① 小鼠的基本實驗操作
一、實驗目的: 通過實際操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、標記、給葯(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾靜脈注射)、取血(眶後靜脈叢,摘眼球)、脊椎脫臼法處死、大體解剖。
二、實驗動物: 昆明小鼠2隻(1雌1雄)
三、實驗步驟
1、抓取和固定,標記
2、去毛
3、給葯:消化道、腹腔往射、尾靜脈注射
4、取血:眼眶後靜脈叢、尾靜脈、眼球摘除法、斷頭法
5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉
6、處死:脊椎脫臼法
7、解剖:
雄性:睾丸、附睾、輸精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,膠質狀,透明)
雌性:雙角子宮、卵巢
腎上腺、膽囊、甲狀腺、胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟、甲狀腺
四、實驗結果
1、抓取和固定標記:
抓取:抓小鼠的尾根部
固定:抓住小鼠的尾根部,讓小鼠在粗糙平面上爬行,後拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠兩耳及其間的頸部皮膚,小指和無名指將尾巴固定在手掌面。
2、灌胃法:左手抓取小鼠固定後,右手持特製灌胃針,沿一側口角進針,緊貼咽後壁,頭後仰以便伸直消化道,進針2/3後灌生理鹽水0.5ml
3、注射給葯:
腹腔注射:
從下腹部的兩側進針,進針時針與腹部成45°。進針後稍微晃動針,如無粘滯感則可注射葯物。
尾靜脈注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指和拇指將尾拉直,食指托住尾部在尾動脈位置進針注射0.5ml生理鹽水。注射完畢拔出針頭,用無菌棉球壓迫止血。
4、采血
從眼角內側0.5cm處進針
眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持彎頭鑷在眼球根部將眼球摘除,頭朝下,眼眶內血迅速流出。
5、麻醉:
0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的葯量給葯,2分鍾麻醉成功
6、處死:
脊椎脫臼法:按住頭部,將尾根部向後上方以短促的力量拉即可致死
7、解剖:
雄性:尋找到睾丸、附睾、輸精管、鼠蹊腺
雌性:雙角子宮、卵巢3.7.2腎上腺:米粒大小
胰腺:位於胃下方,類似於脂肪組織,渾濁狀3.7.4, 膽囊:芝麻大小,淺綠色,半透明,甲狀腺:緊貼環狀軟骨,另可解剖出胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟。
五、實驗討論
1、小鼠抓取的感受:
小鼠性情較溫順,一般不會咬人,比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置於左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠完全固定。如要進行手術或心臟采血應先行麻醉再操作,如進行解剖實驗則必須先行無痛處死後再進行。
2、小鼠尾靜脈注射感受:
首先,注射前尾巴用稍熱的水浸泡幾分鍾,有利於注射;其次,先遠後盡,不要一開始就從尾根部,那樣失敗了不好辦;再次,進血管後注意保持穩定,針尖很容易刺穿血管的。尾靜脈就在尾巴的正左右兩邊,先用酒精用力擦,可以去掉部分角質,然後按住近心端讓充血,就很容易看到了。進針大概1~2厘米是最合適的。
尾靜脈注射時,可用45~50度的溫水浸潤半分鍾或用酒精擦拭,可使血管擴張,同時也可軟化表皮角質。以左手拇指和食指夾住鼠尾,使靜脈充盈,中指幫助無名指和小指捏住鼠尾末梢,右手持注射器(連5號細針頭),針頭與靜脈夾角一般小於30度,從距尾尖2 - 3厘米處進針,此處皮薄易進入,先抽回血,見到血後再緩慢注入少量葯液,如無阻力,表示針頭已進入靜脈,可繼續往入。一般推注速度為0.05 - 0.10m秒,一次注入量為0.05 - 0.25ml/10g體重。如反復注入,應盡可能從尾末端開始,以後向尾根部方向移動注射。
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