❶ 如何使用ph梯度萃取法提取分離大黃中蒽醌類化合物
實驗原理：大黃為瀉下、清熱解毒、活血化瘀中葯，有「推陳致新」的作用。品種繁多，質優者為蓼科植物掌葉大黃（Rheum Palmatum L.）。葯用大黃（Rheum officinale Baill）和唐古特大黃（R·tang uticum Maxim ex Reg）的根。
大黃中具有瀉下作用的成分是幾種蒽醌衍生物，其中甙是主要的成分，因其瀉下作用常強於相應的甙元，甙元主要包括大黃酚、大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素和大黃素甲醚共五種蒽醌甙元。大黃的致瀉效力與其中的結合性大黃酸含量成正比。游離的蒽醌甙元幾無致瀉作用。具有較強的致瀉作用的蒽醌甙有以下幾種：大黃酚-1-葡萄糖甙、大黃素-6-葡萄糖甙、蘆薈大黃素-8-葡萄糖甙、大黃酸-8-葡萄糖甙、大黃素甲醚葡萄糖甙、還含有蒽醌衍生物的雙糖甙，如：大黃素雙葡萄糖甙、蘆薈大黃素雙葡萄糖甙、大黃酚雙葡萄糖甙以及番瀉甙A和B，番瀉甙C，番瀉甙的瀉下作用，較蒽醌甙為強，但含量遠較後者為少。近年來，日本人西岡五夫從大黃中分離出四種新的大黃瀉下成分，稱大黃酸甙A、B、C、D。除此外還含有大黃鞣酸及相關物質。如：沒食子酸（一部分是游離的，一部分是結合成沒食子醯葡萄糖甙），兒茶精，此類鞣質及相關物質有止瀉作用與蒽醌衍生物的甙類之瀉下作用恰恰相反。
1、大黃酚（chrysopanol）
金黃色片狀結晶。Mp196℃（乙醇或苯），能升華，可溶於丙酮、醋酸、氯仿、甲醇、乙醇、熱苯，微溶於石油醚、乙醚，不溶於水，NaHCO3和Na2CO3水溶液，可溶於NaOH溶液。
2、大黃素（Emodin）
橙黃色針狀結晶，mp256～257℃（乙醇或冰醋酸）能升華，其溶解度：乙醚0.14%，苯0.041%, 氯仿0.0718%，幾不溶於水，易溶於乙醇，可溶於稀氨水，Na2CO3水溶液。大黃素具有抑制小鼠黑色瘤和小鼠乳腺瘤的作用。
3、蘆薈大黃素（Aloeemodin）
黃色針狀結晶，mp223～224℃（甲苯）能升華，可溶於乙醚、苯、熱乙醇、稀氨水、Na2CO3和NaOH水溶液。
4、大黃酸（Rhein）
黃色針狀結晶，mp321～322℃（升華）。不溶於水，能溶於吡啶、碳酸氫鈉水溶液，微溶於乙醇、苯、氯仿、乙醚、石油醚。大黃酸對艾氏腹水癌有抑製作用。
5、大黃素甲醚（Physcion）
紅色針晶mp206℃（苯）能升華。溶解性能似大黃酚。
6、羥基蒽醌甙類
①大黃素甲醚葡萄糖甙（Physcion monoglucoside）
黃色針晶mp235℃
②蘆薈大黃素葡萄糖甙（Aloe-emodin monoglucoside）
mp239℃
③大黃素葡萄糖甙（Emodin monoglucoside）
mp190～191℃淺黃色針晶
④大黃酸葡萄糖甙（Rhein monoglucoside）
mp266～270℃
⑤大黃酚葡萄糖甙（Chrysophanol monolucoside）
mp245～246℃
⑥大黃素-l-O-β-D-葡萄糖甙（1-0-β-D-gluranosyl emodin）
mp239～241℃
⑦蘆薈大黃素-W-O-β-D-葡萄糖甙（W-O-β-D- gluranosyl aloe-emodin）
mp187～189℃
⑧大黃酸甙A、B、C、D
大黃酸甙A：R=OH 大黃酸甙B：R=OH
大黃酸甙C：R=H 大黃酸甙D：R=H
本實驗根據大黃中的蒽醌苷類在酸性條件下加熱，可水解成游離羥基蒽醌和糖，而游離羥基蒽醌不溶於水，可溶於乙醚、氯仿等親脂性有機溶劑的性質，從水解物中將游離羥基蒽醌提出，再利用游離羥基蒽醌的酸性不同，採用 pH梯度萃取法將其分離。也可利用游離蒽醌的極性不同，採用硅膠柱色譜方法進行分離。
儀器、材料及試劑
儀器：500mL圓底燒瓶、燒杯、滴管、橡皮管、球形冷凝管（750px）層析缸、標本瓶、索氏提取器一套、250mL分液漏斗、布氏漏斗、抽濾瓶、普通濾紙、薄層板、噴霧器、廣泛PH試紙。
材料及試劑： 大黃10～20g、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、硫酸、氨水、鹽酸、乙醚、石油醚、醋酸乙酯。
實驗步驟
1.游離蒽醌的提取
稱取大黃粗粉50g，加20%H2SO4水溶液150mL，在水浴上加熱3-4小時，放冷，抽濾，濾餅水洗至近中性，抽濾，於70℃乾燥後，研碎，置索氏提取器中，加入乙醚150mL迴流提取3-4小時，得到乙醚提取液。
乙醚提取液經薄層層析檢查有大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃素甲醚和大黃酚。薄層板為硅膠—CNC粘合板，展開劑為石油醚（60～90℃）：乙酸乙酯（7：3）近水平或直立展開，在可見光下，可看到四個斑點。其中Rf=0.9的黃色斑點為大黃酚和大黃素甲醚的混合物,在此條件下,不能分開,其餘3個斑點依Rf值（由大到小）的順序是大黃素（橙色斑點）、蘆薈大黃素（黃色斑點）、大黃酸（黃色斑點）。
2.PH梯度萃取分離
（1）將乙醚提取液加入250mL分液漏斗中，以40mL 2.5%NaHCO3水溶液萃取三次，乙醚層經薄層層析檢查（薄層層析條件司上），提示乙醚提取液提出大黃酸後，合並三次NaHCO3萃取液，用濃鹽酸酸化，可得大黃酸沉澱。（注意：加酸時應緩慢加入，以防酸液溢出）
（2）經2.5% NaHCO3水溶液萃取後的乙醚層，繼以2.5% NaHCO3水溶液萃取三次，每次40mL，用薄層層析法檢查乙醚層，結果說明已提盡大黃素後，合並三次Na2CO3萃取液，並酸化，得大黃素沉澱。（酸化時注意操作同前）經2.5% Na2CO3水溶液提取後的乙醚液，再以2.5% Na2CO3水溶液提取約四次，每次30mL，經薄層檢查，指示提盡蘆薈大黃素，合並四次萃取液，酸化得蘆薈大黃素沉澱。（酸化時操作注意同前）
（3）經2.5% Na2CO3水溶液萃取過後乙醚層以2.5% NaOH水溶液萃取至鹼水層無色為止（約四次），每次50mL，合並NaOH萃取液，酸化得沉澱。過濾、水洗至洗出液呈中性。低溫乾燥後溶於小體積石油醚中，作為柱層析的樣品溶液，用簿層層性析檢查樣品溶液有一個黃色斑點（為大黃酚和大黃素甲醚混合物的斑點），若改用下述紙層析條件可將兩者分開。
紙層析條件：新華濾紙7×20（cm）
展開劑：水飽和的石油醚（BP60～90℃）
展開方式：上行法
顯色劑：4%NaOH乙醇溶液
3.用纖維素粉柱層析法分離大黃酚和大黃素甲醚。
（1）纖維素粉的制備：
將新華濾紙（或其邊角紙屑）剪成小片，稱取15g，加入稀硝酸（每100mL水中加65～68%的硝酸5mL）300mL，加熱水解（約2小時），抽濾（G3號耐酸漏斗），濾餅用蒸餾水洗至中性，再加少量乙醇、乙醚依次各洗滌一次，待揮發掉殘存的乙醚後，低溫烘乾，粉碎，過120目篩備用。
（2）裝柱：將纖維素粉約8g，用水泡和石油醚（BP60～90℃）按濕法裝柱。
（3）樣品上柱：將樣品溶液用移液管小心加入層析柱柱床頂端。
（4）洗脫：用水泡和石油醚（BP60～90℃）洗脫，分段收集，每份10mL，分別濃縮，經紙層析檢查（紙層析條件同上），相同者合並，分別收集大黃酚和大黃素甲醚。大黃酚用醋酸乙酯重結晶後測熔點。
4.大黃酚的鑒定
（1）在薄層板上用點滴反應檢查大黃酚對NaOH，MgAc2試液的反應。
（2）測定大黃酚的紫外光譜。
（3）用溴化鉀壓片法，測定大黃酚的紅外光譜。
❷ 3.在對游離離羥基蒽醌進行檢識時用到了哪些方法
用 氯仿從水解液中將游離羥基蒽醌提取出來羥基蒽醌提取出來， 再利用 各游離羥基蒽醌的酸性不同， 採用 pH梯度萃取法將其分離。
❸ 游離蒽醌和其苷的區別可採用的方法有
pH梯度萃取法的原理是由於溶劑系統pH變化改變了它們的存在狀態（游離型或解離型），從而改變了它們在溶劑系統中的分配系數。根據蒽醌的α與β位羥基酸性差異及羧基的有無，使用不同鹼液（5%NaHCO3%Na2O31%NaOH5%NaOH）依次從有機溶劑中萃取蒽醌類成分，再分別酸化鹼液，蒽醌類成分即可析出沉澱。希望對你有幫助
❹ 分離游離羥基蒽醌混合物的最佳方案是
D
蒽醌呈酸性
溶遇乙醚後，用鹼梯度萃取
酸性強的先和鹼反應成鹽，溶解於水中，用分液漏斗分液，得到酸性較強的
繼續重復操作就分離開了
❺ 分離游離蒽醌與蒽醌苷的最佳方法是
將含有蒽醌類成分的乙醇提取液濃縮後，用與水不想混溶的有機溶劑（如二氯甲烷、氯仿、乙醚等）反復萃取，游離蒽醌則轉溶於有機溶劑中，蒽醌苷仍留於水溶液中。也可以將上述濃縮液減壓蒸干，置於迴流提取器中，以氯仿等有機溶劑迴流提取游離蒽醌類，蒽醌苷則留存於殘渣中。
❻ 用ph梯度萃取法分離游離蒽醌類化合物的實訓過程中應重點注意哪些問題簡略畫流程圖
2. 掌握用 pH 梯度萃取法分離不同酸性的羥基蒽醌類化合物。 3. 掌握蒽醌類化合物的主要檢識方法。 4. 熟悉蒽醌