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目的基因的獲取最常用的方法是

發布時間:2022-11-28 19:25:56

㈠ 目的基因的獲取方法

目的基因的獲取方法:

1、從基因文庫中獲取目的基因。

2、cDNA文庫。

3、反轉錄法。

4、人工合成法。

目的基因,也稱靶標基因,是指在實驗中研究或操縱的特定基因。在基因克隆過程中目的基因就是要分離、純化、克隆並轉化到生物體的那個可以帶來預期表型性狀如抗蟲或耐除草劑的基因。

目的基因獲得方法是取得含有所需生物學功能或編碼所需產物結構基因的DNA片段的方法。1969年貝克威思等從大腸桿菌中分離出了乳糖操縱子DNA,以後有不少科學家用生物學方法、物理化學方法分離出許多純化的基因。但總的來看為數不多。

㈡ 獲取目的基因的常用方法是哪種

1.從基因文庫中獲取目的基因:將含有某種生物的許多DNA片段,導入受體菌
的群體中儲存,各個受體菌分別含有這種生物不同的基因,稱為基因文庫。
當需要某一片段時,根據目的基因的有關信息,如根據基因的核苷酸序列、基因的功能、基因
在染色體上的位置、基因的轉錄產物mRNA,以及基因的表達產物蛋白質等特性來獲取目的基
因。
2.化學合成法。已知目的基因的核苷酸序列,可用DNA合成儀直接合成。
3.用PCR技術擴增技術提取。已知目的基因引物的序列,將整個DNA放入合成儀,因為只有當
引物與模板結合後DNA熱聚合酶才能行使聚合功能,所以只有引物中間的目的基因被大量擴增,
即被提取出來。

㈢ 獲得目的基因有幾種主要方法

獲得目的基因常用的方法有PCR法、化學合成法、cDNA法及建立基因文庫的方法來篩選

直接獲取
1.從基因文庫中獲取 這個沒什麼就是現成的基因儲存在受體菌上你用的時候提取出來就好了(基因組文庫法 就是原教材中的用限制性內切酶直接獲取。利用λ噬菌體載體構建基因組文庫的一般操作程序如下:① 選用特定限制性內切酶, DNA進行部分酶解,得到DNA限制性片段② 選用適當的限制性內切酶酶解λ噬菌體載體DNA。③ 經適當處理,將基因組DNA限制性片段與λ噬菌體載體進行體外重組。④ 利用體外包裝系統將重組體包裝成完整的顆粒。⑤ 以重組噬菌體顆粒侵染大腸桿菌,形成大量噬菌斑,從而形成含有整個DNA的重組DNA群體,即文庫。)經典解釋
2.cDNA文庫法(即原教材中提到的逆轉錄法)。cDNA文庫,是指匯集以某生物成熟mRNA為模板逆轉錄而成的cDNA序列的重組DNA群體。雖然可用基因組文庫法來獲取真核生物的目的基因,但是由於高等真核生物基因組DNA文庫比其cDNA文庫大得多,相關工作量同樣大得多。更為重要的是,在真核生物基因組中合有大量的間隔序列或內含子,但在大腸桿菌等原核生物中沒有類似序列的存在,所以大腸桿菌不能從真核生物基因的初級轉錄本中去除間隔序列,即不能表達真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在間隔序列(已在拼接過程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA為模板,逆轉錄而成的cDNA可被大腸桿菌表達。因此,在基因工程中,cDNA文庫法是從真核生物細胞中分離目的基因的常用方法。
3.直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」。這種方法有如用獵槍發射的散彈打鳥,無論哪一顆彈粒擊中目標,都能把鳥打下來。鳥槍法的具體做法是:用限制酶(即限制性內切酶)將供體細胞中的DNA切成許多片段,將這些片段分別載入運載體,然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞,讓供體細胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分別在受體細胞中大量復制(在遺傳學中叫做擴增),從中找出含有目的基因的細胞,再用一定的方法吧帶有目的基因的DNA片段分離出來。如許多抗蟲,抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。

用「鳥槍法」獲取目的基因的優點是操作簡便,缺點是工作量大,具有一定的盲目性。

人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通過DNA自動合成儀,通過固相亞磷酸醯胺法合成,具體過程可以網上查詢,反正是可以按照已知序列將核苷酸一個一個連接上去成為核苷酸序列,一般適於分子較小而不易獲得的基因。對於大的基因一般是先用化學合成法合成引物,再利用引物獲得目的基因。
2.聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段於數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研 究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑

㈣ 目的基因的獲取方法

1、當目的基因的序列已知時:用化學方法合成目的基因,或用聚合酶鏈式反應(PCR)擴增目的基因。
將含有某種生物的許多DNA片段,導入受體菌的群體中儲存。各個受體菌分別含有這種生物不同的基因,稱為基因文庫。當需要某一片段時,根據目的基因的有關信息來獲取目的基因。如根據基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉錄產物mRNA,以及基因的表達產物蛋白質等特性來獲取目的基因。
2、當目的基因序列未知時:建立一個包括目的基因在內的基因文庫,從基因文庫中提取目的基因。
3、用PCR技術擴增技術提取。已知目的基因引物的序列,將整個DNA放入合成儀。只有引物中間的目的基因被大量擴增,即被提取出來。

㈤ 獲取目的基因的方法到底有幾種,PCR技術也是獲取目的基因的途徑嗎

獲取目的基因的方法主要有兩種:一是從供體細胞的DNA中直接分離基因,最常用的方法是「鳥槍法」又叫「散彈射擊法",另一種是人工合成基因,這種方法有兩條途徑,一是以目的基因轉錄的信使RNA為模板,反轉錄成互補的單鏈DNA,再在酶的作用下合成雙鏈DNA,即目的基因,另一條途徑是蛋白質的氨基酸序列,推測出信使RNA序列,再推測出結構基因的核苷酸序列,然後用化學的方法以單核苷酸為原料合成。
PCR技術是擴增目的基因的方法,不應該算作獲取目的基因的途徑。

㈥ 獲取目的基因最方便的方法

獲取目的基因的方法有:從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術擴增目的基因、用化學方法直接人工合成.
在目的基因的序列為未知的情況下,可以採用從基因文庫中獲取目的基因;在目的基因比較小,核苷酸序列已知的情況下常採用人工合成法.所以在已知某小片段基因鹼基序列的情況下,獲得該基因的最佳方法是以4種脫氧核苷酸為原料利用DNA合成儀化學方法直接合成.
故選:A.

㈦ 目的基因的制備方法有哪些

獲取目的基因的方法主要有兩種:

1、從供體細胞的DNA中直接分離基因,最常用的方法是「鳥槍法」又叫「散彈射擊法"。

2、人工合成基因:以目的基因轉錄的信使RNA為模板,反轉錄成互補的單鏈DNA,再在酶的作用下合成雙鏈DNA,即目的基因,另一條途徑是蛋白質的氨基酸序列,推測出信使RNA序列,再推測出結構基因的核苷酸序列,然後用化學的方法以單核苷酸為原料合成。

在基因克隆過程中目的基因就是要分離、純化、克隆並轉化到生物體的那個可以帶來預期表型性狀如抗蟲或耐除草劑的基因。



(7)目的基因的獲取最常用的方法是擴展閱讀:

目的基因可以是生物體本身的, 也可以是來自不同生物體的。比如Bt基因來自蘇雲金芽孢桿菌。

目的基因被成功地轉化並整合到受體細胞本身不能保證基因在新的遺傳環境中能得到准確的表達。必須進行測試以確定是否存在表達,在實際應用中,只有那些以足夠高的水平表達目的基因的轉基因生物才是有意義的。

如果轉基因後代分離比例不符合孟德爾遺傳規律,轉入的外源基因有可能幹擾了內源基因的表達。另一個原因是在受體基因組中的不同位點整合了兩個或更多個轉基因拷貝。這些都要進行育種試驗確認。

㈧ 目的基因的獲取

選修三的1.2基因工程基本操作中的目的基因獲取主要介紹了兩種方法。

一、從基因文庫中獲取目的基因。

形象的說,就是相當於「從圖書館中找到你要的那本圖書」。基因文庫是前人已經構建好的受體菌群體,整個群體已經包括所有該物種的基因,你只需要通過目的基因的位置或轉錄產物mRNA、蛋白質等的特異性的表現,與基因文庫中的基因產物一致性找出文庫中的目的基因。

二、通過PCR擴增獲取目的基因。

關鍵是設計目的基因上游的引物,通過DNA復制,從引物開始延伸出引物後的DNA序列,從而得到你要的目的基因。

3,我最近學的還有
化學法
是知道了核苷酸序列
用人工合成的方法得到

㈨ 簡述目的基因獲取的方法

目的基因的獲取方法主要有以下2類
(1)已知基因的獲得 PCR分離法和化學合成法等
(2)未知基因的獲得 直接分離法和基因文庫分離法等
直接分離法
1、限制性內切酶法
用限制性內切酶把基因組DNA切成不同大小的片斷
應用對象 適合於從簡單的基因組中分離目的基因 如質粒或病毒的大小隻有幾千鹼基 大的也超不過幾十萬鹼基 編碼基因比較少 獲得也比較簡單
(1)對已定序列的DNA分子 只需要用已知識別序列的限制內切酶進行一次或幾次切割 分離純化所需要的DNA片斷 與適當載體連接
(2)對已知定位的目的基因 只要根據目的基因兩側的已知的酶切識別位點 一次就可以獲得
(3)即使含目的基因的DNA分子未定序或定位 也只須通過酶切分析 隨後再通過部分酶切 構建一個簡單的基因文庫 從鉤出目的基因

㈩ 在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑

(1)在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑,即人工合成和從生物材料中分離,人工合成可通過反轉錄法或人工化學合成法,從生物材料中分離即通過基因文庫法.
(2)由於cDNA文庫中只含有葉細胞已轉錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因,故兩個文庫相比,cDNA文庫中含有的基因數目比基因組文庫中的少.
(3)基因表達載體的組成包括目的基因+啟動子+終止子+標記基因,其中啟動子是RNA聚合酶識別並結合的部位;若採用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,由於細菌繁殖速度快,故最常用的原核生物是大腸桿菌等細菌.
(4)基因槍法是單子葉植物中常用的一種基因轉化方法,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉顆粒,成本較高.
故答案為:
(1)人工合成 生物材料
(2)cDNA文庫中只含有葉細胞已轉錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因
(3)RNA 大腸桿菌(或答細菌)
(4)金粉 鎢粉

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