納氏比色管的使用方法

❶ 納氏試劑比色法的比色法

納氏試劑比色法
1 原理
碘化汞和碘化鉀的鹼性溶液與氨反映生成淡紅棕色膠態化合物,其色度與氨氮含量成正比,通常可在波長410~425nm范圍內測其吸光度,計算其含量.
本法最低檢出濃度為0.025mg/L(光度法),測定上限為2mg/L.採用目視比色法,最低檢出濃度為0.02mg/L.水樣做適當的預處理後,本法可用於地面水,地下水,工業廢水和生活污水中氨氮的測定.
2 儀器
2.1 帶氮球的定氮蒸餾裝置:500mL凱氏燒瓶,氮球,直形冷凝管和導管.
2.2 分光光度計
2.3 pH計
3 試劑 配製試劑用水均應為無氨水
3.1 無氨水可選用下列方法之一進行制備:
3.1.1 蒸餾法:每升蒸餾水中加0.1mL硫酸,在全玻璃蒸餾器中重蒸餾,棄去50mL初餾液,按取其餘餾出液於具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存.
3.1.2 離子交換法:使蒸餾水通過強酸型陽離子交換樹脂柱.
3.2 1mol/L鹽酸溶液.
3.3 1mol/L氫氧化納溶液.
3.4 輕質氧化鎂(MgO):將氧化鎂在500℃下加熱,以除去碳酸鹽.
3.5 0.05%溴百里酚藍指示液:pH6.0~7.6.
3.6 防沫劑,如石蠟碎片.
3.7 吸收液:
3.7.1 硼酸溶液:稱取20g硼酸溶於水,稀釋至1L.
3.7.2 0.01mol/L硫酸溶液.
3.8 納氏試劑:可選擇下列方法之一制備:
3.8.1 稱取20g碘化鉀溶於約100mL水中,邊攪拌邊分次少量加入二氯化汞(HgCl2)結晶粉末(約10g),至出現朱紅色沉澱不易溶解時,改寫滴加飽和二氯化汞溶液,並充分攪拌,當出現微量朱紅色沉澱不再溶解時,停止滴加二氯化汞溶液.
另稱取60g氫氧化鉀溶於水,並稀釋至250mL,冷卻至室溫後,將上述溶液徐徐注入氫氧化鉀溶液中,用水稀釋至400mL,混勻.靜置過夜將上清液移入聚乙烯瓶中,密塞保存.
3.8.2 稱取16g氫氧化納,溶於50mL水中,充分冷卻至室溫.
另稱取7g碘化鉀和碘化汞(HgI2)溶於水,然後將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化納溶液中,用水稀釋至100mL,貯於聚乙烯瓶中,密塞保存.
3.9 酒石酸鉀納溶液:稱取50g酒石酸鉀納KNaC4H4O6·4H2O)溶於100mL水中,加熱煮沸以除去氨,放冷,定容至100Ml.
3.10 銨標准貯備溶液:稱取3.819g經100℃乾燥過的優級純氯化銨(NH4Cl)溶於水中,移入1000mL容量瓶中,稀釋至標線.此溶液每毫升含1.00mg氨氮.
3.11 銨標准使用溶液:移取5.00mL銨標准貯備液於500mL容量瓶中,用水稀釋至標線.此溶液每毫升含0.010mg氨氮.
4 測定步驟
4.1 水樣預處理:取250mL水樣(如氨氮含量較高,可取適量並加水至250mL,使氨氮含量不超過2.5mg),移入凱氏燒瓶中,加數滴溴百里酚藍指示液,用氫氧化納溶液或鹽酸溶液調節至pH7左右.加入0.25g輕質氧化鎂和數粒玻璃珠,立即連接氮球和冷凝管,導管下端插入吸收液液面下.加熱蒸餾,至餾出液達200mL時,停止蒸餾,定容至250mL.
採用酸滴定法或納氏比色法時,以50mL硼酸溶液為吸收液;採用水楊酸-次氯酸鹽比色法時,改用50mL0.01mol/L硫酸溶液為吸收液.
4.2 標准曲線的繪制:吸取0,0.50,1.00,3.00,7.00和10.0mL銨標准使用液分別於50mL比色管中,加水至標線,加1.0mL酒石酸鉀溶液,混勻.加1.5mL納氏試劑,混勻.放置10min後,在波長420nm處,用光程20mm比色皿,以水為參比,測定吸光度. 由測得的吸光度,減去零濃度空白管的吸光度後,得到校正吸光度,繪制以氨氮含量(mg)對校正吸光度的標准曲線.
4.3 水樣的測定:
4.3.1分取適量經絮凝沉澱預處理後的水樣(使氨氮含量不超過0.1mg),加入50mL比色管中,稀釋至標線,家0.1mL酒石酸鉀納溶液.以下同標准曲線的繪制.
4.3.2 分取適量經蒸餾預處理後的餾出液,加入50mL比色管中,加一定量1mol/L氫氧化納溶液,以中和硼酸,稀釋至標線.加1.5mL納氏試劑,混勻.放置10min後,同標准曲線步驟測量吸光度.
4.4 空白實驗:以無氨水代替水樣,做全程序空白測定.
5 計算
由水樣測得的吸光度減去空白實驗的吸光度後,從標准曲線上查得氨氮量(mg)後,
按下式計算:
氨氮(N,mg/L)=m/V×1000
式中:m——由標准曲線查得的氨氮量,mg; V——水樣體積,mL.
6 注意事項:
6.1 納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例,對顯色反應的靈敏度有較大影響.靜置後生成的沉澱應除去.
6.2 濾紙中常含痕量銨鹽,使用時注意用無氨水洗滌.所用玻璃皿應避免實驗室空氣中氨的玷污.

❷ 氨氮納氏試劑測試方法

首先所需試劑：納氏試劑,酒石酸鉀鈉溶液,銨標准使用溶液.
步驟：
1.標准曲線的繪制
1.1 吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0銨標准使用也於50ml比色管中,加水至標線,加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液,混勻.加1.5ml納氏試劑,混勻.放置10min後,在波長為420nm處,用光程20nm比色皿,以水為參比,測量吸光度.
1.2 由測得的吸光度,減去另濃度空白的吸光度後,得到校正吸光度,繪制標准曲線.
2.水樣的測定：分取適量預處理後的水樣（最好使氨氮含量不超過0.1mg）,加入50ml比色管中,加水至標線,加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液,以下同標線的繪制.
3.以無氨水代替水樣,做空白測定.
最後,帶入標曲即可

❸ 重金屬檢查可以用10ml比色管嗎

礦物石膏與玄明粉中重金屬的檢查

一,目的要求

1,掌握重金屬檢查的方法與原理.

2,熟悉目視比色法的操作與判斷.

二,基本原理

目視比色法是以肉眼直接觀察比較樣品溶液與標准品溶液的顏色深淺,判斷樣品所含雜質是否超出規定限度.重金屬在實驗條件下都能與硫代乙醯胺或硫化鈉反應顯色,生成黑色硫化物沉澱,標准溶液常以Pb2+為代表,其原理為:

在酸性溶液中

CH3CSNH2+H20 CH3CONH2+H2S↑?

Pb2++H2S? pbS↓?(黑色)

在鹼性溶液中

Pb2++Na2S? pbS↓(黑色)+2Na+

三,儀器與試

1,電爐,25ml納氏比色管及比色管架.

2,萬分之一分析天平.

3,量瓶,刻度吸管,燒杯,錐形瓶,量筒等.

4,其他試劑均為AR級.

5,石膏,玄明粉(市售品).

四,操作步驟

1. ?石膏重金屬檢查 取樣品16g,加冰醋酸4ml與水96ml,煮沸10分鍾,放冷,濾過,用水洗滌並定容至100ml.取25ml納氏比色管2支,甲管中加標准鉛溶液2ml與醋酸鹽緩沖液(pH=3.5)2ml後加水使成25ml.乙管加樣品濾液25ml,在甲乙兩管中分別加硫代乙醯胺試液2ml,搖勻,放置2分鍾,同置白紙上,自上向下透視,乙管中顯出的顏色與甲管比較,不得更深.

2. 2.?玄明粉重金屬檢查 取25ml納氏比色管2支,甲管中加標准鉛溶液2ml與醋酸鹽緩沖液(pH=3.5)2ml後,加水使成25ml,乙管取玄明粉1.0g,加醋酸鹽緩沖液2ml與適量水溶解成25ml.在甲乙兩管中分別加入硫代乙醯胺試液各2ml,搖勻,同置白紙上,自上向下透視,乙管中顯出的顏色與甲管比較,不得更深.

3. 附 注

4. 1.?標准鉛溶液的配製 精密稱取在105℃乾燥至恆重的硝酸鉛0.1598g置1000ml量瓶中,加硝酸5ml,水50ml溶解後,用水稀釋至刻度,搖勻,作為儲備液.

5. 臨用前,精密量取儲備液10ml,置100ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml相當於10μg的Pb).

6. 2.?硫代乙醯胺試液的配製 取硫代乙醯胺4g,加水使溶解成100ml,置冰箱中保存,臨用前取混合液(由1mol/L 氫氧化鈉溶液15ml,水5.0ml及甘油20ml組成)5.0ml,加上述硫代乙醯胺溶液1.0ml,置水浴上加熱20秒鍾,冷卻,立即使用.

7. 3.?醋酸鹽緩沖液的配製(pH3.5) 取醋酸銨25g加水25ml溶解後,加7mol/L鹽酸溶液38ml,用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液准確調節pH值至3.5(電位法指示),用水稀釋至100ml,即得.
   

❹ 氯化物檢查法的原理

利用氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀試液作用，生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標准氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，以判斷供試品中的氯化物是否超過了限量。

除另有規定外，取各葯品項下規定量的供試品，加水溶解使成25ml(溶液如顯鹼性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10ml；溶液如不澄清，應濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml，搖勻，即得供試溶液。

另取各葯品項下規定量的標准氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，搖勻，即得對照溶液。於供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0ml，用水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得。

(4)納氏比色管的使用方法擴展閱讀

注意事項：檢查在硝酸酸性溶液中進行。加入硝酸可避免弱酸銀鹽(如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀)沉澱的形成而干擾檢查，同時還可加速氯化銀沉澱的生成並產生較好的乳濁。酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

為了避免光線使單質銀析出，在觀察前應在暗處放置5min。由於氯化銀為白色沉澱，比較時應將比色管置黑色背景上，從上方向下觀察，比較。有的葯物在以上條件下對檢查有干擾，應作一定處理後再檢查。供試品溶液如不澄清，可用含硝酸的水洗滌濾紙中的氯化物後濾過，取濾液進行檢查。

❺ 講解一下納氏試劑比色法測氨氮的具體步驟謝謝！

空白樣：取50ml蒸餾水，加酒石酸鉀鈉（1ml）和納氏試劑（1.5ml）靜置10min，420nm波長比色
水樣：取100ml水樣於250ml錐形瓶，加1ml硫酸鋅，再加1ml氫氧化鈉，PH調至7左右，過濾到50ml比色管中，取過濾後的水樣（一般取25ml，濃度過高的可以量少取於比色管中，最後安稀釋倍數計算）稀釋至50ml，加酒石酸鉀鈉（1ml）和納氏試劑（1.5ml）靜置10min，420nm波長比色

❻ 葡萄糖分析中一般雜質檢查操作應注意什麼

• 納氏比色管的選擇與洗滌；

• 比色或比濁操作，一般均在納氏比色管中進行，因此在選用比色管時，必須注意使樣品與標准管的體積相等，玻璃色質一致，最好不帶任何顏色，管上的刻度均勻，如有差別，不得大於2mm。納氏比色管用後應立即沖洗，比色管洗滌時避免用毛刷或去污粉等洗刷，以免管壁劃出條痕影響比色或比濁；

• 平行操作原則；

• 進行比色、比濁檢查時，樣品溶液與對照溶液的實驗條件應盡可能一致，嚴格按照操作步驟平行操作，按規定順序加入試劑。比色、比濁前可利用手腕轉動360°的旋搖使比色管內試劑充分混勻。比色方法一般是將兩管同置於白色背景上，從側面觀察;比濁方法是將兩管同置於黑色或白色背景上，自上而下地觀察；

• 實驗中應准確選用量具，雜質檢查中允許的誤差為±10%，量筒的絕對誤差為1ml，刻度吸管的絕對誤差為0.01～0.1 ml，在實驗中，應根據樣品、標准液的取用量正確選用量器。例如，取標准液2ml應選擇刻度吸管或移液管吸取標准液。取樣品2g，允許的誤差為0.2g，可選用稱量精度為0.1g的普通天平；

• 進行鐵鹽檢查時，採用硝酸將Fe2+氧化為Fe3+，標准液應與樣品液同法操作。樣品液加硝酸煮沸時，應注意防止暴沸，必要時補充適量水。

❼ 氯化物檢查法的原理

利用氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀作用，生成氯化銀的渾濁液，與一定量的標准氯化鈉溶液在同樣條件下生成的氯化銀渾濁液比較，以測定葯品中含氯化物的限度。

注意事項：

(1)供試品溶液若不十分澄明，可用含硝酸酸化的蒸餾水洗滌至不含氯化物的濾紙濾過，便於比較觀察。

(2)供試品溶液若顯鹼性，加入硝酸銀後會生成棕色至黑色的Ag2O而影響比濁，若酸性太大，AgCl沉澱溶解度增大，所顯的渾濁度變小，也影響測定結果。

(3)為使反應完成，又能避免光線照射致氯化銀分解變色，干擾比濁，故在暗處放置5分鍾。

(4)選擇的納氏比色管的大小、管上刻度，玻璃質量等應一致。

(7)納氏比色管的使用方法擴展閱讀：

檢查方法

除另有規定外，取各葯品項下規定量的供試品，加水溶解使成25ml(溶液如顯鹼性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10ml；溶液如不澄清，應濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml，搖勻，即得供試溶液。

另取各葯品項下規定量的標准氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，搖勻，即得對照溶液。於供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0ml，用水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得。

以上檢查方法中使用的標准氯化鈉溶液每lml相當於10μg的Cl。在測定條件下，氯化物濃度以50ml中含50~80μg的Cl為宜，相當於標准氯化鈉溶液5~8ml。在此范圍內氯化物所顯渾濁梯度明顯，便於比較。

❽ 納氏試劑法測氨氮的詳細步驟

一、原理

碘化汞和碘化鉀的鹼性溶液與氨反應生成淡黃棕色膠態化合物，其色度與氨氮含量成正比，通常可在波長410—425nm范圍內測其吸光度，計算其含量。本法最低檢出濃度為0.025mg/L（光度法），測定上限為2mg/L。

二、儀器

1．500mL全玻璃蒸餾器 。

2．50mL具塞比色管。

3．分光光度計。

4．pH計。

三、試劑

配製試劑用水均應為無氨水。

1．無氨水：可用一般純水通過強酸性陽離子交換樹脂或加硫酸和高錳酸鉀後，重蒸餾得到。

2．1mol/L氫氧化鈉溶液。

3．吸收液：①硼酸溶液：稱取20g硼酸溶於水中，稀釋至1L。

②0.01mol/L硫酸溶液。

4．納氏試劑：稱取16g氫氧化鈉，溶於50mL水中，充分冷卻至室溫。

另稱取7g碘化鉀和碘化汞(HgI2)溶於水，然後將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中。用水稀釋至100mL，貯於聚乙烯瓶中，密塞保存。

5．酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)溶於100mL水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100mL。

6．銨標准貯備溶液：稱取3.819g經100℃乾燥過的氯化銨(NH4Cl)溶於水中，移入1000mL容量瓶中，稀釋至標線。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。

7．銨標准使用溶液：移取5.00mL銨標准貯備液於500mL容量瓶中，用水稀釋至標線。此溶液每毫升含0.010mg氨氮。

四、測定步驟

1．水樣預處理：無色澄清的水樣可直接測定；色度、渾濁度較高和含干擾物質較多的水樣，需經過蒸餾或混凝沉澱等預處理步驟。

2．標准曲線的繪制：吸取 0 、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0mL銨標准使用液於50mL比色管中，加水至標線，加1.0mL酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加1.5mL納氏試劑，混勻。放置10min後，在波長420nm處，用光程10mm比色皿，以水為參比，測定吸光度。

由測得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光度後，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（mg）對校正吸光度的標准曲線。

3．水樣的測定：分取適量的水樣（使氨氮含量不超過0.1mg），加入50mL比色管中，稀釋至標線，加1.0mL酒石酸鉀鈉溶液（經蒸餾預處理過的水樣，水樣及標准管中均不加此試劑），混勻，加1.5mL的納氏試劑，混勻，放置10min。

4．空白試驗：以無氨水代替水樣，作全程序空白測定。

五、計算

由水樣測得的吸光度減去空白實驗的吸光度後，從標准曲線上查得氨氮含量（mg）。

氨氮(N,mg/L)=m×1000/V

式中：m­——由校準曲線查得樣品管的氨氮含量（mg）；

V——水樣體積（mL）。

注意事項

1、納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對顯色反應的靈敏度有較大影響。靜置後生成的沉澱應除去。

2、濾紙中常含痕量銨鹽，使用時注意用無氨水洗滌。所用玻璃器皿應避免實驗室空氣中氨的沾污。

❾ 重金屬檢查法的方法內容

稱取硝酸鉛0.1599g，置1000ml量瓶中,加硝酸5ml與水50ml溶解後，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。
臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當於10μg的Pb)。本液僅供當日使用。
配製與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。
重金屬系指在實驗條件下能與硫代乙醯胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質。生產中遇到鉛的機會較多，且鉛又易在體內積蓄中毒，所以檢查時以鉛為代表。重金屬影響葯物的穩定性及安全性。 【中國葯典2010版第一增補本】附錄中規定了三種方法： 除另有規定外，取25ml納氏比色管三支，甲管中加標准鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml後，加水或該葯品項下規定的溶劑稀釋成25ml，乙管中加入按各品種項下規定的方法製成的供試液25ml，丙管中加入與乙管相同量的供試品，加配製供試品溶液的的溶劑適量使溶解，再加與甲管相同量的標准鉛溶液與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml後，用溶劑稀釋成25ml，若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液,使之與乙管、丙管一致；再在甲、乙、丙三管中分別加硫代乙醯胺試液各2ml，搖勻，放置2分鍾，同置白紙上，自上向下透視，當丙管中顯出的顏色不淺於甲管時，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深，如丙管中顯出的顏色淺於甲管，應取樣按第二法檢查。
如在甲管中滴加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液仍不能使顏色一致，應取樣按第二法檢查。
供試品中如含高鐵鹽影響重金屬檢查時，可在甲、乙、丙三管中分別加入相同量的維生素C0.5-1.0g，再照上述方法檢查。
配製供試品溶液時，如使用的鹽酸超過1ml，氨試液超過2ml，或加入其他試劑進行處理者，除另有規定外，甲管溶液應取同樣同量的試劑置瓷皿中蒸干後，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱使溶解後，移置納氏比色管中，加標准鉛溶液一定量，再用水或各種項下規定的溶劑稀釋成25ml。 1.1 重金屬是指在規定實驗條件下能與顯色劑作用顯色的金屬雜質。中國葯典2005年版二部附錄Ⅷ H採用硫代乙醯胺試液或硫化鈉試液作顯色劑，以鉛（Pb）的限量表示。
1.2 由於實驗條件不同，分為4種檢查方法：第一法適用於供試品不經有機破壞，在酸性溶液中進行顯色的重金屬限度檢查；第二法適用於供試品需灼燒破壞，取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，經處理後在酸性溶液中進行顯色的重金屬限度檢查；第三法用來檢查能溶於鹼而不溶於稀酸（或在稀酸中即生成沉澱）的葯品中的重金屬；第四法用微孔濾膜過濾，使重金屬硫化物沉澱富集成色斑，用於有色溶液或重金屬限度較低的品種。檢查時，應根據葯典品種項下規定的方法選用。
1.3 四種方法顯示的結果均為微量重金屬的硫化物微粒均勻混懸在溶液中所呈現的顏色；採用濾膜法可獲得「色斑」；如果重金屬離子濃度大，加入顯色劑後放置時間長，就會有硫化物聚集下沉。
1.4 重金屬硫化物生成的最佳pH值是3.0～3.5，選用醋酸鹽緩沖液（pH 3，5）2.0ml調節pH 較好，顯色劑硫代乙醯胺試液用量經實驗也以2.0ml為佳，顯色時間一般為2分鍾。以10～20ug的Pb與顯色劑所產生的顏色為最佳目視比色范圍。在規定實驗條件下，與硫代乙醯胺試液在弱酸條件下產生的硫化氫呈色的金屬離子有銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、砷、鋅、鈷與鎳等。
1.5 由於在葯品生產過程中遇到鉛的機會較多，且鉛易積蓄中毒，故以鉛作為重金屬的代表，用硝酸鉛配製標准鉛溶液。 2.1 納氏比色管 應選玻璃質量好、無色（尤其管底）、配對、刻度標線高度一致的納氏比色管。
2.2 濾器 見中國葯典2005年版二部附錄Ⅶ H重金屬檢查法第四法附圖，由具有螺紋絲扣並能密封的上、下兩部分以及墊圈、濾膜和輔助濾板組成。
2.2.1 濾器上蓋部分A的入口處應能與50ml注射器緊密聯接，濾器下部F的出口處能套上一合適橡皮管。A與F能通過螺紋絲扣密封。
2.2.2 墊圈應內徑光滑、大小相同，以使斑點邊緣圓整、清楚、大小一致。在濾器上加上橡皮墊圈，既可使濾膜與濾板緊密結合，又可避免在旋緊濾器接頭時扭曲或損壞濾膜。
2.2.3 濾膜的直徑為10mm，孔徑為3.0um，使用前在水中浸泡24小時以上，可使色斑均勻。
2.2.4 50ml注射器，應能與濾器上蓋入口處緊密聯接 3.1 標准鉛溶液 精密稱取在105℃乾燥至恆重的硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解後，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當於10ug的Pb ）。
3.2 硫代乙醯胺試液、硫化鈉試液、醋酸鹽緩沖液（pH3.5）與抗壞血酸等均按葯典附錄XV的規定。
3.3 稀焦糖溶液 取蔗糖或葡萄糖約5g，置磁坩堝中，在玻璃棒不斷攪拌下，加熱至呈棕色糊狀，放冷，用水溶解成約25ml，濾過，貯於滴瓶中備用。臨用時，根據供試液色澤深淺，取適當量調節使用。 4.1 第一法
4.1.1 取25ml納氏比色管兩支，編號為甲、乙。
4.1.2 甲管中加標准鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，加水或各品種項下規定的溶劑稀釋成25ml。
4.1.3 乙管中加入按該品種項下規定的方法製成的供試液25ml。
4.1.4 如供試液帶顏色，可在甲管中滴加稀焦糖溶液少量或其它無干擾的有色溶液，使其色澤與乙管一致。
4.1.5 在甲、乙兩管中分別加硫代乙醯胺試液各2.0ml，搖勻，放置2分鍾，同置白色襯板上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。
4.1.6 如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使顏色一致時，可取該品種項下規定的二倍量的供試品和試液，加水或該品種項下規定的溶劑使成30ml，將溶液分成甲乙二等份，乙管中加水或該品種項下規定的溶劑稀釋成25ml；甲管中加入硫代乙醯胺試液2.0ml，搖勻，放置2分鍾，經濾膜（孔徑3um）濾過，然後甲管中加入標准鉛溶液一定量，加水或該品種項下規定的溶劑使成25ml，再在乙管中加入硫代乙醯胺試液2.0ml，甲管中加水2.0ml，照上述方法比較，即得。
4.1.7 供試品中如含高鐵鹽而影響重金屬檢查時，可取該品種項下規定方法製成的供試液，加抗壞血酸0.5～1.0g，並在對照溶液中加入相同量的抗壞血酸，再照上述方法檢查。
4.1.8 配製供試品溶液時，如使用的鹽酸超過1.0ml（或與鹽酸1.0ml相當的稀鹽酸），氨試液超過2.0ml，或加入其他試劑進行處理者，除另有規定外，對照液中應取同樣同量的試劑置瓷皿中蒸干後，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2.0ml與水15ml溶解後移置甲管中，加標准鉛溶液一定量，再加水稀釋成25ml。
4.2 第二法
4.2.1 除另有規定外，取該品種在500～600℃灼燒的熾灼殘渣項下遺留的殘渣，加硝酸0.5ml蒸干，至氧化氮蒸氣除盡後，加鹽酸2.0ml，置水浴上蒸干後加水25ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2.0ml，微熱溶解後，移置乙管中，加水稀釋成25ml。
4.2.2 如不取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，則可取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡後，加硝酸0.5 ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡後，放冷，在500～600℃熾灼使完全灰化，再按 4.2.1自「…放冷，加鹽酸2.0ml……」起，依法操作至「加水稀釋成25ml」。
4.2.3 取配製供試溶液的試劑，置瓷皿中蒸干後，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2.0ml與水15ml，微熱溶解後，移置甲管中，加標准鉛溶液一定量，加水稀釋成25ml。
4.2.4 按4.1.5方法檢查。
4.3 第三法
4.3.1 取25ml納氏比色管兩支，編號為甲、乙。
4.3.2 除另有規定外，取供試品適量，加水20ml與氫氧化鈉試液5ml溶解後，置乙比色管中。
4.3.3 取一定量的標准鉛溶液，與4.3.2同樣處理，置甲管中。
4.3.4 於甲、乙兩管中各加硫化鈉試液5滴，搖勻。
4.3.5 甲、乙兩管同置白色襯板上，自上向下透視，乙管中所顯的顏色與甲管比較，不得更深。
4.4 第四法
4.4.1 標准鉛斑的制備 精密量取標准鉛溶液一定量，置小燒杯中，加水或各品種項下規定的溶劑稀釋成10ml，加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2.0ml與硫代乙醯胺試液1.0ml，搖勻，放置10分鍾，用50ml注射器轉移至過濾器中進行壓濾（濾速約為每分鍾1ml），濾畢，取下濾膜，放在濾紙上千燥，即得。
4.4.2 檢查法 照各品種項下規定方法製成的供試液10ml，照4.4.1標准鉛斑的制備，自「加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml起，依法操作，將生成的色斑與標准鉛斑比較，不得更深。
4.4.3 若供試溶液有顏色或渾濁，應用濾膜進行預濾，如濾膜上有污染，應換濾
膜再濾，直至濾膜不再染色；然後取濾液10ml，照4.4.1標准鉛斑的制備，自「加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2.0ml」起，依法操作。所得供試液的鉛斑與標准鉛斑比較，不得更深。 5.1 標准鉛溶液應在臨用前精密量取標准鉛貯備液新鮮稀釋配製，以防止硝酸鉛水解而造成誤差，配製與貯存標准鉛溶液使用的玻璃容器，均不得含有鉛。
5.2 硫代乙醯胺試液與重金屬反應的最佳pH值是3.5，故配製醋酸鹽緩沖液（pH3.5）時，要用pH計調節，硫代乙醯胺試液加入量以2.0ml時呈色最深；第四法中的檢測范圍為2～5ug的Pb，且因體積小，所以硫代乙醯胺試液的用量為 。硫代乙醯胺試液顯色劑的最佳顯色時間為2分鍾，除第四法由於檢測限量低，且為了方便過濾，顯色時間為10分鍾外，第一、二法均為放置2分鍾。
5.3 為了便於目視比較，第一、二和三法中的標准鉛溶液用量以2.0ml（相當於20ug的Pb）為宜，小於1.0ml或大於3.0ml，呈色太淺或太深，均不利於目視比較。
5.4 如需將熾灼殘渣項下遺留的殘渣作重金屬檢查時，則熾灼溫度必須控制在500～600℃。實驗證明，熾灼溫度在700℃以上時，多數重金屬鹽都有不同程度的損失；以鉛為例，在700℃經6小時熾灼，損失達68﹪。某些供試品（如安乃近，諾氟沙星等）在熾灼時能腐蝕瓷坩堝而帶入較多的重金屬，應改用石英坩堝或鉑坩堝操作。
5.5 熾灼殘渣加硝酸處理，必須蒸干，至氧化氮蒸氣除盡，否則會使硫代乙醯胺水解生成的硫化氫，因氧化析出乳硫，影響檢查。蒸干後殘渣加鹽酸處理，使重金屬轉化為氯化物，在水浴上蒸干以趕除多餘的鹽酸，加水溶解，加入酚酞指示液1滴，再逐滴加入氨試液，邊加邊攪拌，直到溶液剛顯淺紅色為止，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）使供試液的pH調節至3.5。
5.6供試品中如含有高鐵鹽，在弱酸性溶液中會使硫代乙醯胺水解生成的硫化氫進一步氧化析出乳硫，影響檢查，可加入抗壞血酸將高鐵離子還原為亞鐵離子而消除干擾。
5.7如供試品自身為重金屬的鹽，在檢查這類葯品中的其他重金屬時，必須先將供試品本身的金屬離子除去，再進行檢查。如在枸櫞酸鐵銨中檢查鉛鹽時，利用 在一定濃度的鹽酸中形成 ，用乙醚提取除去，再調節供試液至鹼性，用氰化鉀試液掩蔽微量的鐵後進行檢查；右旋醣酐鐵注射液中重金屬檢查，也是在一定濃度的鹽酸中，用醋酸異丁酯提取除去鐵鹽後進行檢查。
5.8葯品本身生成的不溶性硫化物，影響重金屬檢查，可加入掩蔽劑以避免干擾。如硫酸鋅和葡萄糖酸銻鈉中鉛鹽檢查，是在鹼性溶液中加入氰化鉀試液，或在中性溶液中加入酒石酸，使鋅離子或銻離子生成穩定的絡合物，再依法檢查。
5.9為了消除鹽酸或其他試劑可能夾雜重金屬，故在配製供試品溶液時，如使用鹽酸超過1.0ml（或與鹽酸1.0ml相當的稀鹽酸）或使用氨試液超過2.0ml，以及用硫酸或硝酸進行有機破壞，或加入其他試劑進行處理者，除另有規定外，對照溶液應取同樣量試液蒸干後，依法檢查。
5.10當採用第四法時，將注射器套於濾器上後，讓注射器內管自然下降，產生的壓力比較均勻，而且對於大多數樣品溶液過濾速度達到每分鍾左右；對於較粘稠的樣品溶液，可施加一均勻壓力使達到該速度，以保證色斑上色調的均勻性。濾過時如濾器中存在氣泡則會影響色斑質量，故在裝置輔助濾板（尼龍墊網）、濾膜和墊圈時應以水排除氣泡。濾器上端與注射器連接處的尺寸大小應以兩者能嚴密嵌合為宜，以免濾過時溶液溢漏；必要時可改用乳膠管連接。 6.1記錄 必須記錄所採用的方法，供試品取樣量，標准鉛溶液取用量，操作過程中使用的特殊試劑，試液名稱和用量或對檢查結果有影響的試劑用量，實驗過程中出現的現象及實驗結果等。
6.2 計算
6.2.1 標准鉛溶濃度計算
例如葡萄糖注射液中重金屬檢查，「取本品適量（約相當於葡萄糖3g），必要時，蒸發至約 ，放冷，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水適量使成25ml，依法檢查，按葡萄糖含量計算，含重金屬不得過百萬分之五」，計算標准鉛溶液取用量。 7.1 第一、二、三法，甲管與乙管比較，乙管所呈顏色淺於甲管，判為符合規定。
7.2 第四法，供試液所得斑點淺於標准鉛癱的顏色，判為符合規定。