Ⅰ 怎樣用bio凝膠成像系統拍攝瓊脂糖電泳凝膠
BIO-RAD凝膠電泳成像系統的操作方法
1.接通電源和照相機電源
2.打開開關,預熱30分鍾
3.打開軟體,文件菜單中gel-doc.xr
4.按live/focus,30s後按autoexpose or manualexpose
5.調iris,zoom ,focus調節圖像清晰度,之後按freeze拍照,保存。
BIO-RAD 凝膠成像系統 Universal Hood Ⅱ
儀器性能:
拍攝對象:核酸瓊脂糖凝膠電泳
X光膠片
軟體功能:獲取並處理圖像
測定圖像光密度
操作步驟:
1. 開啟成像系統,電腦電源
2. 打開Quality One軟體,調整光源所示圖像
3. 觀察並調整曝光時間,獲得圖像並保存
4. 調整圖像,並對圖像進行光密度分析
5. 關閉所有電源
Ⅱ 凝膠成像系統怎麼使用
凝膠成像很簡單啊,等於就是一個相機,一個紫外透照台,一個暗室,照相用的。看說明書怎麼在電腦上照相就好了,照相機會使吧?調焦距,對焦,調光圈,要是不會用相機的請移步補一補攝影基本知識。
Ⅲ 凝膠電泳分析軟體gelpro使用方法2.如何拍攝凝膠的照片
正確地拍攝凝膠照片比使用軟體更重要。最好是有一台凝膠成像系統,用它來拍攝凝膠圖片。用自己的數碼相機來拍攝凝膠圖片是不行的,如果要作圖像分析,就更不行了。
上一篇已經說到凝膠成像系統有三大件,暗箱,相機與電腦上的控制分析軟體。就按這個順序說吧。
暗箱里是四組照片燈光。最常用的是透射紫外燈箱與透射白光板。作過凝膠電泳的同學都用過紫外燈箱,暗箱里也是這東西。紫外燈箱是觀察EB染色的核酸電泳的。白光板則用來拍攝SDS PAGE凝膠。
圖片:紫外燈箱。注意暗箱後壁上還有塊板可以拉下來,那就是白光板。
圖片:其實白光板與醫院里看X-光片的燈箱是一個道理。看SDS PAGE凝膠就得放在這個上面。放在桌子上自己用數碼相機拍張照片是不行的。
1.凝膠要拍大一點,讓它充滿畫面。
2.曝光不能過度。這會導致條帶的分析產生錯誤。此時最亮的條帶會呈現為一個大白斑。
3.加樣孔放在上面,凝膠塊要擺得橫平豎直。如果是豎長條的凝膠,也可以橫著拍攝,然後用旋轉圖片的方法把加樣孔轉到上方。
4.圖片要以12位灰度甚至16位灰度保存為TIFF格式。不能存為jpeg圖片。下面圖片上的那些馬賽克就是gpeg惹的禍。
各種凝膠成像系統的具體操作方法當然是不同的,不過它們都是下面這個程序:
1.放入凝膠塊,調整其位置,(在後面的過程中還需要細調其位置讓它處在畫面中間)
2.關上門,打開相對應的燈光。(手控的光源開關在暗箱上,程序控制的在軟體的暗箱控制項模塊上)
3.調整相機鏡頭的光圈及曝光時間以調整圖像亮度,變焦調整圖像的放大與縮小,讓凝膠圖像盡量充滿整個畫面。還有個對焦距的功能,使圖像清晰。
4.拍攝照片。要保存為TIFF圖片格式,如果相機夠好,還能保存為12位灰度的圖片文件。
Ⅳ pcr及凝膠成像系統使用注意事項
PCR:
1,加樣准確;
2,不要交叉污染;
3,酶要低溫保存,最好冰上操作;
4,管蓋要蓋緊,防止揮發
凝膠成像:
1,如果是EB染料,要注意人身安全,分清污染區和非污染區;花青類染料不此問題。
2,如果是紫外發光,要注意紫外線防護,保護眼睛;可見光成像則無此問題。
3,如需切膠回收,注意避免長時間紫外照射,以免PCR產物斷裂,可見光成像則無此問題。
Ⅳ 請說明基因工程實驗操作中主要使用的儀器及其使用方法
凝膠成像儀基本使用說明
1 打開凝膠成像儀電源(機器後部),開電腦;
2 將染色後凝膠用水沖洗後,將凝膠放在透射板正中,並關嚴暗倉門;
3 打開GeneSnap軟體,在軟體界面中點擊綠色按鈕,打開鏡頭,該按鈕會變成紅色,如凝膠在屏幕上未出現,可適當調節光圈(綠色按鈕下左一),使圖象到達合適亮度,調整圖象大小(綠色按鈕下中間)及清晰度(綠色按鈕下右一);
4 待圖象最優化時,點擊紅色按鈕使之變成綠色,成像保留在屏幕上,點擊「Save」保存為.Sgd格式文件,用於使用「Gene Tools」軟體分析;或點擊「Save As」,在下拉菜單中 選取合適的圖象類型後,生成該類型的圖形文件,如「.jpg; .bmp; .gif」等;
5 關閉軟體(如未保存圖象此時會提示);
6 打開暗倉門,拉出透射台,凝膠用PE手套包住後丟棄,並沖洗透射板;
7 關上暗倉門,並關閉電源。
注意:
1 開關倉門時防止將EB沾在倉門蓋上,如不慎沾上EB,擦乾後用水沖洗;
2 不推薦使用自動曝光;
3 透射板紫外燈壽命有限,調整圖象後及時成像;
4 凝膠應及時清理,防止凝膠固化後貼附在透射板上,造成成像不清晰;
5 如需對垂直電泳凝膠成像,需在透射台上加裝白光透射板,並調整「Transilluminator」為「Lower light」,其他操作相同;
6 請勿用該電腦處理文檔等,如需拷貝圖片,請將移動盤格式化後再插入。
穩壓穩流電泳儀使用方法
1、使用時,先接好輸入電源線,然後連接電泳槽,選擇需要的穩定方式(穩壓或穩流),和合適的電壓電流開關檔位,再開啟電源開關,調節電位器旋鈕,使輸出電壓或電流達到設定值即可。
2、為保證電泳實驗的安全,本機設有限流和短路雙重保護裝置。在穩壓檔,當負載(電泳槽)電阻緩慢變小,使電流不斷增大時,限流保護使輸出電流不超過 120mA。限流保護起作用時,輸出電壓自然降低,不再穩壓,以滿足歐姆定律:電流=電壓/電阻。
3、當輸出端不慎短路,或負載電阻突然減小以致輸出大大超過100mA時,短路保護裝置立即切斷輸出,同時面板上的紅色發光管亮,指示曾發生過短路故障。此時關閉電源開關,排除短路故障,再重新開啟電源開關,即能恢復工作。
於穩流檔使用時,輸出禁止開路(即不接電泳槽)。
電泳儀使用時應放置通風乾燥處。
恆溫金屬浴(CHB-100)操作卡
開機前檢查:
電源線插頭已經可靠插入電源插座中,電源線接地可靠。
溫度設置:
1、打開電源開關,所有的指示燈和數碼管都亮。大約5秒後即時溫度顯示窗(PV)顯示的數字為金屬模塊的即時溫度,設置溫度顯示窗(SV)顯示的數字為上一次使用的設置溫度。
2、按壓(設置/SET)鍵一次,此時設置溫度顯示窗(SV)最左邊數字閃爍,用上下鍵可更改閃爍數字到所需數值。
3、再按壓(設置/SET)鍵一次,閃爍數字右移一位,用上下鍵更改閃爍數字直至所需數值。
4、再按壓(設置/SET)鍵一次,閃爍數字右移一位,同樣用上下鍵更改閃爍數字直至所需數值,完成溫度的設置工作。或再次按壓(設置/SET)鍵又從左邊重新開始設置。
5、溫度設置完成後8秒,數字閃爍現象消失,表示本機系統進入運行狀態,並按照當前設定的溫度值運轉。
超聲波細胞粉碎儀操作步驟及使用說明
超聲波細胞粉碎儀操作步驟:
1、打開超聲波細胞粉碎儀的電源開關,指示燈亮。
2、按「設定」鍵,顯示窗1(工作/間歇)顯示「-1」,進入間隔時間設定狀態,此時顯示窗3 (溫度)顯示的是原始數據或「--」,按置數鍵設定間隔時間(建議1秒)。
3、按功能鍵,顯示窗1顯示「-2」,進入超聲時間設定狀態,按置數鍵設定超聲時間(最好5秒以下,建議1秒)。
4、按功能鍵,顯示窗1顯示「-3」,進入全程時間設定狀態,按置數鍵設定全程時間(此時時間單位為分)。
5、按功能鍵,顯示窗1顯示「-4」,進入溫度保護設定狀態,按置數鍵設定保護溫度(0-40℃)。
6、按設定鍵結束設定並按「復位」鍵復位,按啟動/暫停鍵開始超聲粉碎,全程時間到後顯示顯示窗閃爍跳動並自動報警停止工作。
7、如需重復上述實驗,先按超聲波細胞粉碎儀的清零再按啟動鍵。如工作中需要暫停,再次按啟動/暫停鍵。
離心機使用說明書 使用說明:
1、本機採用三眼安全插座,使用前應接妥地線,工作時,應將本機放置在平整而堅固的檯面上。
2、首先查看定時器旋鈕,應在「0」位置,然後接通電源,開電源開關,指示燈亮。
3、具體操作必須按如下步驟:
a、打開蓋板,小心地將試樣放置於離心護管內。注意:對稱的離心護管內必須放入同樣重量的試樣,其重量偏差不大於1克。
b合上蓋板,調節速度至所需值。
c將定時器旋至所需的時間值(「ON」 為常閉位置),定時器一離於「0」位置,轉盤即開始旋轉,離心機工作。
d工作一定時間後,定時器回復到「0」位置,轉盤停止旋轉,離心機停止工作。本機使用完畢後,關閉開關,將本機置於乾燥、通風陰涼處,並保持其清潔
PCR儀使用說明書
步驟:
1、開機:打開開關,視窗上顯示「SELF TEST」,顯示10秒中後,顯示RUN-ENTER菜單:「-RUN ENTER PROGRAM PROGRAM 」准備執行程序。
2、放入樣本管,關緊蓋子。
3、如果要運行已經編好的程序,則直接按《Proceed》,用箭頭鍵選擇已儲存的程序,按《Proceed》,則屏幕顯示:「-ENABLE DISABLE HEATED LID」 按《Proceed》選擇ENABLE,則開始執行程序。
4、如果要輸入新的程序,則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTER PROGRAM,按《Proceed》,屏幕顯示 「 -NEW LIST EDIT DELET」,按《Proceed》,1)選擇NEW,命名新的程序,最多8個字母,輸入後按《Proceed》確認。
2)輸入程序步驟:名字輸入後,顯示「 STEP1 _TEMP GOTO OPITON END」,按《Proceed》則可以輸入溫度(0~100℃),按《Proceed》確認後,則可以輸入孵育時間,用《Select》鍵移動游標,輸入數字,完成後按《Proceed》確認,跳到下一步,輸入方式同上。
3)選擇GOTO,輸入循環步驟時鏈接到第幾步(循環數最多可達9999次)(為實際循環數-1)。
4) 選擇option,顯示「STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE 」再選擇increment,按《Proceed》確認,輸入初始的溫度,確認後輸入時間,按《Proceed》確認,然後輸入每個循環增加或減少的溫度,增加用正值,減少用負值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》確認。選擇extend,按《Proceed》確認,輸入每個循環增加或減少的時間(-60~60秒),按《Proceed》確認。
選擇slop(指溫度上升或下降的速率),輸入溫度的改變值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》確認,然後輸入加熱或致冷的速度,按《Proceed》確認。
4)選擇End,輸入結束步驟。
5、輸入完成的程序後,到RUN-ENTER菜單,選擇新程序,開始運行。
6、其它:用《pause》可以暫停一個運行的程序,再按一次繼續程序。用《stop》或《Cancel》可停止運行的程序。
製冰機使用說明書使用方法
1.取下外包裝,並從儲冰盒中取出隨機所附文件袋及進水管、排水管、冰勺、密封墊等附件.
2.將製冰機放置通風處,與牆保持不少於150mm的空間,遠離熱源,確保機器平穩放置。
3.將隨機所附的一根12的軟塑波紋排水管與機器背部的出水管7相接,另一埠置於積水盒(自配)或下水道口內。
4.將隨機所附的進水管一端連接到可飲用自來水供水管的帶3/4"螺紋接頭的水龍頭上,供水管的水壓1.5一3kg/cm2,另一端與製冰機背部的水閥螺紋接頭6相連,注意在連接時,進水管兩端均需放置密封墊(隨機配)。
5.擰開自來水龍頭,保證進水管水流暢通。
6.插上電源插頭,按下操作面板上的翹板開關,這時製冰機開始工作,製冰機從進水一製冰、脫冰、儲冰實行全自動連續製冰,如果儲冰箱內的冰量達到一定程度,操作面板2上的冰滿燈會亮,製冰機自動停機;當外部供水管(或純水給水系統)出現斷水或供水故障時,製冰機操作面板上缺水燈會亮,製冰機自動停機。 儀器還有好多 ,歡迎追問
Ⅵ 凝膠成像分析系統採用的是什麼方法
凝膠成像分析系統用於對電泳凝膠圖像的分析研究,採用數字攝像頭將置於暗箱內的電泳凝膠在紫外光或白光照射下的影像取進計算機,
通過相應的凝膠分析軟體,可一次性完成DNA、RNA、蛋白凝膠、薄層層析板等圖像的分析,最終可得到凝膠條帶的峰值、
分子量或鹼基對數、面積、高度、位置、體積或樣品總量。
Ⅶ 凝膠成像系統的介紹
蘇州海思源
化學發光成像系統JP-K600plus冷卻溫度:低於環境溫度65℃(溫度-45℃,動態實時顯示CCD製冷溫度,像素:2750(H)×2200(V)
解析度:605萬像素,鏡頭:F/0.95,清晰大口徑通透微距定焦鏡頭,採集位數:16bit,紫外透射:200×200mm雙側反射:200×50mm白光:210×260mm
化學發光成像系統適用於化學發光、多色熒光檢測與普通凝膠檢測,選用了高解析度低照度進口製冷CCD,並上乘結合大光圈電動鏡頭,可捕獲到極微弱的熒光和化學發光信號。化學發光成像系統JP-K600plus深度製冷的CCD,較大程度的消除了背景雜訊,超大光圈鏡頭,收集微弱信號。化學發光成像系統JP-K600plus可選的多種熒光光源以及多位電動濾光片輪,滿足核酸成像、ECL成像等多種實驗需求。
核酸檢測:各種熒光染料,如Ethidium
bromide,SYBRTMGold, SYBRTMGreen, SYBRTMSafe, GelStarTM, Fluorescein, Texas
Red標記的DNA/RNA檢測。
蛋白檢測:考馬斯亮藍膠,銀染膠,以及熒光染料如SyproTMRed, SyproTMOrange,Pro-Q
Diamond, Deep Purple 標記膠/膜/晶元等。
印跡膜:Western
Lightning、ECL、ECLplus、CDP
Star、SuperSignal、CSPD、LumiGlo、Cy2、Cy3、Cy5、FITC、AlexaDyes、DyLight
dyes、ProQDiamond、ProQ Emerald 300、ProQEmerald 488、IR Dye 680 等。
Ⅷ 凝膠成像系統的應用范圍
總體上來說凝膠成像可應用於:凝膠成像系統可以用於:蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析。
(1)分子量定量
對於一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,並以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要准確很多。
(2)密度定量
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟體,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標准條帶進行密度標定以後,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用於對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
(3)密度掃描
在分子生物學和生物工程研究中,最常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟體結合現在實驗室常規配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
(4)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那麼可以利用軟體計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上並不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量並計算其占總和的百分數,密度掃描時並對選擇區域生成縱向掃描曲線圖並積分。
Ⅸ 如何使用凝膠成像系統測量分子量
拍攝對象. 調整圖像,調整光源所示圖像
3,預熱30分鍾
3:獲取並處理圖像
測定圖像光密度
操作步驟,電腦電源
2,獲得圖像並保存
4:
1,30s後按autoexpose or manualexpose
5. 觀察並調整曝光時間. 打開Quality One軟體:核酸瓊脂糖凝膠電泳
X光膠片
軟體功能.調iris. 開啟成像系統.打開開關,之後按freeze拍照.xr
4。
BIO-RAD 凝膠成像系統 Universal Hood Ⅱ
儀器性能,保存,focus調節圖像清晰度BIO-RAD凝膠電泳成像系統的操作方法
1.按live#47.接通電源和照相機電源
2,文件菜單中gel-doc,並對圖像進行光密度分析
5;focus,zoom .打開軟體
Ⅹ 凝膠成像系統的常見問題
1、是不是像素越高,產品就越好?
像素是要針對成像設備來看的,比如數碼相機與CCD的像素就不具備可比性,其次CCD本身的質量比單純的像素高低更重要。對於同級別CCD最重要的指標是其大小,也就是CCD尺寸,尺寸越大其本身價值就成幾何倍地增長。
2、配件紫外反射燈源的主要用途為何?
紫外反射燈源使用並不廣泛,主要是提供非透明材質的DNA跑膠載體如紙層析等的成像需要而使用。由於比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯醯胺凝膠,透射光源完全可以滿足,因此將紫外反射光源作為選配件不列入標配中。
3、能否在凝膠成像上直接切膠?
凝膠成像可以,如需直接切膠,首先按系統中間的觀察窗,打開裝有進口防紫外玻璃的觀察窗口,然後打開左右兩側專為割膠所設計的小門,即可進行切膠操作。
4、如何調節焦距 聚焦 光圈以獲得高質量的圖片?
三個最重要的可調參數分別是焦距 聚焦和光圈。其中焦距調節清晰度,聚焦調節圖像大小,光圈調節明暗。一般先把光圈調節到適宜的亮度後,再調節聚焦將圖像放到最大,最後調解焦距,在圖像較大的情況下焦距比較容易調節到最清晰狀態,然後再把圖像縮放在適宜大小後成像即可。