固定化酵母的常用方法

❶ 固定化酵母細胞發酵為什麼要無氧

（1）微生物實驗室培養的關鍵就在於防止雜菌污染，故整個過程中要嚴格進行無菌操作．
（2）酵母菌無氧呼吸產生酒精，製作葡萄酒時，酵母菌來自於附著在葡萄皮上的野生型酵母菌．
（3）酵母菌、醋酸菌、青黴菌、毛霉這四種微生物中，只有酵母菌是兼性厭氧性生物（既能進行有氧呼吸也能進行無氧呼吸），故要分離到較純的酵母菌，可直接提供無氧環境進行分離．
（4）制備固定化酵母細胞，常用的包埋材料是海藻酸鈉，使用方法如圖③．
（5）凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質，相對分子質量大的由於不能進入凝膠通道而移動速度快，最先分離出來，使用電泳法分酶，影響酶電泳速度的因素有帶電多少、帶電性質、電壓的大小、分子的大小和形狀等．
故答案為：（1）無菌
（2）附著在葡萄皮上的野生型酵母菌
（3）無氧
（4）海藻酸鈉
③
（5）相對分子質量的大小
大
帶電多少、帶電性質、電壓的大小、分子的大小和形狀等

❷ 固定化酵母在燃料乙醇發酵中的應用有哪些

固定化細胞發酵技術有許多突出的優點:由於它大大增加了細胞濃度,增強了菌體對外部條件如溫度和酸鹼度的抵抗能力;縮短了發酵周期,提高反應器單位體積的生物轉化速率;而且由於細胞被固定,減少了細胞流失,細胞可長時間反復使用,並有利於產物分離等。這為發酵的連續化和規模化提供了方便。
目前固定化細胞技術己經在食品工業、環境保護、能源開發等方面得到廣泛的應用 。
酒精酵母細胞固定化大部分採用海藻酸鈉、聚乙烯醇( PVA) 等包埋法,但存在成本較高、固定化過程較繁瑣且對細胞有損傷,載體軟化現象等缺點。
探索新的固定化載體和固定化方式,營造更適合細胞生長和代謝的環境是固定化技術發展的方向。各種天然材料,如水果塊、麩皮、去木質素的纖維素殘渣,都曾作為固定化載體被成功應用於釀酒和乳清發酵等食品相關工業。
利用甘蔗莖塊中天然的細胞纖維間隙和纖維素自身對酵母的吸附作用,有利於酵母吸附並在其
內部生長的特點，制備固定化酵母，利用其發酵甘蔗汁生產酒精。

❸ 固定化酵母菌的操作過程

大概的回憶，沒有數據
海藻酸鈉固定酵母細胞
一、准備
1.對於要用到的酵母前一天活化。（！）
2.用到的針筒、燒杯、玻棒等，事先滅菌。
二、操作
1.配海藻酸鈉，稱量，溶解，小火持續（！），或大火間斷（！）。
2.配氯化鈣溶液。
3.冷卻至略溫（！）（摸摸杯壁可知），加入活化的酵母液，攪拌。
4.用去掉針頭的針筒吸。稀的海藻酸鈉要加針頭注射，濃的不用。
5.在離液面十來公分注射。
6.靜置一段時間。（！）
三、結果
1.把海藻酸鈉小球取出，蒸餾水反復沖洗。（！）
2.把小球放在葡萄糖溶液中，觀察結果。
以下是網上的資料
《酵母細胞的固定化》教學設計
XX第一中學
XXX
20XX年X月XX日
XX:XX
一、實驗原理
固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或者細胞固定在一定空間的技術，包括包埋法，化學結合法（將酶分子或細胞相互結合，或將其結合到載體上）和物理吸附法固定化，細胞多採用包埋法固定化。因為細胞個大，而酶分子很小，個大的細胞難以被吸附或結合，而個小的酶容易從包埋材料中露出。
常用的包埋載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維和聚丙烯醯胺等。本實驗選用海藻酸鈉作為載體包埋酵母菌細胞。
二、實驗目的
1.了解細胞固定化的原理；
2.掌握酵母細胞固定化實驗操作。
三、儀器與用具
水浴鍋，20ml注射器，燒杯，三角瓶，玻璃棒，酵母懸液，海藻酸鈉，無水氯化鈣，葡萄糖
三、試劑配製
CaCl2溶液：稱取0.83g無水氯化鈣加150ml水溶解待用；
海藻酸鈉溶液：稱取0.7g海藻酸鈉加入10ml水加熱溶液成糊狀；
10%葡萄糖溶液：稱取15g葡萄糖溶液溶於150ml水中。
四、實驗方法與步驟
1.海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合：將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入已經活化的酵母細胞，用玻璃棒充分攪拌混合均勻。
2.固定化酵母細胞：用20ml注射器吸取海藻酸鈉與酵母細胞混合液，在恆定的高度（建議距液面12~15cm處，過低凝膠珠形狀不規則，過高液體容易飛濺），緩慢將混合液滴加到CaCl2中，觀察液滴在CaCl2溶液中形成凝膠珠的情形。將凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min
左右使其充分固定。
3.固定化酵母細胞發酵：用5ml移液器吸取蒸餾水沖洗固定好的凝膠珠2~3次，然後加入裝有150ml10%葡萄糖溶液的三角瓶中，置於25℃發酵24h，觀察結果。
實驗開始時，凝膠球是沉在燒杯底部，24h後，凝膠球浮在溶液懸浮在上層，而且可以觀察到凝膠球並不斷產生氣泡，說明固定化的酵母細胞正在利用溶液中的葡萄糖產生酒精和二氧化碳，結果凝膠球內包含的二氧化碳氣泡使凝膠球懸浮於溶液上層。

❹ 制備固定化酵母細胞的5大步驟

1、活化酵母細胞；2、通入氨氣、3、配製海藻酸鈉溶液、4、混合酵母培養液和海藻酸鈉溶液；5、滴加氯化鈣

❺ 酵母細胞的固定採用方法

酵母細胞的固定採用方法一般是包埋法。是將酶或細胞包埋在能固化的載體中。如將酶包裹在聚丙烯醯胺凝膠等高分子凝膠中，或包裹在硝酸纖維素等半透性高分子膜中，前者包埋成格子型，後者包埋成微膠囊型。包埋法常用於微生物、動物和植物細胞的固定化。凝膠包埋法是應用最廣泛的細胞固定化方法。

包埋法的原理是將微生物細胞截流在水不溶性的凝膠聚合物孔隙的網路空間中。通過聚合作用或者離子網路形成，或通過沉澱作用，或改變溶劑、溫度、pH值使細胞截流。凝膠聚合物的網路可以阻止細胞的泄漏，同時能讓基質滲入和產物擴散出來。包埋法操作簡單，對細胞活性影響較小，製作的固定化細胞球的強度高，目前工業應用上以凝膠包埋法固定細胞最為廣泛。

❻ 固定化酵母細胞中氯化鈣的配製可以用無菌水嗎

可以，無菌水和蒸餾水都可以用。
無菌水則通常是指通過物理方法對含有菌團的水進行處理而得到不含細菌的水。如蒸汽法、UHT熱法、紫外線殺菌、臭氧方法和物理過濾法，將水中微生物殺死並過濾而得到的水，水中的無機鹽等一般來說不會減少。無菌水是用冷水熱開後冷卻經過高溫殺菌製作的，適合密封無菌保存。蒸餾水是熱水燒開後的蒸氣形成的水滴形式（也基本無菌，比無菌水容易製作且好取制，量少）。制備方法：其一是採用UHT熱法制備，這種方法常用於無菌灌裝的包材沖洗；其二是採用化學法制備，如添加二氧化氯、次氯酸等，這種方法常用於熱灌裝的包材沖洗；其三是採用臭氧方法制備，這種方法用於在瓶裝水的沖洗。

❼ 海藻酸鈉固定酵母細胞是什麼方法

包埋法
防止海藻酸鈉焦糊
冷卻