純化培養。

⑥ 求細菌分離純化的詳細方法

平板劃線分離，在平板培養出單個細菌菌落後可以做鏡檢觀察。

稀釋倒平板法：先把微生物懸液作一系列的稀釋，分別取不同稀釋液少許，與已熔化並冷卻至50℃左右的瓊脂培養基混合，搖勻後傾入滅過菌的培養皿中，待瓊脂凝固後，製成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養一定時間即可出現菌落。

如果稀釋得當，在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨後挑取該單個菌落，或重復以上操作數次，便可得到純培養。

培養基與菌種分離

培養基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作技術。菌種分離主要在培養皿上進行，常用的方法是稀釋法和劃線法。使用這兩種方法的目的是是微生物的一個個體通過繁殖，在固體培養基上長出肉眼能見的群體，根據培養特徵，用接種針調取所需菌種並在顯微鏡下檢查，證明為單一形狀的菌體。常用的培養基是選擇培養基。

如分離分解纖維素的微生物用的培養基是以纖維素為碳源的培養基，因為從這種培養基上長出來的只能是分解纖維素的微生物。

以上內容參考：網路-菌種分離

⑦ 純化菌種，為了得到單菌落，常採用的接種方法有嗎些

常採用的接種方法有兩種：一個是平板劃線法，另一個是稀釋塗布平板法。這倆種最為常用且操作相對簡易。

⑧ 試述常用的細菌分離方法及其用途

分離純化的目的，都是為了獲得特定的、純的微生物
方法有以下幾種，其實只要掌握簡單的固體培養基分離純化就夠你使用了，其他的可以了解一下，我是這樣認為
因為具體方法內容太多，所以只列出了方法名稱。

從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。
1、用固體培養基分離和純化
1.1 稀釋倒平板法
1.2 塗布平板法
1.3 平板劃線法
1.4 稀釋搖管法
2、用液體培養基分離和純化
3、單細胞（孢子）分離
4、選擇培養分離
4.1 利用選擇平板進行直接分離
4.2 富集培養
5、二元培養物